Влияние потребления с пищей сухих цельнопищевых концентратов (Juice Plus) на клинические исходы после периодонтальной терапии: пилотное исследование (BHAM-NSA-05-01)

Это будет продольное, рандомизированное, стратифицированное (по возрасту), двойное слепое исследование нехирургического пародонтологического лечения в трех группах. 3 руки будут:

1. Daily Juice Plus+ с 2 овощными, 2 фруктовыми и 2 ягодными капсулами (тестовая группа 1)
2. Daily Juice Plus+ с 2 овощами, 2 фруктами и 2 капсулами плацебо (тестовая группа 2)
3. Daily Placebo в форме 6 капсул (контрольная группа)

Добровольцы получат стандартную нехирургическую терапию пародонта одним оператором (гигиенистом-исследователем), а показатели результатов будут оцениваться на исходном уровне, через 3, 6 и 9 месяцев после терапии. Капсулы следует принимать во время еды два раза в день (3 капсулы утром и 3 капсулы вечером).

60 некурящих пациентов с хроническим пародонтитом средней и тяжелой степени будут набраны из амбулаторных пародонтологических клиник Стоматологической больницы Бирмингема. Субъекты будут в возрасте 30-60 лет, мужчины или женщины. Хронический периодонтит (ХП) будет определяться как наличие 2 или более очагов в каждом квадранте с образованием карманов или потерей интерпроксимального прикрепления > 6 мм и рентгенографической потерей кости на 1/3.

Будут применяться следующие критерии исключения:

• Пациенты с агрессивным заболеванием
• Пациенты с физическими или умственными недостатками
• Беременные женщины
• Пациенты, история болезни которых может подвергать их риску осложнений пародонтологического лечения (например, необходимость прикрытия антибиотиками, варфаринизированные субъекты)
• Пациенты, длительно принимающие противомикробные или противовоспалительные препараты
• Пациенты, которые не могут проглотить капсулы Juice Plus+
• Пациенты, неспособные дать информированное согласие
• Текущие курильщики
• Пациенты, регулярно принимающие витаминные добавки

Показатели исхода Основными показателями исхода заживления будут увеличение уровня прикрепления и уменьшение глубины кармана при зондировании через 3 месяца. Кроме того, в качестве первичного критерия оценки воспаления тканей будет использоваться уменьшение процентного соотношения участков кровотечения при зондировании (BOP - дихотомически измеряется в 4 участках на зуб) из маргинальных тканей и покраснения десен, оцениваемого визуально (модифицированный индекс десны-MGI).

Вторичными показателями результата будут снижение % участков с выявленным зубным налетом (PS - измеряется дихотомически в 4 участках на зуб), уменьшение объема жидкости десневой борозды (GCF), увеличение GCF и TAOC плазмы.

Измерения будут выполняться в двух повторах с помощью датчика постоянного усилия (UNC PC15), и если разница между дублирующими измерениями превышает 1 мм, будет выполнено 3-е измерение. Будет записано среднее значение двух ближайших измерений. Средние показатели прикрепления зонда и глубины кармана для каждого субъекта будут рассчитываться в каждой точке исследования (исходный уровень, через 3, 6 и 9 месяцев после терапии).

Показатели кровотечения и бляшек будут выражены как средние значения для субъекта в каждой точке исследования, а баллы MGI - как % участков с кодами 0, 1, 2 и 3 для каждого субъекта.

Образцы Образцы GCF будут собраны (30 с) с использованием полосок Periopaper из мезио-щечных аспектов 3 глубоких (> 6 мм) и 3 мелких (

Образцы крови (2 x 7 мл) будут собраны в пробирки Vacutainer™ для плазмы. Плазму, обедненную тромбоцитами, готовят центрифугированием при 1000 g в течение 30 минут (4C). Аликвоты плазмы будут разделены на криогенные флаконы, и половина будет быстро заморожена в жидком азоте до анализа TOAC. Оставшаяся половина будет разделена на аликвоты в два криогенных флакона по 1,5 мл и храниться при температуре -80°C для будущего использования (например, анализ активности каротиноидов). Все образцы будут храниться в темноте и защищены от прямых солнечных лучей на всех этапах обработки.

Усовершенствованный хемилюминесцентный анализ (ECL) для общей антиоксидантной способности (TAOC) ECL-анализ для общей антиоксидантной способности (TAOC) был разработан нашей группой 12 и основан на катализируемом пероксидазой хрена окислении люминола перекисью водорода. Люминометр BioOrbit 1250 (Labtech International, Сассекс, Великобритания), соединенный с компьютером с установленным программным обеспечением, которое позволяет одновременно записывать/отображать до 5000 точек данных в течение периода до 1 часа, используется для количественной оценки светоотдачи. Усилитель, п-йодофенол, больше не продается, а синтезируется «на месте». Антиоксидантная способность испытуемых образцов будет получена из стандартных кривых, полученных с использованием водорастворимого аналога витамина Е, 6-гидрокси-2,5,7,8, тетраметилхроман-2-карбоновой кислоты (тролокс; диапазон анализа: 0,0625-1,6 наномоль). которые будут выполняться до и после тестовых образцов и результатов, выраженных в виде концентрации (мкМ эквивалентов Trolox/л; Teq/л).

Все образцы от каждого субъекта на протяжении всего исследования (n = 12: 8 GCF, включая 1 объединенный из глубоких участков и 1 объединенный из неглубоких участков при каждом из 4 посещений и 4 образца плазмы) будут проанализированы в один и тот же день и в одной и той же лаборатории. условия, в двух экземплярах (всего = 24 на предмет). Каждый день будут анализироваться образцы от субъекта тестовой группы 1, субъекта тестовой группы 2 и контрольного субъекта. Все анализы будут выполняться за 10–12 часов лабораторного времени в день и более 20 лабораторных дней (72 анализа в день и 36 стандартов = 108 анализов в день).

Образцы GCF будут разморожены, элюированы в рабочем буфере за 30 минут до анализа, когда аликвоты по 100 мкл будут проанализированы в двух экземплярах. Образцы плазмы будут разбавлены 1:10 в рабочем буфере PBS/BSA и проанализированы в виде аликвот по 20 мкл в двух экземплярах.

Калибровки будут выполняться в начале, середине и конце каждого дня.

Статистический анализ Это будет выполнено независимым статистиком, назначенным National Safety Associates Inc. Все три гипотезы исследования предполагают, что два субъекта с одинаковым начальным уровнем привязанности и глубиной кармана будут иметь одинаковый ожидаемый конечный уровень привязанности и глубину кармана, за исключением эффекта их соответствующего лечения. Таким образом, первые две гипотезы будут исследованы с использованием ковариационного анализа с трехмесячным значением уровня привязанности или глубины кармана в качестве ответа, начальным значением в качестве ковариаты и лечением в качестве фактора исследования. Гипотеза 3 будет исследована аналогичным образом, за исключением того, что ответом будет 9-месячное измерение.

Чтобы проверить гипотезы 1 и 3, группа плацебо будет сравниваться с двумя объединенными группами активного лечения. Чтобы проверить гипотезу 2, две группы активного лечения будут сравниваться.

Графические дисплеи и регрессионные модели будут использоваться для изучения того, связана ли реакция на активное лечение с потреблением субъектом фруктов и овощей, что измеряется данными визуальной аналоговой шкалы.

Вторичные результаты будут проанализированы аналогичным образом.

Будут выполняться как анализ намерения лечить (ITT), так и анализ по протоколу (PP). В анализе ITT будут использоваться данные всех субъектов, независимо от приверженности к лечению. В анализе PP статистические модели будут включать меры приверженности.

Все статистические тесты будут двусторонними и выполнены на уровне значимости 0,05. Анализы будут выполняться с использованием SAS для Windows версии 8.2 (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США) и SYSTAT версии 10.2.01 (SYSTAT Software Inc., Пойнт-Ричмонд, Калифорния, США).

Отсутствующие данные: Первичные показатели исхода принимаются как часть стандартного лечения в течение 9-месячного обзора субъектов. Нет никаких причин для того, чтобы отсутствующие данные были связаны с лечением или исходом. Мы проверим, связаны ли отсутствующие данные с назначением лечения, но в противном случае мы ожидаем, что сможем игнорировать отсутствующие значения в анализе, потому что они будут «отсутствовать совершенно случайно».

Взлом кода Коды будут храниться запечатанными и запертыми в офисе PI и не будут взломаны до тех пор, пока не будет завершен статистический анализ.

Расчет мощности Поскольку это экспериментальное исследование, невозможно выполнить расчет мощности на основе результатов антиоксидантной защиты. Тем не менее, используя первичный критерий результата уменьшения глубины кармана при зондировании и предполагая, что мы можем получить дополнительное уменьшение PPD на 0,5 мм (или 0,4 мм) по сравнению с одной нехирургической терапией за счет приема капсул Juice Plus+, тогда вероятность 80% обнаружение существенной разницы в p

Приверженность пациента Приверженность к приему добавок будет проверяться при каждом посещении во время активной терапии, а также при посещении через 3, 6 и 9 месяцев. Субъектам будет предоставлен лист данных для регистрации дней, когда они пропустили прием добавок. Кроме того, один криогенный флакон, содержащий не менее 500 мкл плазмы, будет храниться на исходном уровне, через 3, 6 и 9 месяцев после терапии для каждого субъекта и может использоваться для анализа каротиноидов для биохимической проверки приверженности.

Заявление GCP Это исследование будет проводиться в соответствии со стандартами Международной надлежащей клинической практики (GCP).

Документация и ведение записей Исследователь будет хранить и архивировать все документы и исходные (необработанные) данные, относящиеся к исследованию, в течение как минимум 10 лет.

Отчет о клиническом исследовании Интерпретация данных является совместной ответственностью исследователя и исследовательской группы. Заключительный отчет будет составлен в письменном виде и является обязанностью той же группы и будет включать:

• соответствующие статистические процедуры,
• любое отклонение от протокола;
• выводы относительно эффективности лечения и значимости любых различий между ними.