Wirkung der Nahrungsaufnahme von getrockneten Vollwertkonzentraten (Juice Plus) auf die klinischen Ergebnisse nach einer Parodontaltherapie: Eine Pilotstudie (BHAM-NSA-05-01)

Dies wird eine randomisierte, stratifizierte (nach Alter), doppelblinde, 3-armige Längsschnittstudie zur nicht-chirurgischen Parodontaltherapie sein. Die 3 Arme werden sein:

1. Daily Juice Plus+ mit 2 Gemüse- & 2 Obst- & 2 Beerenkapseln (Testgruppe 1)
2. Daily Juice Plus+ mit 2 Gemüse- & 2 Obst- & 2 Placebo-Kapseln (Testgruppe 2)
3. Tägliches Placebo in Form von 6 Kapseln (Kontrollgruppe)

Die Freiwilligen erhalten eine standardmäßige nicht-chirurgische Parodontaltherapie von einem einzigen Bediener (Studienhygieniker) und die Ergebnismessungen werden zu Studienbeginn sowie 3, 6 und 9 Monate nach der Therapie bewertet. Die Kapseln werden zweimal täglich zu einer Mahlzeit eingenommen (3 Kapseln morgens und 3 Kapseln abends).

60 Nichtraucherpatienten mit chronischer mittelschwerer/schwerer Parodontitis werden aus ambulanten Parodontalkliniken des Birmingham's Dental Hospital rekrutiert. Die Probanden sind 30-60 Jahre alt, männlich oder weiblich. Chronische Parodontitis (CP) wird definiert als das Vorhandensein von 2 oder mehr Stellen pro Quadrant mit Taschenbildung oder interproximalem Attachmentverlust von > 6 mm und 1/3 Röntgenknochenverlust.

Es gelten folgende Ausschlusskriterien:

• Patienten mit aggressiver Erkrankung
• Patienten mit körperlicher oder geistiger Behinderung
• Schwangere Frau
• Patienten, deren Krankengeschichte sie einem Risiko von Komplikationen einer Parodontaltherapie aussetzen könnte (z. Notwendigkeit einer Antibiotikadeckung, warfarinisierte Personen)
• Patienten, die langfristig antimikrobielle oder entzündungshemmende Medikamente einnehmen
• Patienten, die Juice Plus+ Kapseln nicht schlucken können
• Patienten, die keine Einverständniserklärung abgeben können
• Aktuelle Raucher
• Patienten, die regelmäßig Vitaminpräparate einnehmen

Ergebnismaße Die primären Ergebnismaße der Heilung sind Steigerungen des Attachmentniveaus und Verringerungen der Sondierungstaschentiefen nach 3 Monaten. Darüber hinaus wird die Verringerung des Prozentsatzes an Stellen, die beim Sondieren bluten (BOP – dichotom an 4 Stellen pro Zahn gemessen) aus den marginalen Geweben und der visuell bewerteten gingivalen Rötung (Modified Gingival Index-MGI) als primäres Ergebnismaß der Gewebeentzündung verwendet.

Sekundäre Ergebnismessungen sind die prozentuale Reduktion der Stellen mit freigelegter Plaque (PS – dichotom an 4 Stellen pro Zahn gemessen), die Reduktion des Volumens der Gingiva-Crevicular-Flüssigkeit (GCF), die Erhöhung der GCF und der Plasma-TAOC.

Die Sondierungsmessungen werden zweifach mit einem Messtaster mit konstanter Kraft (UNC PC15) durchgeführt und bei Differenzen zwischen doppelten Messungen von mehr als 1 mm wird eine 3. Messung durchgeführt. Der Mittelwert der beiden engsten Messungen wird aufgezeichnet. An jedem Untersuchungszeitpunkt (Basislinie, 3, 6 und 9 Monate nach der Therapie) werden durchschnittliche Sondierungsbefestigungs- und Taschentiefenmessungen pro Proband berechnet.

Die Blutungs- und Plaque-Scores werden als Mittelwerte pro Proband an jedem Untersuchungspunkt und die MGI-Scores als %-Stellen mit den Codes 0, 1, 2 und 3 pro Proband ausgedrückt.

Proben GCF-Proben werden mit Periopaper-Streifen von den mesio-bukkalen Aspekten von 3 tiefen (>6 mm) und 3 flachen (

Blutproben (2 x 7 ml) werden in Vacutainer™-Röhrchen für Plasma gesammelt. Blutplättchenverarmtes Plasma wird durch 30-minütige Zentrifugation bei 1000 g (4°C) hergestellt. Das Plasma wird in kryogene Fläschchen aliquotiert und die Hälfte wird unter flüssigem Stickstoff bis zum TOAC-Assay schockgefroren. Die verbleibende Hälfte wird in zwei 1,5-ml-Kryoröhrchen aliquotiert und bei -80 °C für die zukünftige Verwendung gelagert (z. Test auf Carotinoid-Aktivität). Alle Proben werden im Dunkeln gelagert und in allen Stadien der Handhabung vor direkter Sonneneinstrahlung geschützt.

Verbesserter Chemilumineszenz-Assay (ECL) für die gesamte antioxidative Kapazität (TAOC) Der ECL-Assay für die gesamte AO-Kapazität (TAOC) wurde von unserer Gruppe 12 entwickelt und basiert auf der durch Meerrettichperoxidase katalysierten Oxidation von Luminol durch Wasserstoffperoxid. Zur Quantifizierung der Lichtleistung wird ein BioOrbit 1250 Luminometer (Labtech International, Sussex, UK) verwendet, das mit einer PC-Software verbunden ist, die eine gleichzeitige Aufzeichnung/Anzeige von bis zu 5000 Datenpunkten über einen Zeitraum von bis zu 1 Stunde ermöglicht. Der Verstärker, p-Iodphenol, ist nicht mehr im Handel erhältlich, sondern wird "hausintern" synthetisiert. Die antioxidativen Kapazitäten der Testproben werden aus Standardkurven abgeleitet, die unter Verwendung des wasserlöslichen Vitamin-E-Analogons 6-Hydroxy-2,5,7,8, Tetramethylchroman-2-Carbonsäure (Trolox; Testbereich: 0,0625-1,6 Nanomol) erstellt wurden. die vor und nach den Testproben durchgeführt werden, und die Ergebnisse werden als Konzentration ausgedrückt (µM Trolox-Äquivalente/L; Teq/L).

Alle Proben von jedem Probanden während der Studie (n=12: 8 GCFs – bestehend aus 1 gepoolten von tiefen Stellen und 1 gepoolten von flachen Stellen bei jedem von 4 Besuchen und 4 Plasmaproben) werden am selben Tag und im selben Labor untersucht Bedingungen, in zweifacher Ausfertigung (insgesamt = 24 pro Fach). Jeden Tag werden Proben von einem Subjekt der Testgruppe 1, einem Subjekt der Testgruppe 2 und einem Kontrollsubjekt untersucht. Alle Assays werden in 10–12 Stunden Laborzeit pro Tag und über 20 Labortage durchgeführt (72 Assays pro Tag & 36 Standards = 108 Assays pro Tag).

GCF-Proben werden aufgetaut und 30 Minuten vor dem Assay in Laufpuffer eluiert, wenn 100-ul-Aliquots doppelt getestet werden. Plasmaproben werden 1:10 in PBS/BSA-Laufpuffer verdünnt und als 20-ul-Aliquots in zweifacher Ausfertigung getestet.

Kalibrierungen werden zu Beginn, in der Mitte und am Ende jedes Tages durchgeführt.

Statistische Analyse Diese wird von einem unabhängigen Statistiker durchgeführt, der von National Safety Associates Inc. Alle drei Studienhypothesen gehen davon aus, dass zwei Probanden mit dem gleichen anfänglichen Bindungsniveau und der gleichen Taschentiefe das gleiche erwartete endgültige Bindungsniveau und die gleiche Taschentiefe haben würden, mit Ausnahme der Wirkung ihrer jeweiligen Behandlungen. Daher werden die ersten beiden Hypothesen mithilfe der Kovarianzanalyse mit dem 3-Monats-Wert des Bindungsniveaus oder der Taschentiefe als Antwort, dem Anfangswert als Kovariate und der Behandlung als Studienfaktor untersucht. Hypothese 3 wird auf ähnliche Weise untersucht, außer dass die Antwort die 9-Monats-Messung ist.

Um die Hypothesen 1 und 3 zu testen, wird die Placebo-Gruppe mit den beiden aktiven Behandlungsgruppen kombiniert verglichen. Um Hypothese 2 zu testen, werden die beiden aktiven Behandlungsgruppen verglichen.

Grafische Darstellungen und Regressionsmodelle werden verwendet, um zu untersuchen, ob die Reaktion auf die aktiven Behandlungen mit der Obst- und Gemüseaufnahme einer Testperson zusammenhängt, wie sie anhand der Daten der visuellen Analogskala gemessen wird.

Sekundäre Ergebnisse werden auf ähnliche Weise analysiert.

Es werden sowohl Intention-To-Treat (ITT)-Analysen als auch Per Protocol (PP)-Analysen durchgeführt. In den ITT-Analysen werden die Daten aller Probanden verwendet, unabhängig von der Einhaltung der Behandlung. In den PP-Analysen werden die statistischen Modelle Maßnahmen zur Einhaltung beinhalten.

Alle statistischen Tests sind zweiseitig und werden auf dem Signifikanzniveau 0,05 durchgeführt. Die Analysen werden mit SAS für Windows, Version 8.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) und SYSTAT, Version 10.2.01 (SYSTAT Software Inc., Point Richmond, CA, USA) durchgeführt.

Fehlende Daten: Die primären Ergebnismessungen werden im Rahmen der Standardversorgung während der 9-monatigen Überprüfung der Probanden durchgeführt. Es gibt keinen Grund dafür, dass fehlende Daten mit der Behandlung oder dem Ergebnis zusammenhängen. Wir werden prüfen, ob das Fehlen von Daten mit der Behandlungszuordnung zusammenhängt, erwarten aber ansonsten, dass wir fehlende Werte in den Analysen ignorieren können, da sie „völlig zufällig fehlen“.

Codeknacken Die Codes werden versiegelt und verschlossen im Büro des Privatdetektivs aufbewahrt und nicht geknackt, bis die statistische Analyse abgeschlossen ist.

Leistungsberechnung Da es sich um eine Pilotstudie handelt, ist es nicht möglich, eine Leistungsberechnung basierend auf antioxidativen Ergebnissen durchzuführen. Unter Verwendung des primären Ergebnismaßes der Verringerung der Sondierungstaschentiefe und der Annahme, dass wir zusätzliche PPD-Reduktionen von 0,5 mm (oder 0,4 mm) gegenüber der nicht-chirurgischen Therapie allein durch Supplementierung mit Juice Plus+-Kapseln erreichen können, liegt die Wahrscheinlichkeit bei 80 % einen signifikanten Unterschied am p finden

Adhärenz der Patienten Die Adhärenz bei der Einnahme von Nahrungsergänzungsmitteln wird bei jedem Besuch während der aktiven Therapie und erneut bei den Besuchen nach 3, 6 und 9 Monaten überprüft. Die Probanden erhalten ein Datenblatt, um die Tage zu protokollieren, an denen sie die Einnahme von Nahrungsergänzungsmitteln versäumt haben. Darüber hinaus wird ein kryogenes Fläschchen mit mindestens 500 ul Plasma zu Studienbeginn sowie 3, 6 und 9 Monate nach der Therapie für jeden Probanden archiviert und kann für einen Carotinoid-Assay zur biochemischen Überprüfung der Adhärenz verwendet werden.

GCP-Erklärung Diese Studie wird in Übereinstimmung mit den Standards der International Good Clinical Practice (GCP) durchgeführt.

Dokumentation und Aufbewahrung von Aufzeichnungen Der Prüfer bewahrt und archiviert alle Dokumente und Quell-(Roh-)Daten, die sich auf die Studie beziehen, für einen Zeitraum von mindestens 10 Jahren.

Klinischer Studienbericht Die Interpretation der Daten liegt in der gemeinsamen Verantwortung des Prüfarztes und des Studienteams. Ein Abschlussbericht wird schriftlich erstellt und liegt in der Verantwortung derselben Gruppe und umfasst:

• geeignete statistische Verfahren,
• jede Abweichung vom Protokoll;
• Schlussfolgerungen hinsichtlich der Wirksamkeit der Behandlungen und der Bedeutung etwaiger Unterschiede zwischen ihnen.