DC-STAMP & TRAF3: Regulatorer av osteoklastogenese og biomarkører i PsA (Incubator)

Psoriasisartritt (PsA), en inflammatorisk leddsykdom assosiert med psoriasis (Ps), rammer omtrent 650 000 voksne i USA og er assosiert med økt sykelighet og dødelighet. Beinskader utvikler seg hos halvparten av disse pasientene i løpet av de to første årene av sykdommen, og etterlater dem ofte med nedsatt funksjon og redusert livskvalitet. Fremveksten av anti-tumornekrosefaktorterapier (TNFi) har dramatisk forbedret klinisk respons og redusert nedbrytning av ben og brusk hos PsA-pasienter, men bare 50-60 % av pasientene reagerer på disse midlene. For å forbedre disse resultatene, må etterforskerne adressere to store hull: en begrenset forståelse av nøkkelhendelser som ligger til grunn for patologisk beinødeleggelse og fraværet av biomarkører for å forutsi TNFi-respons og identifisere tidlige TNFi-respondere for å lette optimalisering av terapi.

Beinskade medieres av osteoklaster som oppstår fra monocytt-forløpere i blodet. Osteoklastprekursorer (OCP) øker dramatisk i PsA sammenlignet med kontroller, spesielt hos pasienter med beinskade på røntgen. Antallet av disse sirkulasjonsforløpercellene falt raskt etter behandling med TNFi. OCP-er kan tjene som responsbiomarkører, men kostnad, tid og høy variabilitet begrenser disse analysene. Osteoklastforløpere uttrykker dendritisk cellespesifikt transmembranprotein (DC-STAMP), som er et syv-pass transmembranprotein som kreves for fusjon av monocytter for å danne osteoklaster og gigantiske celler. Monocytt DC-STAMP-nivåer falt raskt etter behandling med TNFi. TNF-reseptorassosiert faktor 3 (TRAF3), en hemmer av OC-dannelse som korrelerer med ekstracellulære TNF-konsentrasjoner, er forhøyet i OCP fra PsA-pasienter. Disse markørene kan forutsi TNFi-behandlingsrespons.

Målet med denne studien er å undersøke pasienter med psoriasisartritt før og etter biologisk behandling med standardbehandling som TNFi, samtidig som DC-STAMP og TRAF3-ekspresjon undersøkes i en tverrsnittsanalyse av pasienter på stabile orale sykdomsmodifiserende midler (DMARDS) og hos pasienter i lav sykdomsaktivitetstilstand på TNFi-behandling.

• Forskningsanalyser:

Korrelasjonen mellom TRAF3- og DC-STAMP-ekspresjon på RNA- og proteinnivå kan undersøkes for to baseline PsA-pasienter ved sanntids PCR, flowcytometri og western etter klorokin (CQ) blokade, som forhindrer TRAF3-nedbrytning. Celler isolert fra human PBMC kan sterilsorteres før bruk i noen in vitro-analyser. Sorterte celler kan behandles med CQ eller MG132, en proteasomhemmer, i OC-fremmende medier i tidsforløp og dose-respons-eksperimenter og OC-er telles for å bestemme om DC-STAMP brytes ned av lysosomet eller proteasomet.

Perifere blod mononukleerte celler (PBMC) vil bli isolert fra blod ved sentrifugering. Disse cellene kan brukes til flowcytometri for å analysere TRAF3- og DC-STAMP-ekspresjon på monocytter sammen med OC-kvantifisering ved baseline og/eller ca. 4 måneders behandling. DC-STAMP-overflateekspresjon på PBMC fra PsA-pasienter korrelerte med antall OCP i kultur og nivået av DC-STAMP på CD14+-monocytter falt betydelig hos PsA-pasienter etter TNFi. Nedgangen i DC-sTAMP+CD14+-celler kan tjene som et mål på tidlig respons på TNFi.