DC-STAMP & TRAF3: Reguladores da Osteoclastogênese e Biomarcadores na APs (Incubator)

A artrite psoriática (APs), uma doença articular inflamatória associada à psoríase (Ps), afeta aproximadamente 650.000 adultos nos Estados Unidos e está associada ao aumento da morbidade e mortalidade. O dano ósseo se desenvolve em metade desses pacientes nos primeiros dois anos da doença, muitas vezes deixando-os com função prejudicada e qualidade de vida diminuída. O surgimento de terapias antifator de necrose tumoral (TNFi) melhorou drasticamente a resposta clínica e retardou a degradação óssea e da cartilagem em pacientes com APs, no entanto, apenas 50-60% dos pacientes respondem a esses agentes. Para melhorar esses resultados, os investigadores devem abordar duas lacunas principais: uma compreensão limitada dos principais eventos subjacentes à destruição óssea patológica e a ausência de biomarcadores para prever a resposta do TNFi e identificar os primeiros respondedores do TNFi para facilitar a otimização da terapia.

O dano ósseo é mediado por osteoclastos que surgem de precursores de monócitos no sangue. Precursores de osteoclastos (OCPs) são dramaticamente aumentados em PsA, em comparação com controles, particularmente em pacientes com danos ósseos em raios-X. O número dessas células precursoras da circulação caiu rapidamente após o tratamento com TNFi. Os OCPs podem servir como biomarcadores de resposta, mas custo, tempo e alta variabilidade limitam esses ensaios. Os precursores de osteoclastos expressam a Proteína Transmembrana Específica de Células Dendríticas (DC-STAMP), que é uma proteína transmembranar de sete passagens necessária para a fusão de monócitos para formar osteoclastos e células gigantes. Os níveis de monócitos DC-STAMP caíram rapidamente após o tratamento com TNFi. O fator 3 associado ao receptor de TNF (TRAF3), um inibidor da formação de OC que se correlaciona com as concentrações extracelulares de TNF, está elevado em OCPs de pacientes com PsA. Esses marcadores podem prever a resposta ao tratamento com TNFi.

O objetivo deste estudo é examinar pacientes com artrite psoriática antes e depois do tratamento biológico padrão, como TNFi, enquanto também examina a expressão de DC-STAMP e TRAF3 em uma análise transversal de pacientes em uso de agentes modificadores da doença oral (DMARDS) estáveis. e em pacientes em estado de baixa atividade da doença em terapia com TNFi.

• Ensaios de pesquisa:

A correlação entre a expressão de TRAF3 e DC-STAMP no nível de RNA e proteína pode ser examinada para dois pacientes com PsA de linha de base por PCR em tempo real, citometria de fluxo e western após o bloqueio de cloroquina (CQ), que evita a degradação de TRAF3. As células isoladas de PBMC humanas podem ser classificadas de forma estéril antes do uso em alguns ensaios in vitro. As células classificadas podem ser tratadas com CQ ou MG132, um inibidor de proteassoma, em meio de promoção de OC em experimentos de curso de tempo e dose-resposta e OCs contados para determinar se DC-STAMP é degradado pelo lisossoma ou proteassoma.

As Células Mononucleadas do Sangue Periférico (PBMCs) serão isoladas do sangue por centrifugação. Essas células podem ser usadas para citometria de fluxo para analisar a expressão de TRAF3 e DC-STAMP em monócitos juntamente com a quantificação de OC na linha de base e/ou aproximadamente 4 meses de tratamento. A expressão de superfície de DC-STAMP em PBMC de pacientes com PsA correlacionou-se com o número de OCP em cultura e o nível de DC-STAMP em monócitos CD14+ diminuiu significativamente em pacientes com PsA após TNFi. O declínio nas células DC-sTAMP+CD14+ pode servir como uma medida de resposta precoce ao TNFi.