DC-STAMP & TRAF3: regolatori dell'osteoclastogenesi e dei biomarcatori nella PsA (Incubator)

L'artrite psoriasica (PsA), una malattia infiammatoria delle articolazioni associata alla psoriasi (Ps), colpisce circa 650.000 adulti negli Stati Uniti ed è associata a un aumento della morbilità e della mortalità. Il danno osseo si sviluppa nella metà di questi pazienti entro i primi due anni di malattia, lasciandoli spesso con funzionalità compromesse e qualità della vita ridotta. L'emergere di terapie anti-fattore di necrosi tumorale (TNFi) ha notevolmente migliorato la risposta clinica e rallentato la degradazione ossea e cartilaginea nei pazienti con PsA, tuttavia, solo il 50-60% dei pazienti risponde a questi agenti. Per migliorare questi risultati, i ricercatori devono affrontare due importanti lacune: una comprensione limitata degli eventi chiave che sono alla base della distruzione ossea patologica e l'assenza di biomarcatori per prevedere la risposta TNFi e identificare i primi responder TNFi per facilitare l'ottimizzazione della terapia.

Il danno osseo è mediato dagli osteoclasti che derivano dai precursori dei monociti nel sangue. I precursori degli osteoclasti (OCP) sono notevolmente aumentati nella PsA, rispetto ai controlli, in particolare nei pazienti con danno osseo ai raggi X. Il numero di queste cellule precursori della circolazione è diminuito rapidamente dopo il trattamento con TNFi. Gli OCP possono fungere da biomarcatori di risposta, ma il costo, il tempo e l'elevata variabilità limitano questi test. I precursori degli osteoclasti esprimono la proteina transmembrana specifica per le cellule dendritiche (DC-STAMP), che è una proteina transmembrana a sette passaggi necessaria per la fusione dei monociti per formare osteoclasti e cellule giganti. I livelli di monociti DC-STAMP sono diminuiti rapidamente dopo il trattamento con TNFi. Il fattore 3 associato al recettore del TNF (TRAF3), un inibitore della formazione di OC correlato alle concentrazioni extracellulari di TNF, è elevato negli OCP dei pazienti con PsA. Questi marcatori possono predire la risposta al trattamento TNFi.

L'obiettivo di questo studio è esaminare i pazienti con artrite psoriasica prima e dopo il trattamento biologico standard di cura come TNFi, esaminando anche l'espressione di DC-STAMP e TRAF3 in un'analisi trasversale di pazienti trattati con agenti modificanti la malattia orale stabile (DMARDS) e nei pazienti in stato di bassa attività della malattia in terapia con TNFi.

• Saggi di ricerca:

La correlazione tra l'espressione di TRAF3 e DC-STAMP a livello di RNA e proteine ​​può essere esaminata per due pazienti con PsA al basale mediante PCR in tempo reale, citometria a flusso e western dopo il blocco della clorochina (CQ), che impedisce la degradazione di TRAF3. Le cellule isolate da PBMC umane possono essere selezionate sterili prima dell'uso in alcuni test in vitro. Le cellule ordinate possono essere trattate con CQ o MG132, un inibitore del proteasoma, in terreni che promuovono l'OC nel corso del tempo e negli esperimenti dose-risposta e gli OC vengono contati per determinare se DC-STAMP è degradato dal lisosoma o dal proteasoma.

Le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) saranno isolate dal sangue mediante centrifugazione. Queste cellule possono essere utilizzate per la citometria a flusso per analizzare l'espressione di TRAF3 e DC-STAMP sui monociti insieme alla quantificazione di OC al basale e/o a circa 4 mesi di trattamento. L'espressione superficiale di DC-STAMP su PBMC da pazienti con PsA correlava con il numero di OCP in coltura e il livello di DC-STAMP su monociti CD14+ è diminuito significativamente nei pazienti con PsA dopo TNFi. Il declino delle cellule DC-sTAMP+CD14+ può servire come misura della risposta precoce al TNFi.