DC-STAMP & TRAF3: Regulatory osteoklastogenezy i biomarkery w PsA (Incubator)

Łuszczycowe zapalenie stawów (PsA), zapalna choroba stawów związana z łuszczycą (Ps), dotyka około 650 000 dorosłych w Stanach Zjednoczonych i wiąże się ze zwiększoną chorobowością i śmiertelnością. Uszkodzenie kości rozwija się u połowy tych pacjentów w ciągu pierwszych dwóch lat choroby, często powodując upośledzenie funkcji i pogorszenie jakości życia. Pojawienie się terapii przeciw czynnikowi martwicy nowotworów (TNFi) radykalnie poprawiło odpowiedź kliniczną i spowolniło degradację kości i chrząstki u pacjentów z łuszczycowym zapaleniem stawów, jednak tylko 50-60% pacjentów reaguje na te środki. Aby poprawić te wyniki, badacze muszą zająć się dwiema głównymi lukami: ograniczonym zrozumieniem kluczowych zdarzeń leżących u podstaw patologicznego niszczenia kości oraz brakiem biomarkerów do przewidywania odpowiedzi TNF i identyfikacji wczesnych osób reagujących na TNF w celu ułatwienia optymalizacji terapii.

W uszkodzeniu kości pośredniczą osteoklasty, które powstają z prekursorów monocytów we krwi. Prekursory osteoklastów (OCP) są znacznie zwiększone w PsA w porównaniu z grupą kontrolną, szczególnie u pacjentów z uszkodzeniem kości widocznym na zdjęciu rentgenowskim. Liczba tych komórek prekursorowych krążenia gwałtownie spadła po leczeniu TNF. OCP mogą służyć jako biomarkery odpowiedzi, ale koszt, czas i duża zmienność ograniczają te testy. Prekursory osteoklastów wyrażają białko transbłonowe swoiste dla komórek dendrytycznych (DC-STAMP), które jest siedmioprzebiegowym białkiem transbłonowym wymaganym do fuzji monocytów w celu utworzenia osteoklastów i komórek olbrzymich. Poziom DC-STAMP monocytów gwałtownie spadał po leczeniu TNF. Czynnik związany z receptorem TNF 3 (TRAF3), inhibitor tworzenia OC, który koreluje z pozakomórkowymi stężeniami TNF, jest podwyższony w OCP u pacjentów z łuszczycowym zapaleniem stawów. Markery te mogą przewidywać odpowiedź na leczenie TNF.

Celem tego badania jest zbadanie pacjentów z łuszczycowym zapaleniem stawów przed i po standardowym leczeniu biologicznym, takim jak TNF, przy jednoczesnym zbadaniu ekspresji DC-STAMP i TRAF3 w analizie przekrojowej pacjentów przyjmujących stabilne środki modyfikujące chorobę jamy ustnej (DMARDS) oraz u pacjentów w stanie małej aktywności choroby w trakcie terapii TNF.

• Testy badawcze:

Korelację między ekspresją TRAF3 i DC-STAMP na poziomie RNA i białka można zbadać u dwóch wyjściowych pacjentów z ŁZS za pomocą PCR w czasie rzeczywistym, cytometrii przepływowej i blokady western po chlorochinie (CQ), która zapobiega degradacji TRAF3. Komórki wyizolowane z ludzkich PBMC mogą być sterylnie sortowane przed użyciem w niektórych testach in vitro. Posortowane komórki można traktować CQ lub MG132, inhibitorem proteasomu, w pożywkach promujących OC w eksperymentach dotyczących przebiegu w czasie i odpowiedzi na dawkę oraz zliczania OC w celu określenia, czy DC-STAMP jest rozkładany przez lizosom lub proteasom.

Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) zostaną wyizolowane z krwi przez wirowanie. Komórki te można wykorzystać do cytometrii przepływowej do analizy ekspresji TRAF3 i DC-STAMP na monocytach wraz z oznaczeniem ilościowym OC na początku badania i/lub po około 4 miesiącach leczenia. Ekspresja powierzchniowa DC-STAMP na PBMC pacjentów z PsA korelowała z liczbą OCP w hodowli, a poziom DC-STAMP na monocytach CD14+ znacząco spadł u pacjentów z ŁZS po podaniu TNF. Spadek liczby komórek DC-sTAMP+CD14+ może służyć jako miara wczesnej odpowiedzi na TNF.