DC-STAMP & TRAF3: regulatoren van osteoclastogenese en biomarkers in PsA (Incubator)

Arthritis psoriatica (PsA), een inflammatoire gewrichtsaandoening geassocieerd met psoriasis (Ps), treft ongeveer 650.000 volwassenen in de Verenigde Staten en wordt geassocieerd met verhoogde morbiditeit en mortaliteit. Botbeschadiging ontwikkelt zich bij de helft van deze patiënten binnen de eerste twee jaar van de ziekte, waardoor ze vaak een verminderde functie en verminderde kwaliteit van leven hebben. De opkomst van antitumornecrosefactortherapieën (TNFi) heeft de klinische respons drastisch verbeterd en de bot- en kraakbeenafbraak bij PsA-patiënten vertraagd, maar slechts 50-60% van de patiënten reageert op deze middelen. Om deze resultaten te verbeteren, moeten onderzoekers twee belangrijke hiaten aanpakken: een beperkt begrip van de belangrijkste gebeurtenissen die ten grondslag liggen aan pathologische botvernietiging en de afwezigheid van biomarkers om de TNFi-respons te voorspellen en vroege TNFi-responders te identificeren om optimalisatie van therapie te vergemakkelijken.

Botbeschadiging wordt gemedieerd door osteoclasten die ontstaan ​​uit monocytvoorlopers in het bloed. Osteoclast Precursors (OCP's) zijn dramatisch verhoogd bij PsA, vergeleken met controles, vooral bij patiënten met botschade op röntgenfoto's. Het aantal van deze circulatieprecursorcellen daalde snel na behandeling met TNFi. OCP's kunnen dienen als responsbiomarkers, maar kosten, tijd en hoge variabiliteit beperken deze testen. Voorlopers van osteoclasten brengen Dendritic Cell-Specific Transmembrane Protein (DC-STAMP) tot expressie, een transmembraaneiwit met zeven passages dat nodig is voor fusie van monocyten om osteoclasten en reuzencellen te vormen. Monocyte DC-STAMP-niveaus daalden snel na behandeling met TNFi. TNF-receptor-geassocieerde factor 3 (TRAF3), een remmer van OC-vorming die correleert met extracellulaire TNF-concentraties, is verhoogd bij OCP's van PsA-patiënten. Deze markers kunnen de TNFi-behandelingsrespons voorspellen.

Het doel van deze studie is om psoriatische artritispatiënten te onderzoeken voorafgaand aan en na standaard biologische behandeling zoals TNFi, terwijl ook DC-STAMP- en TRAF3-expressie wordt onderzocht in een transversale analyse van patiënten op stabiele orale ziektemodificerende middelen (DMARDS). en bij patiënten met een lage ziekteactiviteit die TNFi-therapie ondergaan.

• Onderzoekstesten:

De correlatie tussen TRAF3- en DC-STAMP-expressie op RNA- en eiwitniveau kan worden onderzocht voor twee baseline PsA-patiënten door middel van real-time PCR, flowcytometrie en western after Chloroquine (CQ) -blokkade, die TRAF3-afbraak voorkomt. Cellen geïsoleerd uit menselijke PBMC kunnen steriel worden gesorteerd voorafgaand aan gebruik in sommige in vitro assays. Gesorteerde cellen kunnen worden behandeld met CQ of MG132, een proteasoomremmer, in OC-bevorderende media in tijdsverloop en dosis-responsexperimenten en OC's worden geteld om te bepalen of DC-STAMP wordt afgebroken door het lysosoom of proteasoom.

Mononucleaire cellen uit perifeer bloed (PBMC's) zullen door centrifugeren uit het bloed worden geïsoleerd. Deze cellen kunnen worden gebruikt voor flowcytometrie om TRAF3- en DC-STAMP-expressie op monocyten te analyseren, samen met OC-kwantificering bij baseline en/of ongeveer 4 maanden behandeling. DC-STAMP-oppervlakte-expressie op PBMC van PsA-patiënten correleerde met het aantal OCP in kweek en het niveau van DC-STAMP op CD14+ monocyten nam significant af bij PsA-patiënten na TNFi. De afname van DC-sTAMP+CD14+-cellen kan dienen als maatstaf voor een vroege respons op TNFi.