Rollen til spesifikke mikroRNAer i klyngehodepine (5*1000)

Bakgrunn Klyngehodepine (CH) er en primær hodepine inkludert i trigeminus autonome cephalalgias (TACs) i henhold til International Calssification of Headache Disorder, tredje utgave. CH er preget av en mangefasettert og ufullstendig forstått patofysiologi. Hypothalamus, det trigeminus-vaskulære komplekset og den trigeminus-autonome refleksen antas å spille en betydelig rolle.

Økende eksperimentelle bevis har fremhevet involveringen av spesifikke mikroRNA (miRNA) i kronisk smerte og primær hodepine, inkludert migrene. miRNA-er er små endogene ikke-kodende RNA-er som er rundt 22 nukleotider lange. miRNA fungerer som post-transkripsjonell regulator av genuttrykk ved å fremme messenger RNA (mRNA) nedbrytning eller undertrykke mRNA translasjon. Reguleringsprosessen utført av miRNA er kompleks og artikulert siden et individuelt miRNA kan målrette mot hundrevis av forskjellige mRNA, og omvendt kan hvert mRNA reguleres av flere miRNA. Det har blitt anslått at mer enn 60% av alle proteinkodende gener er regulert av miRNA-er som følgelig bestemmer den pleiotropiske moduleringen av et bredt utvalg av cellulære prosesser som involverer differensiering, utvikling og signalering. miRNA er involvert i generering og vedlikehold av smerte, og flere bevis tyder på at spesifikke miRNA kan spille en rolle i migrene.

I en fersk studie observerte vi en oppregulering av genuttrykk i to miRNA-er, miR-382-5p og miR-34a-5p, i perifere mononukleære blodceller (PBMC) hos personer med kronisk migrene (CM). Disse miRNA-ene er involvert i betennelsesmodulering og frigjøring av γ-aminosmørsyre (GABA) sammenlignet med personer med episodisk migrene og friske personer (HC). Disse funnene understreker en korrelasjon mellom genuttrykket til disse miRNA-ene og migrenefenotypen, så vel som alvorlighetsgraden.

Nyere studier tyder på en aktiv rolle for visse nevropeptider i CH. Den danske gruppen har faktisk vist at intravenøs administrering av CGRP, PACAP eller VIP kan indusere akutte CH-anfall hos minst 50 % av deltakerne når de studeres i den aktive fasen av sykdommen.

Per nå er det ingen data om potensiell involvering av miRNA i CH. Denne studien tar sikte på å gi en detaljert utforskning av rollen til miRNA i klyngehodepine, og bidrar til vår forståelse av patofysiologien til denne primære hodepinelidelsen. Videre kan de oppnådde resultatene bane vei for utviklingen av en ny generasjon av molekyler som kan brukes innen CH, slik som miRNA-agonister (Agomir) og antagonister (Antagomir).

Mål Hovedmålet med vårt nåværende prosjekt er å undersøke det perifere uttrykket av miRNA som er involvert i smertemodulering (miR-382-5p, miR-34a-5p og miR-155) hos personer med episodisk CH i aktiv fase (eCH- act), episodisk CH i remisjonsfasen (eCH-rem), kronisk CH (cCH) og friske kontrollpersoner (HC).

Metoder

Alle fagene vil utføre en enkelt evaluering over tid som de vil gjennomgå:

• forklaring av studieprosedyrer og undertegning av informert samtykke
• visningsbesøk
• klinisk og demografisk datainnsamling (basert på revisjon av en hodepinedagbok)
• fastende venøs blodprøvetaking
• administrasjon av spørreskjemaer

Alle forsøkspersoner vil bli evaluert om morgenen, etter nattfaste. For forsøkspersoner påvirket av cCH eller eCH-act, forventes prøvetaking å bli utført i den interkritiske fasen, som definert ved fravær av CH-anfall i minst 3 timer hos pasienter med eCH og i minst 8 timer hos pasienter med cCH. Etter blodprøvetaking vil pasienter bo på senteret for å fylle ut et sett med spørreskjemaer. Dette vil tillate etterforskeren å overvåke pasientene i minst 2 timer, for å utelukke at en blodprøve tas rett før et CH-anfall.

For pasienter med eCH vil fasene "aktiv" og "remisjon" bli definert som følger:

• Aktiv fase: fasen der CH-anfall har vært tilstede i minst 7 dager.
• Remisjonsfase: karakterisert ved fravær av klyngehodepineanfall i minst 15 påfølgende dager uten farmakologisk behandling.

miR-382-5p, miR-34a-5p og miRNA-155 genuttrykk vil bli evaluert i PBMCs ved sanntids revers transkripsjon (RT-PCR). Denne vurderingen vil bli normalisert med U6 (en type liten kjernefysisk RNA som brukes som husholdningsgen) og uttrykt som relativ kvantifisering (RQ). Plasmanivåer av CGRP alfa, PACAP og VIP vil bli målt ved bruk av validerte kommersielle ELISA-sett. En detaljert beskrivelse av metodene som er planlagt for de biokjemiske analysene finner du her: https://doi.org/10.1186/s10194-020-01189-0.

Settet med kliniske spørreskjemaer vil omfatte: Migrene funksjonshemming Assessment (MIDAS), Hodepine Impact Test (HIT-6), Cluster Headache Impact Questionnarie (CHIQ).

Prøvestørrelsesberegning og forhåndsplanlagt statistisk analyse Følgende parametere ble vurdert for beregningen: Effektstørrelse: 0,5; alfafeil: 0,05; betafeil: 0,05 (effekt: 95 %); antall grupper: 4.

Prøvestørrelsesberegning ble utført ved å bruke gratisvareplattformen G*Power (ver. 3.1.9.7) for en ANOVA-test med Bonferroni-korreksjon brukt på de 4 gruppene. Minste foreslåtte prøvestørrelse er 76 forsøkspersoner (19 forsøkspersoner per gruppe). For å ta høyde for potensiell variasjon planlegger vi å registrere totalt 100 emner, med 25 emner per gruppe.

Parametriske eller ikke-parametriske korrelasjoner vil bli brukt for å måle sammenhengen mellom biokjemiske variabler og kliniske variabler. Multivariate analyser vil bli utført i henhold til resultatene av den univariate analysen. Statistisk signifikans vil bli satt til 5 % nivå (p<0,05).