Effektiviteten av probiotika for forebygging av gastrointestinal toksisitet hos barn med leukemi

Bakgrunn Akutt lymfatisk leukemi (ALL) er en ondartet sykdom karakterisert ved ukontrollert spredning av umodne lymfoide celler. Det er den vanligste neoplasmen hos barn, og representerer opptil 53,1 % av alle onkologiske prosesser i Mexico [1-6]. Heldigvis, med dagens kjemoterapeutiske behandlinger, oppnås sykdomsremisjon i 98 % av tilfellene; Imidlertid har de kjemoterapeutiske behandlingene bivirkninger som kan føre til gastrointestinal toksisitet (7,7 til 32,5 %), som er assosiert med opptil 50 % dødelighet.

Blant de vanligste gastrointestinale manifestasjonene som følge av denne toksisiteten er mukositt, pankreatitt (2 til 8 %), diaré (10 til 82 %) og kolitt assosiert med redusert Bacillus spp og Bidifobacterium spp, noe som øker risikoen for nekrose og tarmperforering av terminal ileum og blindtarm. Derfor er det utført flere studier for å identifisere midler som kan redusere forekomsten av gastrointestinal toksisitet som probiotika som er en gruppe saprofytiske mikroorganismer (bakterier, virus, sopp og protozoer) som lever i likevekt på huden og slimhinnene, hovedsakelig i tarmen, har fått oppmerksomhet.

Probiotika er kjent for å ha flere gunstige funksjoner som å fremme absorpsjon av karbohydrater, kortkjedede fettsyrer og kalsium; lette syntesen av lipider og vitaminer; modulere og redusere konsentrasjonen av inflammatoriske mediatorer i tarmslimhinnen; forbedre slimhinnens blodstrøm, og dermed redusere risikoen for iskemiske områder i tarmen; og styrke immunforsvaret.

Selv om det er forsket på bruk av probiotika for å forhindre eller redusere toksiske effekter av kjemoterapi, er resultatene fortsatt usikre fordi effekten av probiotika har blitt analysert i flere kombinasjoner, noe som gjør det vanskelig å skille de spesifikke effektene per filum. Dette kompliserer genereringen av standardiserte terapeutiske ordninger for å forbedre kvaliteten på omsorgen til disse pasientene. Hvis dette prosjektet lykkes med å identifisere effektiviteten og sikkerheten til disse probiotika, vil det muliggjøre utvikling av nye terapeutiske strategier rettet mot å forbedre kvaliteten på helsetjenester for disse pasientene, redusere hyppigheten og alvorlighetsgraden av gastrointestinale komplikasjoner sekundært til administrering av kjemoterapi.

Mål Å evaluere effektiviteten og sikkerheten ved administrering av Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus og Bifidobacterium bifidum sammenlignet med placebo for å redusere risikoen for gastrointestinal toksisitet, redusere tarmpermeabilitet og endre tarmmikrobiota uten utvikling av bivirkninger diagnostisert hos pediatriske pasienter. mottar konsolideringskjemoterapi i onkologisk tjeneste ved Instituto Nacional de Pediatría.

Generell beskrivelse av studien

1. Deltakervalg og samtykke:

   • Deltakere som oppfyller studievalgskriteriene vil bli valgt ut.
   • Informert samtykke vil innhentes fra deltakerens foreldre eller foresatte og eventuelt fra pasienten dersom den er eldre enn 8 år. De vil bli informert om fordeler, komplikasjoner og uheldige effekter av intervensjonene (vedlegg 1-3).
   • Hvis foreldrene eller foresatte foretrekker behandling utenfor forskningsprosjektet, vil pasienten bli behandlet i henhold til de etablerte nasjonale protokollene som brukes i Onkologitjenesten til Instituto Nacional de Pediatría.
   • Det vil også innhentes samtykke for bruk av personopplysninger i henhold til vedlegg 4 og 5. Disse dataene inkluderer deltaker- og foreldrenavn, fødselsdato, kjønn, CURP, adresse, kontaktnummer, medisinsk historie, generelle vaner, patologiske tilstander, sosiale forhold, som skal brukes eksklusivt til dette forskningsprosjektet.
   • Data vil bli håndtert med streng konfidensialitet, lagret i en elektronisk database i fem år av prosjektpersonell.

2. Innledende vurderinger:

   • En pediatrisk onkolog vil utføre en sykehistorie, fysisk undersøkelse, antropometri, avføring og serumprøvetaking.
   • En ernæringsfysiolog vil vurdere deltakerens ernæringsstatus og kroppssammensetning.

   A) Fysisk undersøkelse:

   • Deltakeren skal ta av seg yttertøy og sko og sette seg på undersøkelsesbordet.
   • Barneonkologen vil visuelt inspisere for hudlesjoner ved hjelp av en lampe og tungedepressor om nødvendig.
   • Kroppstemperaturen vil bli målt med et digitalt termometer.
   • Deltakerne vil ligge på rygg for palpasjon, perkusjon og/eller auskultasjon for å vurdere hjerte- og abdominale tilstander.

   B) Antropometri

   • Vekten vil bli målt tre ganger med en Seca-vekt.
   • Høyden vil bli målt tre ganger med et stadiometer.
   • Midjeomkrets vil bli målt i midtpunktet mellom nedre kant av siste ribben og øvre kant av hoftekammen.
   • Hofteomkretsen vil bli målt 15 cm under midjen.
   • Armomkrets vil bli målt rundt biceps-muskelen.
   • Låromkretsen vil bli målt rundt den øvre tredjedelen av låret.

   C) Ernæringsstatus

   - Høyde-for-alder (H-A), vekt-for-alder (W-A), vekt-for-høyde (W-H), og kroppsmasseindeks (BMI) vil bli klassifisert i henhold til NOM-008-SSA2-1993 standarder.

   D) Kroppssammensetning

   • Deltakerne vil fjerne metallgjenstander, tømme blæren og ligge på en ikke-ledende seng.
   • Elektrodeplassering vil bli klargjort med et rensehåndkle og et elektrisk ledende håndkle.
   • Elektroder vil bli plassert på hender og føtter, og en multifrekvens bioelektrisk impedansenhet vil måle kroppssammensetning ved seks forskjellige frekvenser.
   • Data vil bli justert til WHO-persentilkurver.

   E) Avføringsprøver

   • Deltakerne vil samle avføringsprøver hjemme ved hjelp av medfølgende sett og instruksjoner.
   • Prøver vil bli transportert i en kjøler til Instituto Nacional de Pediatría samme dag for analyse og vil bli lagret i fryseren ved -70°C til slutten av prosjektet.

   F) Serumprøver

   • En 3 ml blodprøve vil bli tatt ved perifer venepunktur.
   • Serumprøver vil bli behandlet for å bestemme antistoffer mot beta-laktoglobulin ved bruk av sandwich-enzym immunoassay-teknikken.

   Vurderinger vil bli utført ukentlig for klinisk tilstand, antropometri og kroppssammensetning i uke 1, 4 og 8, og avførings- og serumprøver i uke 1 og 8.

3. Forberedelse av intervensjoner:

   • Intervensjoner vil bli forberedt i en Baker Company Klasse II Type A2 vertikal laminær strømningshette.
   • De nødvendige mengder lyofilisert probiotisk pulver og mikrokrystallinsk cellulose vil bli blandet i 5 minutter (2:30 med klokken og 2:30 mot klokken) med en hastighet på 25 rpm og innkapslet i en dose på: L. casei og L. rhamnosus ved 2,5 milliarder CFU per kapsel, B. bifidum ved 1 milliard CFU per kapsel og placebo 300 mg mikrokrystallinsk cellulose.
   • Hver intervensjon vil bli lagret i merkede sterile poser og kjølt ved 2 til 8 °C.
   • Kapslene vil kvalitetssjekkes for UFC-innhold ved Bacteriology Laboratory ved fortynning og sekvensering, og eventuelle avvik vil resultere i prosessjusteringer.

4. Deltakerfordeling:

   • Deltakerne vil bli tilfeldig tildelt intervensjoner ved hjelp av en datamaskingenerert sekvens, justert i balanserte blokker på fem. (Vedlegg 7).
   • En ekstern forsker vil plassere intervensjonsnavn i ugjennomsiktige konvolutter, merket med tilfeldige tall for sekvensen.
   • Deltakerne vil trekke et tilfeldig nummer som skal tildeles en intervensjon, kommunisert til hovedetterforskeren.

5. Intervensjonsadministrasjon:

   • Deltakerne vil motta flasker med 14-16 kapsler av den tildelte intervensjonen, lagret i en kjøler med nedkjølte gelpakker.
   • Deltakerne vil ta en kapsel før frokost og en før lunsj i en uke, registrere overholdelse i en loggbok og gjenta denne prosessen i åtte uker.

6. Klinisk evaluering:

   - Ukentlige kliniske evalueringer vil bli utført for mukositt, diaré, kolitt, flatulens, abdominal oppblåsthet og forstoppelse, gradert i henhold til Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE)-skalaen (V 4.02) [39]. Om nødvendig vil barneonkologen igangsette behandling i henhold til Onkologisk tjenesteplan.

7. Datainnsamling:

   • Hvis antibiotika er nødvendig eller kjemoterapikonsolideringsfasen er fullført, vil deltakerne bli eliminert fra studien, og endelige vurderinger vil bli utført.
   • Data fra ukentlige kliniske evalueringer, ernæringsvurderinger og studieoppfølginger vil bli registrert i et datainnsamlingsskjema (vedlegg 8) og lagt inn i en elektronisk Excel-database for statistisk analyse ved bruk av STATA 18 av en blindet forsker.

Prøvestørrelsen ble beregnet basert på data fra studien av Reyna-Figueroa, som rapporterte en 0 % forekomst av diaré under administrering av L. rhamnosus sammenlignet med 10 % hos deltakere som ikke fikk probiotika. Ved å bruke formelen for proporsjoner, med en alfafeil på 0,05, 80 % kraft og estimering av en tapsrate på 20 %, ble en prøvestørrelse på 30 deltakere bestemt for hver av de fire gruppene.

Statistisk analyse En deskriptiv analyse vil bli utført ved å bruke mål på sentral tendens for å forstå egenskapene til den studerte prøven og for å bestemme type distribusjon av hver variabel ved å bruke Kolmogorov-Smirnoff normalitetstesten. For kvantitative variabler vil gjennomsnitt og standardavvik eller median med minimums- og maksimumsverdier beregnes, avhengig av type distribusjon og oppsummert i tabellform; og data grafisk representert av boksplott eller sperrer chatter etter behov.

For å sammenligne de kvantitative variablene mellom de fire intervensjonene vil en flerveis ANOVA-test brukes. For kvalitative variabler vil kjikvadrattesten brukes til å sammenligne gruppene, justere for ernæringsstatusen til deltakerne.

Risikoen for gastrointestinal toksisitet og uønskede hendelser vil bli analysert ved den relative risikoen eller Petos oddsratio og 95 % konfidensintervall. Forskjeller mellom intervensjonene vil bli analysert ved bruk av overlevelsesanalyse med Kaplan-Meier og Log-Rank testene. Sekvenseringsdata vil bli analysert ved hjelp av Qiime2-programmet, filtrert for å generere et fylogenetisk tre ved hjelp av Silva-databasen. Tilsvarende plott vil bli generert for hvert taksonomiske nivå. Alfa (intra-gruppe) og Beta (inter-gruppe) mangfold vil bli presentert ved ordinasjonsplott ved bruk av hovedkomponentanalyse med ANCOM-programmet.

Bemerket at pasienter som dropper ut av studien vil få sine resultater analysert frem til siste registrering, og alle analyser vil bli utført på en intensjon-til-behandling-basis.