Effektiviteten af ​​probiotika til forebyggelse af gastrointestinal toksicitet hos børn med leukæmi

Baggrund Akut lymfatisk leukæmi (ALL) er en ondartet sygdom karakteriseret ved ukontrolleret spredning af umodne lymfoide celler. Det er den mest almindelige neoplasma hos børn, der repræsenterer op til 53,1% af alle onkologiske processer i Mexico [1-6]. Heldigvis opnås med de nuværende kemoterapeutiske behandlinger sygdomsremission i 98 % af tilfældene; de kemoterapeutiske behandlinger har dog bivirkninger, der kan føre til gastrointestinal toksicitet (7,7 til 32,5 %), som er forbundet med op til 50 % dødelighed.

Blandt de mest almindelige gastrointestinale manifestationer som følge af denne toksicitet er mucositis, pancreatitis (2 til 8 %), diarré (10 til 82 %) og colitis forbundet med nedsat Bacillus spp og Bidifobacterium spp, hvilket øger risikoen for nekrose og tarmperforering af terminal ileum og blindtarm. Derfor er der blevet udført adskillige undersøgelser for at identificere midler, der kan reducere forekomsten af ​​gastrointestinal toksicitet, såsom probiotika, som er en gruppe af saprofytiske mikroorganismer (bakterier, vira, svampe og protozoer), der lever i ligevægt på huden og slimhinderne, hovedsageligt i tarmen, har fået opmærksomhed.

Probiotika er kendt for at have flere gavnlige funktioner såsom at fremme optagelsen af ​​kulhydrater, kortkædede fedtsyrer og calcium; lette syntesen af ​​lipider og vitaminer; modulere og reducere koncentrationen af ​​inflammatoriske mediatorer i tarmslimhinden; forbedre slimhindeblodgennemstrømningen og dermed reducere risikoen for iskæmiske områder i tarmen; og styrke immunforsvaret.

Selvom der er forsket i brugen af ​​probiotika til at forebygge eller reducere de toksiske virkninger af kemoterapi, er resultaterne stadig usikre, fordi effekten af ​​probiotika er blevet analyseret i flere kombinationer, hvilket gør det vanskeligt at skelne de specifikke effekter pr. filum. Dette komplicerer genereringen af ​​standardiserede terapeutiske ordninger for at forbedre kvaliteten af ​​behandlingen af ​​disse patienter. Hvis dette projekt med succes identificerer effektiviteten og sikkerheden af ​​disse probiotika, vil det gøre det muligt at udvikle nye terapeutiske strategier, der sigter mod at forbedre kvaliteten af ​​sundhedsydelser for disse patienter, reducere hyppigheden og sværhedsgraden af ​​gastrointestinale komplikationer sekundært til administration af kemoterapi.

Formål At evaluere effektiviteten og sikkerheden af ​​administrationen af ​​Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus og Bifidobacterium bifidum sammenlignet med placebo med hensyn til at reducere risikoen for gastrointestinal toksicitet, mindske intestinal permeabilitet og ændre intestinal mikrobiota uden udvikling af bivirkninger diagnosticeret hos pædiatriske patienter. modtager konsolideringskemoterapi i Onkologitjenesten ved Instituto Nacional de Pediatría.

Generel beskrivelse af undersøgelsen

1. Deltagervalg og samtykke:

   • Deltagere, der opfylder undersøgelsesudvælgelseskriterierne, vil blive udvalgt.
   • Informeret samtykke indhentes fra deltagerens forældre eller værger og, hvis det er relevant, fra patienten, hvis den er ældre end 8 år. De vil blive informeret om fordele, komplikationer og bivirkninger af interventionerne (bilag 1-3).
   • Hvis forældrene eller værgene foretrækker behandling uden for forskningsprojektet, vil patienten blive behandlet i henhold til de etablerede nationale protokoller, der anvendes i Onkologitjenesten ved Instituto Nacional de Pediatría.
   • Der vil også blive indhentet samtykke til brug af personoplysninger i henhold til bilag 4 og 5. Disse data inkluderer deltagernes og forældrenes navne, fødselsdato, køn, CURP, adresse, kontaktnummer, sygehistorie, generelle vaner, patologiske tilstande, sociale forhold, som udelukkende skal bruges til dette forskningsprojekt.
   • Data vil blive behandlet med streng fortrolighed, opbevaret i en elektronisk database i fem år af projektpersonalet.

2. Indledende vurderinger:

   • En pædiatrisk onkolog vil udføre en sygehistorie, fysisk undersøgelse, antropometri, fækal- og serumprøvetagning.
   • En ernæringsekspert vil evaluere deltagerens ernæringsstatus og kropssammensætning.

   A) Fysisk undersøgelse:

   • Deltageren tager overtøj og sko af og sætter sig på undersøgelsesbordet.
   • Den pædiatriske onkolog vil visuelt inspicere for hudlæsioner ved hjælp af en lampe og tungepressor om nødvendigt.
   • Kropstemperaturen vil blive målt med et digitalt termometer.
   • Deltagerne vil ligge på ryggen til palpation, percussion og/eller auskultation for at vurdere hjerte- og abdominale tilstande.

   B) Antropometri

   • Vægten vil blive målt tre gange ved hjælp af en Seca-vægt.
   • Højden vil blive målt tre gange med et stadiometer.
   • Taljeomkredsen vil blive målt i midtpunktet mellem den nederste kant af det sidste ribben og den øverste kant af hoftekammen.
   • Hofteomkreds vil blive målt 15 cm under taljen.
   • Armomkredsen vil blive målt omkring bicepsmusklen.
   • Lårets omkreds vil blive målt omkring den øverste tredjedel af låret.

   C) Ernæringsstatus

   - Indekserne for højde-for-alder (H-A), vægt-for-alder (W-A), vægt-for-højde (W-H) og kropsmasseindeks (BMI) vil blive klassificeret i henhold til NOM-008-SSA2-1993 standarder.

   D) Kropssammensætning

   • Deltagerne vil fjerne metalgenstande, tømme deres blære og ligge på ryggen på en ikke-ledende seng.
   • Elektrodeplacering vil blive forberedt med et rensehåndklæde og et elektrisk ledende håndklæde.
   • Elektroder vil blive placeret på hænder og fødder, og en multifrekvens bioelektrisk impedansenhed vil måle kropssammensætning ved seks forskellige frekvenser.
   • Data vil blive justeret til WHO-percentilkurver.

   E) Fækale prøver

   • Deltagerne vil indsamle afføringsprøver derhjemme ved hjælp af medfølgende sæt og instruktioner.
   • Prøver vil blive transporteret i en køler til Instituto Nacional de Pediatría samme dag til analyse og vil blive opbevaret i fryseren ved -70°C indtil projektets afslutning.

   F) Serumprøver

   • En 3 ml blodprøve vil blive opsamlet ved perifer venepunktur.
   • Serumprøver vil blive behandlet for at bestemme antistoffer mod beta-lactoglobulin ved brug af sandwich-enzym immunoassay-teknikken.

   Vurderinger vil blive udført ugentligt for klinisk tilstand, antropometri og kropssammensætning i uge 1, 4 og 8, og fæces- og serumprøver i uge 1 og 8.

3. Forberedelse af interventioner:

   • Interventioner vil blive forberedt i en Baker Company Klasse II Type A2 lodret laminær strømningshætte.
   • De nødvendige mængder af frysetørret probiotisk pulver og mikrokrystallinsk cellulose vil blive blandet i 5 minutter (2:30 med uret og 2:30 mod uret) ved en hastighed på 25 rpm og indkapslet i en dosis på: L. casei og L. rhamnosus ved 2,5 mia. CFU pr. kapsel, B. bifidum med 1 milliard CFU pr. kapsel og placebo 300 mg mikrokrystallinsk cellulose.
   • Hver intervention vil blive opbevaret i mærkede sterile poser og nedkølet ved 2 til 8°C.
   • Kapsler vil blive kvalitetstjekket for UFC-indhold på Bacteriology Laboratory ved fortynding og sekventering, og eventuelle afvigelser vil resultere i procesjusteringer.

4. Tildeling af deltagere:

   • Deltagerne vil blive tilfældigt tildelt til interventioner ved hjælp af en computergenereret sekvens, justeret i balancerede blokke af fem. (Bilag 7).
   • En ekstern forsker vil placere interventionsnavne i uigennemsigtige konvolutter, mærket med tilfældige numre af sekvensen.
   • Deltagerne trækker et tilfældigt tal, der skal tildeles en intervention, meddelt til den primære investigator.

5. Interventionsadministration:

   • Deltagerne vil modtage flasker med 14-16 kapsler af den tildelte intervention, opbevaret i en køler med nedkølede gelpakker.
   • Deltagerne vil tage en kapsel før morgenmad og en før frokost i en uge, registrere overholdelse i en logbog og gentage denne proces i otte uger.

6. Klinisk evaluering:

   - Ugentlige kliniske evalueringer vil blive udført for slimhindebetændelse, diarré, colitis, flatulens, abdominal udspilning og obstipation, graderet efter Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE) skalaen (V 4.02) [39]. Om nødvendigt vil den pædiatriske onkolog påbegynde behandling i henhold til Onkologisk serviceplan.

7. Dataindsamling:

   • Hvis antibiotika er påkrævet, eller kemoterapikonsolideringsfasen er afsluttet, vil deltagerne blive elimineret fra undersøgelsen, og endelige vurderinger vil blive udført.
   • Data fra ugentlige kliniske evalueringer, ernæringsvurderinger og undersøgelsesopfølgninger vil blive registreret i en dataindsamlingsformular (bilag 8) og indtastet i en elektronisk Excel-database til statistisk analyse ved brug af STATA 18 af en blindet forsker.

Prøvestørrelsen blev beregnet baseret på data fra undersøgelsen af ​​Reyna-Figueroa, som rapporterede en 0 % forekomst af diarré under administrationen af ​​L. rhamnosus sammenlignet med 10 % hos deltagere, der ikke fik probiotika. Ved at bruge formlen for proportioner, med en alfa-fejl på 0,05, 80 % effekt og estimering af en tabsrate på 20 %, blev en stikprøvestørrelse på 30 deltagere bestemt for hver af de fire grupper.

Statistisk analyse En deskriptiv analyse vil blive udført ved hjælp af mål for central tendens til at forstå karakteristikaene af den undersøgte prøve og bestemme typen af ​​fordeling af hver variabel ved hjælp af Kolmogorov-Smirnoff normalitetstesten. For kvantitative variable vil middelværdien og standardafvigelsen eller medianen med minimums- og maksimumværdier blive beregnet afhængigt af fordelingstypen og opsummeret i tabelform; og data grafisk repræsenteret af boxplot eller barer chats, alt efter hvad der er relevant.

For at sammenligne de kvantitative variable mellem de fire interventioner, vil en multi-vejs ANOVA test blive brugt. For kvalitative variabler vil chi-kvadrat-testen blive brugt til at sammenligne grupperne, justere for deltagernes ernæringsstatus.

Risikoen for gastrointestinal toksicitet og uønskede hændelser vil blive analyseret ud fra den relative risiko eller Petos odds ratio og 95 % konfidensinterval. Forskelle mellem interventionerne vil blive analyseret ved hjælp af overlevelsesanalyse med Kaplan-Meier og Log-Rank testene. Sekvenseringsdata vil blive analyseret ved hjælp af Qiime2-programmet, filtreret for at generere et fylogenetisk træ ved hjælp af Silva-databasen. Tilsvarende plots vil blive genereret for hvert taksonomisk niveau. Alfa (intra-gruppe) og Beta (inter-gruppe) diversitet vil blive præsenteret ved ordination plots ved hjælp af principal komponent analyse med ANCOM programmet.

Bemærkede, at patienter, der dropper ud af undersøgelsen, vil få deres resultater analyseret frem til deres sidste registrering, og alle analyser vil blive udført på en intention-to-treat-basis.