Terapeutisk potensial for et synbiotikum for å forbedre mental helse hos personer med overvekt.

Overvekt er en av de mest utbredte kroniske sykdommene globalt, som følge av et komplekst samspill mellom kostholdsvaner og miljømessige og genetiske faktorer. I følge statistikken fra Verdens helseorganisasjon er mer enn 1,9 milliarder voksne overvektige, og omtrent 650 millioner mennesker lider av overvekt. Dessuten har disse individene en høyere risiko for å utvikle mange metabolske lidelser, for eksempel diabetes type 2, aterosklerose, hjerte- og karsykdommer, ikke-alkoholholdig fettsykdom, reproduktive problemer og noen former for kreft. Livsstils- og farmakologiske intervensjoner er to av de viktigste strategiene for behandling av overvekt. Imidlertid aksepteres strenge livsstilsendringer ofte bare av et begrenset antall individer, og medisiner mot overvekt kan ha noen bivirkninger, mens effektiviteten deres ofte reduseres etter langvarig bruk. Derfor er et betydelig uoppfylt behov mangelen på praktiske og effektive tilleggsbehandlinger for behandling av overvekt.

Det er en toveis sammenheng mellom overvekt og humørsykdommer som depresjon og angst. Overvekt har også en negativ effekt på helse og livskvalitet, så vel som på selvtillit. Spesielt anslås det at omtrent 50% av individer med overvekt utvikler depressive og engstelige egenskaper, som er mer vanlig hos kvinner og hyppigere etter hvert som graden av overvekt øker. Videre lider personer med overvekt ofte en betydelig emosjonell belastning, øker stress, daglige bekymringer og til og med opplever vanskeligheter med å utføre dagliglivets aktiviteter. I tillegg til stigmatiseringen av sykdommen, som har en negativ innvirkning på selvtilliten og kroppsbildet, forverrer dette livskvaliteten og følelsesmessige tilstanden til disse individene. Derfor er mental helse tett sammenkoblet med overvekt, og å adressere både de fysiske og emosjonelle aspektene er avgjørende for å fremme generell velvære. Det er viktig å ta i bruk en helhetlig tilnærming som inkluderer intervensjoner i kosthold, fysisk trening og emosjonell og psykologisk støtte for de som sliter med å opprettholde en sunn vekt og tilstrekkelig mental helse.

Gut-hjerneaksen er et toveis kommunikasjonsnettverk mellom tarmen og sentralnervesystemet, og fungerer gjennom neuroimmune og nevroendokrine prosesser. Dens involvering i begynnelsen av depresjon er blitt postulert og formidles av molekyler som kortkjedede fettsyrer, gamma-aminobutyric acid (GABA) og tryptofan-metabolitter som stammer fra tarmen mikrobiota. I situasjoner med dysbiose eller endringer i mikrobiota-homeostase, kan tarm-hjerne-traséene bli funnet deregulert og er assosiert med nevroflammasjon og endret permeabilitet i blod-hjerne. Videre kan endringer i tarmen mikrobiota bidra til en depressiv tilstand ved direkte å påvirke frigjøring av nevrotransmittere som serotonin og dopamin, og påvirke stressresponsen og den hypothalamiske frigjøringsfaktoren (HPA), og påvirker hjerne-avledet neurotrofisk faktor. For eksempel er depresjon assosiert med en økt frigjøring av i C-reaktivt protein (CRP) og cytokiner som IL-1, IL-2, IL-6, IFN-Y og IL-1ß.

Overvekt forårsaker også betennelse på tarmnivå, insulinresistens og kroppsfettavsetninger. Forskning på dette feltet antyder at det er et toveis sammenheng mellom sammensetningen av tarmen mikrobiota, overvekt og insulinresistens. Det har blitt observert at personer med overvekt har en annen mikrobiell sammensetning sammenlignet med de med en sunn vekt. Det antas at denne endringen i tarmmikrobiota ytterligere kan bidra til progresjon av overvekt ved å øke evnen til å trekke ut energi fra mat, fremme betennelse i lav kvalitet, øke lipogenesen, redusere fettsyreoksidasjon og øke triglyseridakkumuleringen på levernivå, blant andre mekanismer.

Tatt i betraktning tarmmikrobiotaens rolle i å regulere immunforsvaret og betennelsen, observerer vi at kronisk betennelse er knyttet til både overvekt og psykologiske lidelser, inkludert depresjon og angst. Disse endringene i tarmmikrobiota kan bidra til systemisk betennelse og immunfunksjon, som igjen kan påvirke både overvekt og psykologiske lidelser. Noen tarmbakterier har evnen til å produsere nevrotransmittere som er absorberbare på tarmnivå, for eksempel serotonin eller GABA, som er viktige for å regulere humør og angst. Det antas at endringer i sammensetningen av tarmmikrobiota kan påvirke produksjonen av disse nevrotransmittere, og derfor påvirke mental helse.

Selv om livsstilsmodifikasjoner, som kalorirestriksjon og fysisk trening, anses som de beste terapiene for vekttap, er det andre tilleggsalternativer, for eksempel modulering av tarmmikrobiota, som kan være nyttige for personer med overvekt. Studier der prebiotika, probiotika og synbiotika ble administrert til individer med overvekt har vist sine gunstige effekter på vektreduksjon og andre metabolske parametere gjennom modulering av tarmmikrobiota. På grunn av de nye bevisene som impliserer tarm-hjerneaksen i overvekt og dens forhold til psykologiske lidelser, har det vært økt interesse for utviklingen av disse behandlingene som terapier for å gjenopprette tarmmikrobiota.

Prebiotika er funksjonell mat, gitt deres gunstige rolle i å fremme helse og forhindre sykdom. Et eksempel er tanniner, betraktet som bioaktive forbindelser på grunn av deres evne til å modulere metabolske prosesser og fremme helse. Mye av tanninene som er inntatt, når tykktarmen, der tarmmikrobiota konverterer dem til metabolitter, inkludert kortkjedede fettsyrer som acetat, propionat og butyrat. Disse kortkjedede fettsyrene er viktige metabolitter som kan ha forskjellige gunstige effekter på vertens tarm og generell helse. De utøver også en potensiell antidiabetisk effekt gjennom følgende mekanismer: (i) forbedring av insulin- og proinsulinnivåer i blodet: affiniteten til tanniner for binding til polysakkarider forårsaker en forsinkelse og en reduksjon i tilgjengeligheten av glukose i mage -tarmkanalen. I tillegg har flere studier rapportert potensialet for å hemme aktivitetene til a-amylase og a-glukosidase gjennom hydrolyserbare tanniner og kondenserte tanniner. (ii) Insulinlignende effekt på insulinfølsomme vev: Procyanidiner kan virke på spesifikke komponenter i den intracellulære insulin-signalveien. (iii) Regulering av antioksidantmiljøet til bukspyttkjertelen: oksidativt stress antas å spille en rolle i insulinresistens da det bestemmer pankreascelle -apoptose. I tillegg er ekspresjonen av gener relatert til antioksidant -enzymer i bukspyttkjertelen lav. Den høye antioksidantkapasiteten til tanniner kan motvirke patogenesen av insulinresistens, sammen med deres antiinflammatoriske egenskaper (de reduserer TNFα, IL-1, IL-6-nivåer, etc.) og hjertebeskyttende egenskaper (de øker superoksid-dismutase, reduserer ROS, etc.).

Spesielt når tanninnene med høy molekylvekt når tarmen mikrobiota i tykktarmen som viser en prebiotisk effekt. I dette tilfellet metaboliseres forbindelsene ved mikroorganismer, og produserer metabolitter med forskjellig biotilgjengelighet, aktivitet eller funksjonell effekt sammenlignet med det originale molekylet. Til slutt kan tanniner modulere sammensetningen og funksjonen til tarmen mikrobiota, selektivt hemme patogener og fremme veksten av gunstige bakterier.

Probiotika er preparater av mikroorganismer som, når de administreres under passende forhold og mengder, forbedrer den mikrobielle balansen i tarmen. Disse mikroorganismer har vist seg å undertrykke betennelse og modulere immunforsvaret ved å forhindre induksjon av IL-8 cytokin i det humane kolonepitel, samt redusere tarmpermeabiliteten, hemme endotoksemi. Probiotiske inngrep kan bidra til behandling av overvekt og tilhørende komplikasjoner ved å forbedre overflod og funksjon av tarmmikrobiota. Derfor kan kombinasjonen av prebiotiske og probiotiske intervensjoner (synbiotika) gi en synergistisk og effektiv terapi for metabolske lidelser. I tillegg er den positive rollen som synbiotisk tilskudd i psykiske sykdommer som stor depressiv lidelse blitt dokumentert. I dette tilfellet kan synbiotika forbedre depresjonssymptomer ved å styrke tryptofanmetabolismen og redusere dopaminmetabolittkonsentrasjoner i amygdaloidbarken.

Det har blitt antydet at synbiotika kan bidra til å forbedre typen og funksjonaliteten til mikrobiota, redusere tarmbetennelse og fremme metthetsfølelse gjennom økt produksjon av hormoner som har denne effekten på kroppen. Derfor kan dette være gunstig når det gjelder å håndtere overvekt. Synbiotika kan spille en avgjørende rolle i å modulere makronæringsstoffmetabolisme ved å produsere kortkjedede fettsyrer, som binder seg til G-protein-koblede reseptorer og øker sekresjonen av glukagonlignende peptid 1 (GLP-1) og peptid YY (PYY) fra enteroendokrine L-celler. Disse bindingene kan utløse insulinproduksjon ved pankreas-ß-celler, hemme glukagonutskillelse, redusere leverglukoneogenese og øke insulinfølsomheten. Synbiotika forbedrer også tarmfunksjonen, løfter mucinproduksjonen og reduserer antallet patogene gramnegative bakterier i tykktarmen. Disse endringene reduserer overføringen av lipopolysakkarider (LPS) over slimhinneveggen og metabolsk endotoksemi, noe som til slutt kan føre til forbedringer i insulinreseptorfunksjon og lavere insulinnivå. Tidligere studier har vist at administrasjonen deres er gunstig for både overvekt og typiske psykologiske symptomer på depresjon eller angst, blant andre. Et 6-ukers intervensjon med synbiotika kan redusere depresjonssymptomer betydelig sammenlignet med en placebo. På dette feltet antydet en metaanalyse fra 2017 at probiotika kan redusere psykologiske symptomer, inkludert angst, depresjon og opplevd stress hos friske voksne frivillige. Tarmmikrobiota kan direkte produsere nevrotransmittere som serotonin og påvirke produksjonen. Den har også immunmodulerende funksjoner og er i stand til å aktivere hypothalamisk-hypofyseaksen gjennom produksjon av proinflammatoriske cytokiner IL-1 og IL-6.

I denne sammenhengen kan et intervensjon med et synbiotikum sammensatt av tanniner og gunstige tarmstammer hos individer med overvekt ha gunstige effekter på helsen ved å øke antioksidantkapasiteten og kortkjedet fettsyreproduksjon, modulere produksjonen av nevrotransmittere involvert i humør og promoterende tarmmikrobiotabalanse, mucalicalicalicalicala og forbedring av satelemotus, og modulerer produksjonen.

Derfor kan det å kombinere synbiotiske intervensjoner gi en synergistisk og effektiv terapi for både metabolske og psykologiske lidelser. Å adressere overvekt omfattende, inkludert både medisinsk behandling, psykologisk støtte for mental helse og synbiotisk behandling, kan forbedre emosjonell tilstand, overvekt og psykologiske lidelser. Til syvende og sist kan det forbedre livskvaliteten for berørte individer. Mens det fortsatt pågår forskning på dette området og det er nødvendig med mer bevis for å forstå disse interaksjonene fullt ut, er det økende bevis som tyder på at tarmmikrobiotahelsen kan påvirke både fysisk og mental helse på komplekse og viktige måter. Å fremme en sunn tarmmikrobiota gjennom et balansert kosthold, inntak av fiberrik mat og probiotika, samt stressreduksjon, kan være gunstig for å adressere både overvekt og psykologiske lidelser, til og med synergistisk med andre behandlinger.

Derfor er vårt mål å avgjøre om inntaket av et synbiotikum sammensatt av melkesyrebakterier, bifidobakterier og tanninbaserte fytokomplekser er i stand til å forbedre engstelige og depressive symptomer, glykemisk profil, og insulinresistens i pasienter med overvekt, avhengig av en tilstedeværelse eller fravær, og insulinmotstanden i pasienter med overvekt, ved en avstandsprofil, glidetprofil, en fravær, en fravær, en fraværende profil, en fraværende profil, en fraværende profil, en fraværende profil, en fraværende profil, en fraværende profil, en fraværende profil, glidetprofil, glidetprofil, glidende profil,. Nevrotransmitterproduksjon, og den differensielle endringen av tarmmikrobiota.

En klinisk-basisk, prospektiv, randomisert, dobbeltblind, placebokontrollert intervensjonsstudie er foreslått for pasienter med overvekt som presenterer depressive og/eller angstlidelser.

For å oppnå de foreslåtte målene, vil 120 pasienter med overvekt som presenterer depressive og/eller angstlidelser (n = 60), og de uten lidelser (n = 60) bli inkludert. Diagnostiske kriterier for depresjon og angst vil være de som er etablert i DSM-5. Videre vil hver gruppe være tilfeldig delt inn i 2 undergrupper, hvorav den ene vil motta synbiotikumet og den andre vil motta den tilsvarende placebo (n = 30 per gruppe) i 12 uker. Randomiseringsprosessen vil bli utført ved hjelp av et program for tilfeldig oppgave. Pasienter vil bli registrert sekvensielt i studien når de deltar på overvektsenheten i endokrinologi og ernæringskonsultasjoner ved Dr. Peset Hospital og oppfyller følgende kriterier:

• Inkluderingskriterier: Pasienter med en BMI på 30-40 kg/m², mellom 18 og 65 år, med en kjent sykdomsvarighet på mer enn fem år. I tillegg vil alle pasienter opprettholde en stabil vekt (<5% svingninger) i løpet av de tre månedene før studien.
• Eksklusjonskriterier: Pasienter som har tatt antibiotika 3 måneder før studiestart, samt forhåndsbruk av tilskudd som inneholder probiotika og/eller prebiotika. Pasienter som har diagnosen tarmsykdommer, og de som har gjennomgått tidligere gastrointestinal kirurgi. Sekundære årsaker til overvekt, diabetes type 1, graviditet eller amming, aktiv neoplastisk sykdom, og de med etablert lever- eller nyresvikt vil bli ekskludert. Til slutt vil pasienter med andre diagnostiserte psykiatriske lidelser forskjellige fra angst og/eller depresjon, og de som gjennomgår behandling med antidepressiva før studien start blir ekskludert.

Før studien starter, vil pasientene, eller deres juridiske representant, signere et informert samtykkeskjema etter å ha blitt forklart studiens mål og løst eventuelt tvil. Denne studien holder seg til de etiske retningslinjene som er etablert for menneskelig eksperimentering i Helsingfors og dens påfølgende oppdateringer; Det vil også ha godkjenning fra sykehusets etiske komité. Den medisinske informasjonen og all data samlet inn under studien vil bli holdt konfidensiell i samsvar med den organiske loven 15/1999 om beskyttelse av personopplysninger og det tilsvarende kongelige dekret 1720/07.

I begynnelsen av studien vil kostholdseksperten utføre en individualisert ernæringsmessig vurdering for å beregne hvileregenyrutgiftene, og personaliserte hypokaloriske dietter vil bli opprettet, og reduserer 500 kcal fra hver enkelt og total dags energiutgifter, mens du opprettholder det anbefalte inntaket av hver makronutrikning (50-5% carbo. Kostholdsovervåking vil bidra til å unngå skjevhet og forsterke overholdelse av kostholdet, sammen med overvåking av bivirkninger. Behandlingsgruppen vil motta en kapsel med en synbiotisk formulering, og kontrollgruppen vil motta en placebo -kapsel (maltodextrin), og begge gruppene vil bli instruert om å ta den daglig i 12 uker. Synbiotikumet vil bestå av en probiotisk del sammensatt av Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei og Bifidobacterium lactis (2 × 10⁹ CFU/g hver), og en prebiotisk del sammensatt av fytokomplekser basert på tanniner (350 mg) hentet fra forskjellige kilder. Placebo vil se identisk ut med synbiotisk kapsel. For å opprettholde blending for personalet som deltar i rettssaken, vil utarbeidelsen av studieproduktene og fyllingen av containerne bli gjort av selskapene Silvateam og Sacco, som vil operere under ublindede forhold.

I begynnelsen av intervensjonen vil det bli gjennomført et strukturert psykologisk intervju for å samle informasjon om pasientens nåværende tilstand; Historie og evolusjon av sykdommen (overvekt og psykologisk lidelse), spisemønster, søvnkvalitet, tilhørende psykologiske komorbiditeter, familie og sosiale områder, motivasjon for endring og forventninger. Effekten av overvekt på pasientens livskvalitet (emosjonell, sosial og personlig) vil bli evaluert. Psykologisk oppfølging vil finne sted ved 4, 6 og 12 uker av studien. Under intervensjonene vil motivasjonsstatus, spisevaner, livsstil, selvkontroll, kognitiv atferdsendring og forebygging av tilbakefall bli vurdert.

I begynnelsen av studien og etter kostholdsintervensjonen, blir fastende blodprøver (12 timer), spytt, urin (24 timer) og avføringsprøver. Følgende parametere vil bli bestemt:

1. Antropometriske parametere og kroppssammensetningsvekt og høyde vil bli målt, og BMI vil bli beregnet (vekt / (høyde) ²). Midje og hofteomkrets, så vel som blodtrykk, vil også bli bestemt. I tillegg vil en vektoranalyse ved bruk av bioelektrisk impedans (SECA MBCA 550®) bli utført både i begynnelsen og på slutten av intervensjonen.

   Pasientene vil fullføre en 3-dagers kostholdslogg (inkludert 1 helgedag) i begynnelsen, 6 uker og 12 uker, sammen med IPAQ-spørreskjemaet for å overvåke fysisk aktivitet. De vil også fylle ut et spørreskjema om overholdelse av produkt og etterlevelse, og hvis de har opplevd noen bivirkninger etter å ha tatt produktet.

2. Psykologisk evaluering Først vil vi anvende spørreskjemaet for depresjon og stressskala 21 (DASS-21). Basert på de første resultatene, vil stress, angst og depresjon bli evaluert ved bruk av tre validerte skalaer: Beck Depression Inventory (BDI-2), den opplevde stressskalaen (PSS), State-Trait Angst Inventory (STAI) og selvtillit ved bruk av Rosenberg-spørreskjemaet. Denne evalueringen vil tillate fagets klassifisering i begge grupper (overvekt med og uten angst og/eller depresjon), og sjekk om det er en betydelig forbedring etter synbiotisk inntaksgruppe.
3. Biokjemiske parametere En komplett lipidprofil vil bli vurdert, og bestemme total kolesterol (TC) og triglyserider (TG) ved bruk av enzymatiske metoder, HDL-C (direkte nedbørmetode), LDL-C (beregnet ved bruk av Friedewalds formel) og VLDL-C (TG/5). Apolipoproteiner B og A-I vil bli bestemt ved nefelometri. Ikke-HDL-kolesterol (TC-HDL) og den aterogene plasmaindeksen (API = log (TG/HDL)) vil bli beregnet. Fastende blodsukker og insulin vil bli målt ved bruk av henholdsvis den heksokinase enzymatisk metode og kjemiluminescens, og HOMA -indeksen vil bli beregnet for å vurdere insulinresistens. Lever- og nyrefunksjon, fullstendig blodtelling, koagulasjon og hormonell profil vil bli evaluert ved bruk av følgende markører: AST, ALT, GGT, LDH, alkalisk fosfatase, kreatinin, glomerulær filtreringshastighet, A1C og skjoldbruskfunksjon (TSH, fri T4). Alle disse parametrene vil bli bestemt i den kliniske analysetjenesten til Dr. Peset University Hospital.
4. Biomarkørbestemmelse D.1) Inflammatoriske parametere og antioksidantkapasitet Den inflammatoriske tilstanden vil bli vurdert ved å bestemme konsentrasjonene av ultrasensitivt C-reaktivt protein, IL6, TNF, IL1B, adiponectin, PAI-1 og IL10, ved bruk av Luminex xMap-Multiplex teknologi. Eksempelbehandling og dataanalyse vil bli utført etter produsentens instruksjoner. Serumnivåer av LP -er vil bli bestemt av ELISA. Total antioksidantkapasitet i serum vil bli bestemt ved bruk av E-BQC-systemet (Bioquochem).

D.2) Bestemmelse av peptider og tarmfunksjonsserumnivåer av tarmhormoner (GIP, GLP1, PYY, Ghrelin, Leptin, CCK) vil bli bestemt ved bruk av Luminex X-MAP-teknologi. For å evaluere tarmpermeabilitet og mikrobiell translokasjon, vil plasmanivåer av zonulin, occludin, LBP, FABP2/I-FABP og REG3A bli målt ved hjelp av ELISA-sett. Deteksjon av ß-glukan i plasma vil bli utført ved bruk av Limulus amebocyttlysat (LAL) -analyse.

D.3) Nevrotransmitter peptidanalyse kortisol, dopamin, serotonin og oksytocinnivå i plasma, 24-timers urin eller spytt vil bli bestemt ved bruk av ELISA-sett eller Luminex X-MAP-teknologi.

D.4) Metabolomisk analyse NMR (kjernemagnetisk resonans) vil bli brukt for å oppnå omfattende metabolske profiler fra store, velfenotypede pasientkohorter. Opprinnelig vil alle prøver bli analysert ved NMR, og oppnå en global metabolsk profil på opptil 40 metabolitter inkludert aminosyrer, sukker, fosfolipider, betennelsesmarkører, glykoproteiner, lipopartikler og noen mikrobielle ko-metabolitter.

Statistisk betydning av de forskjellige metabolittene vil bli analysert ved bruk av samvariasjonstester korrigert for potensiell falsk oppdagelsesrate (FDR) ved bruk av SPSS og MATLAB -programvare. Kjemometrisk analyse for å konstruere diagnostiske, klassifisering og prediktive modeller vil bli utført ved hjelp av tilpassede MATLAB-skript og PLS-verktøykasse for PCA, projeksjon til latent struktur-diskriminerende analyse (PLS-DA), hierarkisk klyngeanalyse (HCA) og lignende tilnærminger på spektrale data for å klassifisere grupper basert på kliniske og intervensjonsparametere. Metabolske nettverk skal bygges ved hjelp av Cytoscape og Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) for genomikk, integrere metabolomiske resultater og andre molekylære utfall av prosjektet. Til slutt vil alle resultatene bli evaluert gjennom kryssvalidering, og den diskriminerende/prediktive kraften til de forskjellige metabolittene og score vil bli analysert ved bruk av mottakerens driftskarakteristikk (ROC) kurver.

D.5) Studie av mikrobiota -nukleinsyrerensing, 16S rRNA -genamplifisering og sekvensering Først vil avføringsprøvene bli triturert, homogenisert og lysert ved bruk av et FASTPREP -system (MP -biomedisin). Totalt DNA vil bli trukket ut etter den automatiserte Magna Pure LC -protokollen (Roche, Manheim, Tyskland) i henhold til produsentens instruksjoner. Metagenomiske biblioteker vil bli oppnådd ved bruk av Nextera XT -settet etter Illuminas protokoll. V3-V4-regionene i 16S rRNA vil bli forsterket, og bibliotekene vil bli renset etter Illuminas protokoll.

MiSeq-sekvensering vil bli utført ved hjelp av V3-settet (2x300 sykluser), og genererer 300-bp-leser for hver 65 timer, fra hver ende av amplikonet. Ultra-dyp sekvensering vil bli utført ved hjelp av en Illumina Sequencer ved Fisabio-Salud Pública Center.

Filogenetisk analyse av 16S rRNA vil bli utført ved hjelp av Qiime -programvare. Funksjonell tildeling av metagenomiske avlesninger vil bli utført ved bruk av dedikerte bioinformatikk-rørledninger utviklet på Fisabio (integrering av nyskapende metodologier i feltet med tilpassbare skript).

Mikrobielle samfunnsanalyser (biologisk mangfold, klynging, varmekart) og statistisk analyse vil bli utført ved hjelp av R -programvare. For biomarkørfunnsanalyse vil Lefse -plattformen bli brukt.

d.6) Genekspresjonsanalyse Vi vil evaluere endringer i genuttrykknivåer ved bruk av NanoString® -teknologi for NCounter®, som vil tillate oss å identifisere messenger -molekyler som er endret mellom overvektige pasienter med/uten psykologiske lidelser. Dette systemet muliggjør hybridisering av hvert målmolekyl med en fluorescerende sonde for individuell identifisering uten retrotranscription eller amplifisering, ved bruk av minimale prøvemengder. Totalt RNA vil bli ekstrahert fra PBMCs ved bruk av Geneall® Ribospintm Total Kit, og fra bare 100-200 ng totalt RNA vil multiplex-metabolismepanelet vurdere 768 gener, med fokus på inflammatoriske og metabolske veier. Resultatene vil bli analysert ved bruk av NSolver -verktøyet. Disse eksperimentene vil bli underleverandør til Diagnostica Longwood, S.L.

D.7) In vitro-studie av virkningsmekanismen til tykktarms fordøyelse på komplekse cellulære modeller som simulerer tarmen-hjerne-aksen Bruken og utformingen av en organ-på-chip (OOC) modell foreslås, med tarmceller i kontakt med fermentering. For biomarkøranalyse vil endringer på tarmnivå i inflammatoriske cytokiner og neuronale cellereseptorforandringer bli observert, noe som senere kan være relatert til in vivo -resultatene. Utformingen vil omfatte å oppnå tilstrekkelig kontrollprøve replikater, med tykktarms fordøyelse etter stabilisering, og med tykktarms fordøyelse etter behandling med placebo eller synbiotikum.