Terapeutisk potentiale hos et synbiotikum til forbedring af mental sundhed hos personer med fedme.

Fedme er en af ​​de mest udbredte kroniske sygdomme globalt, der er resultatet af en kompleks interaktion mellem diætvaner og miljømæssige og genetiske faktorer. I henhold til statistikken fra Verdenssundhedsorganisationen er mere end 1,9 milliarder voksne overvægtige, og ca. 650 millioner mennesker lider af fedme. Desuden har disse personer en højere risiko for at udvikle adskillige metaboliske lidelser, såsom type 2-diabetes, åreforkalkning, hjerte-kar-sygdomme, ikke-alkoholisk fedtleversygdom, reproduktionsproblemer og nogle former for kræft. Livsstil og farmakologiske interventioner er to af de vigtigste strategier til behandling af fedme. Imidlertid accepteres strenge livsstilsændringer ofte kun af et begrænset antal individer, og medikamenter mod anti-besiddelse kan have nogle bivirkninger, mens deres effektivitet ofte mindskes efter langvarig brug. Derfor er et betydeligt uopfyldt behov manglen på praktisk og effektiv supplerende terapier til behandling af fedme.

Der er en tovejsforening mellem fedme og humørforstyrrelser såsom depression og angst. Fedme har også en negativ effekt på sundhed og livskvalitet såvel som på selvværd. Specifikt estimeres det, at ca. 50% af individer med fedme udvikler depressive og ængstelige træk, som er mere almindelige hos kvinder og hyppigere, når graden af ​​fedme øges. Desuden lider mennesker med fedme ofte en betydelig følelsesmæssig byrde, øger stress, daglige bekymringer og endda oplever vanskeligheder med at udføre daglige livsaktiviteter. Tilføjet til stigmatiseringen af ​​sygdommen, der har en negativ indvirkning på selvværd og kropsbillede, forværrer dette livskvaliteten og følelsesmæssige tilstande for disse individer. Derfor er mental sundhed tæt forbundet med fedme, og at tackle både de fysiske og følelsesmæssige aspekter er afgørende for at fremme generelt velvære. Det er vigtigt at anvende en holistisk tilgang, der inkluderer interventioner i kost, fysisk træning og følelsesmæssig og psykologisk støtte til dem, der kæmper for at opretholde en sund vægt og tilstrækkelig mental sundhed.

Tarm-hjerne-aksen er et tovejs kommunikationsnetværk mellem tarmen og det centrale nervesystem, der fungerer gennem neuroimmune og neuroendokrine processer. Dens involvering i begyndelsen af ​​depression er blevet postuleret og formidles af molekyler, såsom kortkædede fedtsyrer, gamma-aminobutyric acid (GABA) og tryptophan-metabolitter, der stammer fra tarmmikrobiota. I situationer med dysbiose eller ændringer i mikrobiota-homeostase kan tarm-hjerne-veje findes dereguleret og er forbundet med neuroinflammation og ændret blod-hjerne-barrierepermeabilitet. Derudover kan ændringer i tarmmikrobiota bidrage til en depressiv tilstand ved direkte at påvirke frigivelsen af ​​neurotransmittere, såsom serotonin og dopamin, hvilket påvirker stressresponsen og hypothalamisk-hypofyse-adrenal (HPA) akse, der påvirker cyteok-afledt neurotrofisk faktor (BDNF) niveauer og udløser frigørelsen af ​​inflammatorisk cytok. For eksempel er depression forbundet med en øget frigivelse af i C-reaktivt protein (CRP) og cytokiner, såsom IL-1, IL-2, IL-6, IFN-Y og IL-1ß.

Fedme forårsager også betændelse på tarmniveau, insulinresistens og kropsfedtaflejringer. Forskning på dette felt antyder, at der er et tovejsforhold mellem sammensætningen af ​​tarmmikrobiota, fedme og insulinresistens. Det er blevet observeret, at mennesker med fedme har en anden mikrobiel sammensætning sammenlignet med dem med en sund vægt. Det antages, at denne ændring i tarmmikrobiota yderligere kunne bidrage til udviklingen af ​​fedme ved at øge evnen til at udtrække energi fra fødevarer, fremme lavkvalitetsinflammation, øge lipogenese, mindske fedtsyreoxidation og øge triglyceridakkumulering på levereniveauet, blandt andre mekanismer.

I betragtning af tarmmikrobiotas rolle i reguleringen af ​​immunsystemet og betændelse observerer vi, at kronisk betændelse er knyttet til både fedme og psykologiske lidelser, herunder depression og angst. Disse ændringer i tarmmikrobiota kan bidrage til systemisk betændelse og immundysfunktion, hvilket igen kan påvirke både fedme og psykologiske lidelser. Nogle tarmbakterier har evnen til at producere neurotransmittere, der er absorberbare på tarmniveau, såsom serotonin eller GABA, som er vigtige for at regulere humør og angst. Det antages, at ændringer i sammensætningen af ​​tarmmikrobiota kan påvirke produktionen af ​​disse neurotransmittere og derfor påvirke mental sundhed.

Selvom livsstilsændringer, såsom kaloribegrænsning og fysisk træning, betragtes som de bedste terapier for vægttab, er der andre supplerende muligheder, såsom modulering af tarmmikrobiota, der kan være nyttig for mennesker med fedme. Undersøgelser, hvor prebiotika, probiotika og synbiotika blev administreret til individer med fedme, har vist deres fordelagtige virkninger på vægttab og andre metaboliske parametre gennem moduleringen af ​​tarmmikrobiotaen. På grund af de nye beviser, der indebærer tarm-hjerne-aksen i fedme og dens forhold til psykologiske lidelser, har der været øget interesse for udviklingen af ​​disse behandlinger som terapier til gendannelse af tarmmikrobiota.

Prebiotika er funktionelle fødevarer i betragtning af deres fordelagtige rolle i fremme af sundhed og forebyggelse af sygdom. Et eksempel er tanniner, der betragtes som bioaktive forbindelser på grund af deres evne til at modulere metaboliske processer og fremme sundhed. Meget af tanninerne, der indtages, når tarmtarmen, hvor tarmmikrobiota konverterer dem til metabolitter, herunder kortkædede fedtsyrer, såsom acetat, propionat og butyrat. Disse kortkædede fedtsyrer er vigtige metabolitter, der kan have forskellige fordelagtige virkninger på værtens tarm og generelle helbred. De udøver også en potentiel antidiabetisk virkning gennem følgende mekanismer: (i) Forbedring af insulin- og proinsulinniveauer i blodet: affiniteten af ​​tanniner til binding til polysaccharider forårsager en forsinkelse og et fald i tilgængeligheden af ​​glukose i mave -tarmkanalen. Derudover har adskillige undersøgelser rapporteret potentialet for at hæmme aktiviteterne af a-amylase og a-glucosidase gennem henholdsvis hydrolyserbare tanniner og kondenserede tanniner. (ii) Insulinlignende effekt på insulinfølsomme væv: Procyanidiner kan virke på specifikke komponenter i den intracellulære insulinsignaleringsvej. (iii) Regulering af antioxidantmiljøet i pancreasceller: Oxidativt stress antages at spille en rolle i insulinresistens, da det bestemmer pancreascelle -apoptose. Derudover er ekspressionen af ​​gener relateret til antioxidantenzymer i bugspytkirtlen lav. Tanninernes høje antioxidantkapacitet kan modvirke patogenesen af ​​insulinresistens sammen med deres antiinflammatoriske egenskaber (de reducerer TNFa, IL-1, IL-6-niveauer osv.) Og hjertebeskyttende egenskaber (de øger superoxid-dismutase, falder ROS osv.).

Specifikt når tanniner med høj molekylvægt i tarmmikrobiotaen i tyktarmen, der viser en prebiotisk virkning. I dette tilfælde metaboliseres forbindelserne af mikroorganismer og producerer metabolitter med forskellig biotilgængelighed, aktivitet eller funktionel virkning sammenlignet med det originale molekyle. Endelig kan tanniner modulere sammensætningen og funktionen af ​​tarmmikrobiota, selektivt inhibering af patogener og fremme væksten af ​​fordelagtige bakterier.

Probiotika er præparater af mikroorganismer, der, når de administreres under passende betingelser og mængder, forbedrer den mikrobielle balance i tarmen. Disse mikroorganismer har vist sig at undertrykke inflammation og modulere immunsystemet ved at forhindre induktion af IL-8-cytokinet i det humane kolonepitel samt reducere tarmpermeabiliteten, hvilket hæmmer endotoksæmi. Probiotiske interventioner kan bidrage til behandling af fedme og tilknyttede komplikationer ved at forbedre overflod og funktion af tarmmikrobiota. Derfor kan kombinationen af ​​prebiotiske og probiotiske interventioner (synbiotika) tilvejebringe en synergistisk og effektiv terapi til metaboliske lidelser. Derudover er den positive rolle af synbiotisk tilskud i psykiske sygdomme, såsom større depressiv lidelse, dokumenteret. I dette tilfælde kunne synbiotika forbedre depressionssymptomer ved at forbedre tryptophanmetabolismen og reducere dopaminmetabolitkoncentrationer i amygdaloid cortex.

Det er blevet antydet, at synbiotika kan hjælpe med at forbedre typen og funktionaliteten af ​​mikrobiota, reducere tarmbetændelse og fremme metthed gennem øget produktion af hormoner, der har denne virkning på kroppen. Derfor kan dette være fordelagtigt ved håndtering af fedme. Synbiotika kan spille en afgørende rolle i modulering af makronæringsmetabolisme ved at producere kortkædede fedtsyrer, der binder til G-protein-koblede receptorer og øger sekretionen af ​​glucagon-lignende peptid 1 (GLP-1) og peptid YY (PYY) fra enteroendokrine L-celler. Disse bindinger kan udløse insulinproduktion ved pancreas-ß-celler, hæmme glukagon-sekretion, mindske leverglukoneogenese og øge insulinfølsomheden. Synbiotika forbedrer også tarmfunktionen, hæver mucinproduktionen og reducerer antallet af patogene gramnegative bakterier i tyktarmen. Disse ændringer reducerer transmission af lipopolysaccharider (LPS) over slimhindevæggen og metabolisk endotoksæmi, hvilket i sidste ende kan føre til forbedringer i insulinreceptorfunktion og lavere insulinniveauer. Tidligere undersøgelser har vist, at deres administration er fordelagtig for både fedme og typiske psykologiske symptomer på depression eller angst, blandt andre. En 6-ugers intervention med synbiotika kan reducere depressionssymptomer markant sammenlignet med en placebo. På dette område antydede en metaanalyse i 2017, at probiotika kan reducere psykologiske symptomer, herunder angst, depression og opfattet stress hos raske voksne frivillige. Tarmmikrobiotaen kan direkte producere neurotransmittere som serotonin og påvirke dets produktion. Det har også immunmodulerende funktioner og er i stand til at aktivere den hypothalamiske hypofyse akse gennem produktion af proinflammatoriske cytokiner IL-1 og IL-6.

I denne sammenhæng kunne en intervention med et synbiotikum, der er sammensat af tanniner og gavnlige tarmstammer hos individer med fedme, have gavnlige virkninger på helbredet ved at øge antioxidantkapaciteten og fremme af fedtsyreproduktion, modulere produktionen af ​​neurotransmitterne involveret i metthed og humør og fremme af gutmikrobiota-balance, formindskelse af beskyttelse af beskyttelse og forbedret intestinal permeabilitet.

Derfor kan kombination af synbiotiske interventioner give en synergistisk og effektiv terapi til både metaboliske og psykologiske lidelser. Adressering af fedme omfattende, herunder både medicinsk behandling, psykologisk støtte til mental sundhed og synbiotisk behandling, kunne forbedre følelsesmæssig tilstand, fedme og psykologiske lidelser. I sidste ende kunne det forbedre livskvaliteten for berørte personer. Mens forskning på dette område stadig er i gang, og der er behov for mere bevis for fuldt ud at forstå disse interaktioner, er der voksende beviser, der antyder, at tarmmikrobiota -sundhed kan påvirke både fysisk og mental sundhed på komplekse og betydningsfulde måder. At fremme en sund tarmmikrobiota gennem en afbalanceret diæt, indtagelse af fiberrige fødevarer og probiotika såvel som stressreduktion kan være fordelagtigt for at tackle både fedme og psykologiske lidelser, endda synergistisk med andre behandlinger.

Derfor er vores mål at afgøre, om indtagelse af et synbiotisk sammensat af mælkesyrebakterier, bifidobakterier og tanninbaserede fytokomplekser er i stand til at forbedre ængstelige og depressive symptomer, glycemisk profil og insulinresistens hos patienter med obnesitet, afhængigt af tilstedeværelsen eller fraværet af psykologiske diskreserater, gennem forbedring af den inflammatoriske profil, appetit-kontrol, neur. og den differentielle ændring af tarmmikrobiota.

En klinisk-basisk, prospektiv, randomiseret, dobbeltblind, placebokontrolleret interventionsundersøgelse foreslås for patienter med fedme, der præsenterer depressive og/eller angstlidelser.

For at nå de foreslåede mål vil 120 patienter med fedme, der præsenterer depressive og/eller angstlidelser (n = 60), og patienter uden lidelser (n = 60) inkluderet. De diagnostiske kriterier for depression og angst vil være dem, der er etableret i DSM-5. Desuden vil hver gruppe blive tilfældigt opdelt i 2 undergrupper, hvoraf den ene vil modtage synbiotikumet, og den anden modtager den tilsvarende placebo (n = 30 pr. Gruppe) i 12 uger. Randomiseringsprocessen udføres ved hjælp af et softwareprogram til tilfældig tildeling. Patienter vil blive tilmeldt sekventielt i undersøgelsen, når de deltager i fedmeenheden i endokrinologi og ernæringskonsultationer på Dr. Peset Hospital og opfylder følgende kriterier:

• Inkluderingskriterier: Patienter med en BMI på 30-40 kg/m² i alderen 18 og 65 år med en kendt sygdomsvarighed på mere end fem år. Derudover vil alle patienter opretholde en stabil vægt (<5% udsving) i løbet af de 3 måneder før undersøgelsen.
• Ekskluderingskriterier: Patienter, der har taget antibiotika 3 måneder før studiets start, samt forudgående anvendelse af kosttilskud, der indeholder probiotika og/eller prebiotika. Patienter, der er diagnosticeret med tarmsygdomme, og dem, der har gennemgået tidligere gastrointestinal kirurgi. Sekundære årsager til fedme, type 1 -diabetes, graviditet eller amning, aktiv neoplastisk sygdom og dem med etableret lever- eller nyresvigt udelukkes. Endelig vil patienter med andre diagnosticerede psykiatriske lidelser, der er forskellige fra angst og/eller depression, og dem, der gennemgår behandling med antidepressiva inden undersøgelsens start, også blive udelukket.

Før de startede undersøgelsen, vil patienterne eller deres juridiske repræsentant underskrive en informeret samtykkeformular efter at have været forklaret undersøgelsens mål og løse enhver mulig tvivl. Denne undersøgelse overholder de etiske retningslinjer, der er fastlagt til menneskelig eksperimentering i Helsinki og dens efterfølgende opdateringer; Det vil også have godkendelse fra hospitalets etiske udvalg. De medicinske oplysninger og alle data indsamlet under undersøgelsen holdes fortrolige i overensstemmelse med den organiske lov 15/1999 om beskyttelse af personoplysninger og det tilsvarende kongelige dekret 1720/07.

I begyndelsen af ​​undersøgelsen vil den diætist-ernæringsmand udføre en individualiseret ernæringsvurdering for at beregne de hvilende energiudgifter, og personaliserede hypokaloriske diæter vil blive oprettet, hvilket reducerer 500 kcal fra hver enkelt persons samlede daglige energiudgifter, mens de anbefalede det anbefalede indtag af hver makronutrient (50-55% carbohydrater, 30-35%, fedt, og 15%). Diætovervågning vil hjælpe med at undgå bias og styrke overholdelse af kosten sammen med overvågning af bivirkninger. Behandlingsgruppen modtager en kapsel med en synbiotisk formulering, og kontrolgruppen modtager en placebo -kapsel (maltodextrin), og begge grupper vil blive bedt om at tage den dagligt i 12 uger. Synbiotikumet vil bestå af en probiotisk del sammensat af lactobacillus acidophilus, lactobacillus casei og bifidobacterium lactis (2 × 10⁹ CFU/g hver) og en prebiotisk del sammensat af phytocomplexes baseret på tanniner (350 mg) ekstraheret fra forskellige kilder. Placebo ser identisk ud med synbiotisk kapsel. For at opretholde blinding for det personale, der deltager i forsøget, vil forberedelsen af ​​undersøgelsesprodukterne og udfyldningen af ​​containerne blive udført af virksomhederne Silvateam og Sacco, som vil fungere under ublindede forhold.

I begyndelsen af ​​interventionen gennemføres en struktureret psykologisk samtale for at indsamle information om patientens nuværende tilstand; Historie og udvikling af sygdommen (fedme og psykologisk lidelse), spisemønstre, søvnkvalitet, tilknyttede psykologiske komorbiditeter, familie og sociale områder, motivation for forandring og forventninger. Virkningen af ​​fedme på patientens livskvalitet (følelsesmæssig, social og personlig) vil blive evalueret. Psykologisk opfølgning finder sted på 4, 6 og 12 uger af undersøgelsen. Under interventioner, motivationsstatus, spisevaner, livsstil, selvkontrol, kognitiv adfærdsændring og forebyggelse af tilbagefald vurderes.

I begyndelsen af ​​undersøgelsen og efter diætinterventionen opsamles faste blodprøver (12 timer), spyt, urin (24 timer) og afføringsprøver. Følgende parametre bestemmes:

1. Antropometriske parametre og kropssammensætningsvægt og højde måles, og BMI beregnes (vægt / (højde) ²). Talje og hofteomkrets såvel som blodtryk bestemmes også. Derudover udføres en vektoranalyse ved hjælp af bioelektrisk impedans (SECA MBCA 550®) både i begyndelsen og i slutningen af ​​interventionen.

   Patienter afslutter en 3-dages diætlog (inklusive 1 weekenddag) i begyndelsen, 6 uger og 12 uger sammen med IPAQ-spørgeskemaet for at overvåge fysisk aktivitet. De vil også udfylde et spørgeskema om produktadhæsion og overholdelse, og hvis de har oplevet nogen bivirkninger efter at have taget produktet.

2. Psykologisk evaluering først vil vi anvende depressionens angst og stressskala 21 (DASS-21) spørgeskema. Baseret på de indledende resultater evalueres stress, angst og depression ved hjælp af tre validerede skalaer: Beck Depression Inventory (BDI-2), den opfattede stressskala (PSS), State-Trait Angst Inventory (STAI) og selvværd ved hjælp af Rosenberg-spørgeskemaet. Denne evaluering tillader individets klassificering i både grupper (fedme med og uden angst og/eller depression) og kontrollerer, om der er en betydelig forbedring efter synbiotisk indsugningsgruppe.
3. Biokemiske parametre En komplet lipidprofil vurderes, hvilket bestemmer total kolesterol (TC) og triglycerider (TG) ved anvendelse af enzymatiske metoder, HDL-C (direkte nedbørsmetode), LDL-C (beregnet ved hjælp af Friedewalds formel) og VLDL-C (TG/5). Apolipoproteiner B og A-I vil blive bestemt ved nephelometri. Ikke-HDL-kolesterol (TC-HDL) og det atherogene plasmaindeks (API = log (TG/HDL)) beregnes. Fastende blodsukker og insulin måles ved anvendelse af hexokinase enzymatisk metode og kemiluminescens, og HOMA -indekset beregnes for at vurdere insulinresistens. Lever- og nyrefunktion, komplet blodantal, koagulation og hormonel profil vil blive evalueret ved hjælp af følgende markører: AST, ALT, GGT, LDH, alkalisk phosphatase, creatinin, glomerulær filtreringshastighed, A1C og skjoldbruskkirtelfunktion (TSH, gratis T4). Alle disse parametre vil blive bestemt i den kliniske analysetjeneste på Dr. Peset University Hospital.
4. Biomarkørbestemmelse D.1) Inflammatoriske parametre og antioxidantkapacitet Den inflammatoriske tilstand vurderes ved at bestemme koncentrationerne af ultrasensitive C-reaktive protein, IL6, TNF, IL1B, adiponectin, PAI-1 og IL10 ved anvendelse af Luminex XMAP-multiplex-teknologi. Prøvebehandling og dataanalyse udføres efter producentens instruktioner. Serumniveauer af LPS bestemmes af ELISA. Den samlede antioxidantkapacitet i serum bestemmes ved hjælp af E-BQC-systemet (Bioquochem).

D.2) Bestemmelse af peptider og tarmfunktionsserumniveauer af tarmhormoner (GIP, GLP1, PYY, Ghrelin, Leptin, CCK) bestemmes ved hjælp af Luminex X-MAP-teknologi. For at evaluere tarmpermeabilitet og mikrobiel translokation måles plasmaniveauer af zonulin, occludin, LBP, FABP2/I-FABP og REG3A ved hjælp af ELISA-sæt. Påvisning af ß-glucan i plasma udføres under anvendelse af limulus amebocytlysat (LAL) assay.

D.3) Neurotransmitter-peptidanalyse cortisol, dopamin, serotonin og oxytocinniveauer i plasma, 24-timers urin eller spyt vil blive bestemt ved hjælp af ELISA-sæt eller Luminex X-MAP-teknologi.

D.4) Metabolomisk analyse NMR (nuklear magnetisk resonans) vil blive anvendt for at opnå omfattende metaboliske profiler fra store, velfænotype patientkohorter. Oprindeligt analyseres alle prøver ved hjælp af NMR og opnås en global metabolisk profil på op til 40 metabolitter, herunder aminosyrer, sukker, phospholipider, inflammationsmarkører, glycoproteiner, lipopartikler og nogle mikrobielle co-metabolitter.

Statistisk signifikans af de forskellige metabolitter vil blive analyseret ved hjælp af covariance -tests korrigeret for potentiel falsk opdagelsesfrekvens (FDR) ved hjælp af SPSS og MATLAB -software. Kemometrisk analyse til konstruktion af diagnostiske, klassificerings- og forudsigelsesmodeller udføres ved hjælp af brugerdefinerede MATLAB-scripts og PLS-værktøjskasse til PCA, projektion til latent struktur-diskriminerende analyse (PLS-DA), hierarkisk klyngeanalyse (HCA) og lignende fremgangsmåder på spektrale data til klassificeringsgrupper baseret på kliniske og interventionsparameter. Metaboliske netværk vil blive bygget ved hjælp af Cytoscape og Kyoto Encyclopedia af gener og genomer (KEGG) til genomik, integration af metabolomiske resultater og andre molekylære resultater af projektet. Endelig evalueres alle resultater gennem krydsvalidering, og den diskriminerende/forudsigelige kraft af de forskellige metabolitter og scoringer vil blive analyseret ved hjælp af modtagerens driftskarakteristiske (ROC) kurver.

D.5) Undersøgelse af mikrobiota -nukleinsyreoprensning, 16S rRNA -genamplifikation og sekventering først, vil afføringsprøverne blive tritureret, homogeniseret og lyseret ved hjælp af et FastPrep -system (MP -biomedicinske). Total DNA ekstraheres efter den automatiserede Magna Pure LC -protokol (Roche, Manheim, Tyskland) i henhold til producentens instruktioner. Metagenomiske biblioteker opnås ved hjælp af Nextera XT -sæt efter Illuminas protokol. V3-V4-regionerne i 16S rRNA vil blive forstærket, og bibliotekerne renses efter Illuminas protokol.

MISEQ-sekventering udføres ved hjælp af V3-kittet (2x300 cyklusser), hvilket genererer 300 bp-læsninger for hver 65 timer, startende fra hver ende af ampliconet. Ultra-dyb sekventering udføres ved hjælp af en Illumina-sequencer på Fisabio-Salud Pública Center.

Fylogenetisk analyse af 16S rRNA vil blive udført ved hjælp af Qiime -software. Funktionel tildeling af metagenomiske læsninger udføres ved hjælp af dedikerede bioinformatikrørledninger udviklet på Fisabio (integration af avancerede metodologier i marken med tilpassede scripts).

Mikrobielle samfundsanalyser (biodiversitet, klynger, varmekort) og statistisk analyse udføres ved hjælp af R -software. Til analyse af biomarkørens opdagelse vil Lefse -platformen blive brugt.

D.6) Genekspressionsanalyse Vi vil evaluere ændringer i genekspressionsniveauer ved hjælp af NanoString® -teknologi til NCounter®, som giver os mulighed for at identificere messenger -molekyler, der ændres mellem overvægtige patienter med/uden psykologiske lidelser. Dette system muliggør hybridisering af hvert målmolekyle med en fluorescerende sonde til individuel identifikation uden retrotranscription eller amplifikation ved anvendelse af minimale prøvemængder. Total RNA ekstraheres fra PBMC'er ved hjælp af GeneAll® Ribospintm Total Kit, og fra kun 100-200 ng total RNA vil multiplexmetabolismepanelet vurdere 768 gener med fokus på inflammatoriske og metaboliske veje. Resultaterne analyseres ved hjælp af NSOLVER -værktøjet. Disse eksperimenter vil blive underentrepriser til Diagnostica Longwood, S.L.

D.7) In vitro-undersøgelse af virkningsmekanismen for colonic-fordøjelsessindretning på komplekse cellulære modeller, der simulerer tarm-hjerne-aksen anvendelsen og design af en organ-på-chip (OOC) -model, foreslås med tarmceller i kontakt med gæren til at undersøge mekanismen fra patienten) og neuroblastomceller i kontakt med det absorberede materiale, der er specielt designet til at undersøge mekanismen af ​​synet af synbicatakulære. Til biomarkøranalyse observeres ændringer på tarmniveauet i inflammatoriske cytokiner og neuronale celleceptorændringer, som senere kan relateres til in vivo -resultaterne. Designet vil omfatte opnåelse af tilstrækkelige kontrolprøve -replikater, med colonic -fordøjelse efter stabilisering og med colonic -fordøjelse efter behandling med placebo eller synbiotikum.