sCD163 jako potencjalny biomarker w zespole Guillain-Barré (GBS)

Zespół Guillain-Barré (GBS) to ostra zapalna polineuropatia demielinizacyjna (AIDP), która często jest wywoływana przez infekcję. GBS charakteryzuje się postępującym osłabieniem i drętwieniem oraz utratą odruchów ścięgnistych. Może również obejmować uczucie mrowienia w nogach i ramionach. Objawy te występują z powodu ataku autoimmunologicznego na mielinę, w wyniku czego dochodzi do demielinizacji. Diagnozę stawia się na podstawie badania elektrofizjologicznego i obrazu klinicznego. GBS leczy się dożylną immunoglobuliną (IVIG) lub wymianą osocza (PE). Specyficzny mechanizm nie jest w pełni poznany, ale uważa się, że przeciwciała wytwarzane przeciwko mielinie są eliminowane, aby uniknąć dalszego uszkodzenia nerwów obwodowych. IVIG jest nieco bezpieczniejszy i łatwiejszy do podania niż PE. Jednak oba zabiegi są równie skuteczne. Oba muszą być podane w ciągu pierwszych kilku tygodni objawów.

Większość pacjentów całkowicie wraca do zdrowia, podczas gdy inni muszą złagodzić objawy i skrócić czas trwania choroby o kilka zabiegów. Ponadto po początkowej fazie GBS następuje długi okres rekonwalescencji, w którym ważna jest intensywna neurorehabilitacja. Niektóre osoby nie wyzdrowieją całkowicie z GBS i doświadczają długotrwałych komplikacji, takich jak niezdolność do samodzielnego chodzenia, utrata czucia powodująca brak koordynacji i równowagi. Szacuje się, że około 20% osób z GBS nadal odczuwa osłabienie mięśni po trzech latach. Niektórzy mogą również odczuwać trwałe zmęczenie. W rzadkich przypadkach powikłania mogą zagrażać życiu, szczególnie w ostrej fazie.

GBS należy do neurologicznych stanów nagłych, w których pacjenci wymagają dokładnego zbadania w początkowej ostrej fazie choroby. Przeprowadzono wiele badań w celu wyjaśnienia mechanizmu neuropatii w zespole Guillain-Barré, ale leczenie pozostaje rozczarowujące. Stwierdzono występowanie autoprzeciwciał przeciwko gangliozydom, białkom mieliny, takim jak glikoproteina PO, podstawowe białko P2 i PMP22 oraz białkom węzłowym i okołowęzłowym, takim jak NF155 i NF186.

Klaster różnicowania 163 (CD-163) - nowy sposób pomiaru GBS CD-163 jest receptorem zmiatającym (rozpoznaje i wychwytuje makrocząsteczki), który wyznacza aktywację monocytów-makrofagów. CD163 działa na makrofagi jako receptor dla kompleksów hemoglobina-haptoglobina. Rozpuszczalna forma receptora nazywa się sCD163 i znajduje się w osoczu, gdzie jest regulowana w górę w szerokim zakresie chorób zapalnych.

Wartości, które są silnie podwyższone (<20mg/l) obserwuje się w chorobach takich jak zespół aktywacji makrofagów, zespół hemofagocytarny i ostra niewydolność wątroby. Ponadto poziom sCD163 odzwierciedla aktywność choroby. Stwierdzono, że pacjenci z rosnącymi i wysokimi wartościami mają niekorzystne rokowanie. Podwyższone wartości (5-20 mg/l) obserwuje się w chorobach wątroby, posocznicy i chorobie Gauchera. Pacjenci z sepsą z wartościami powyżej 10 mg/l mają 10-krotnie większe ryzyko zgonu. Nieznacznie podwyższone wartości (3-5 mg/l) często obserwuje się w stanach zapalnych, infekcyjnych i nowotworowych.

Cel i hipoteza Cel Określenie stężenia sCD163 w płynie mózgowo-rdzeniowym i surowicy u pacjentów z GBS w porównaniu z grupą kontrolną.

Hipoteza projektu Nasza hipoteza jest taka, że ​​biomarker stanu zapalnego sCD163 jest wyższy w płynie mózgowo-rdzeniowym i krwi pacjentów z GBS w porównaniu z grupą kontrolną. Perspektywy Ze względu na różne warianty kliniczne polineuropatii zapalnych oraz brak biomarkerów rozpoznanie GBS pozostaje trudne. Bardzo ważne jest znalezienie nowych metod diagnostyki i monitorowania pacjentów z GBS. Może to również umożliwić lepsze przewidywanie rokowania i poziomu potrzebnego leczenia.

Patologia GBS jest nadal nieznana, ale wiadomo, że ma ona podłoże immunologiczne. W kilku badaniach wykazano, że sCD163 jest regulowany w większym zakresie chorób zapalnych, co sugeruje, że sCD163 jest odpowiednim biomarkerem GBS.

Badana populacja

Badana populacja będzie się składać z dwóch podgrup:

1. Pacjenci z rozpoznaniem GBS Pacjenci zostaną poddani nakłuciu lędźwiowemu w ramach procedury diagnostycznej, gdy tylko zostanie u nich potwierdzone klinicznie podejrzenie GBS w badaniu krwi. Zabieg i badanie krwi zostaną powtórzone po 6 miesiącach.
2. Kontrole objawowe Kontrole obejmują pacjentów z nieokreślonymi objawami lub chorobami neurologicznymi, którzy zostaną poddani nakłuciu lędźwiowemu na Oddziale Neurologii Szpitala Uniwersyteckiego w Aarhus w ramach prac diagnostycznych, niezależnie od tego badania. Badacze spodziewają się objąć 40 objawowych kontroli.

W związku z przyjęciem na Oddział Neurologii Szpitala Uniwersyteckiego w Aarhus z podejrzeniem GBS wszyscy kwalifikujący się uczestnicy otrzymają informację o projekcie i zostaną poproszeni o wyrażenie zgody na udział.

Jak wspomniano, kontrolami są zrekrutowani pacjenci, którzy mimo to zostaną poddani nakłuciu lędźwiowemu z innego powodu do Oddziału Neurologii, zostaną poinformowani o projekcie i zostaną poproszeni o udział. Pacjenci z grupy kontrolnej będą uczestniczyć tylko raz.

Badacze przewidują włączenie 20 pacjentów z GBS i 40 osób z objawami kontrolnymi.

Uczestnicy otrzymają pisemną i ustną informację o badaniu. Informacje ustne odbędą się na Oddziale Neurologii Szpitala Uniwersyteckiego w Aarhus. Ponadto rozdawana będzie broszura „Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg” (o udziale w badaniu klinicznym).

Informacji udzieli konsultant Henning Andersen, MD Lars Markvardsen lub stadnina. med. Malalai Musleh. Istnieje możliwość przyprowadzenia osoby towarzyszącej i proponuje się około godziny na rozważenie udziału, ponieważ zabieg nakłucia lędźwiowego odbędzie się tego samego dnia. Jeśli pacjent musi rozważyć udział w badaniu z osobą towarzyszącą i nie ma możliwości przyprowadzenia osoby towarzyszącej w ciągu godziny, wówczas nie zostanie włączony do badania.

Uczestnicy zostaną poinformowani o tym, że informacje z dokumentacji medycznej zostaną przekazane oraz uwzględnione i wykorzystane w tym projekcie, w tym historia choroby, faktyczne stosowanie leków, wyniki analiz biochemicznych i obrazowania mózgu, nieprawidłowości w badaniach klinicznych oraz wnioski z diagnostyka lekarzy.

Jeśli pojawi się nowa wiedza o wadach udziału w badaniu, uczestnicy zostaną o tym niezwłocznie poinformowani.

Ponadto uczestnik zostanie poinformowany, jeśli oceny w trakcie badania przyniosą wiedzę na temat ogólnego stanu zdrowia pacjenta, chyba że został on wyraźnie odrzucony przez pacjenta.

Pod koniec badania istnieje możliwość kontaktu z koordynatorem badania w celu uzyskania informacji o wynikach badania.

Metoda Wszystkie dane źródłowe z badania będą przechowywane zgodnie z duńskim ustawodawstwem, a badanie zostanie zatwierdzone przez Duńską Agencję Ochrony Danych.

Nakłucie lędźwiowe i surowica Udział obejmuje pobranie 2-3 ml płynu mózgowo-rdzeniowego oraz około 10 ml krwi, która zostanie wykorzystana do analizy sCD163. Próbki płynu rdzeniowego i krwi zostaną pobrane w tej samej procedurze, co próbki diagnostyczne. U pacjentów z GBS powtórne badanie krwi zostanie wykonane po 2-4 tygodniach i ponownie po 6 miesiącach. Ekstrakcja próbki krwi będzie wynosić około 10 ml przy każdym powtórzonym teście. Ponowne nakłucie lędźwiowe również zostanie wykonane po 6 miesiącach, z którego również zostanie pobrane około 2-3ml płynu rdzeniowego. Pacjenci mają pełne prawo odmówić powtórzenia zabiegu. Kontrole z objawami będą miały tylko raz pobrane próbki płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi.

Inne badania

Pacjenci z GBS zostaną poddani badaniu klinicznemu z następującymi wynikami neuropatii:

Uczestnicy zostaną poddani ocenie klinicznej za pomocą: Punktacji upośledzenia neuropatii (NIS):

NIS to złożony system punktacji klinicznej, który jest szeroko stosowany do obiektywnej oceny ciężkości neuropatii obwodowej. NIS określa ilościowo wyniki badania neurologicznego, przypisując wynik (w zakresie od 0 [normalny] do 88 [całkowite upośledzenie]) nieprawidłowościom klinicznym odnotowanym w fizycznej ocenie czucia, siły mięśniowej i odruchów ścięgnistych.

Ogólny wynik sumy niepełnosprawności (ODSS):

Skala ODSS wydaje się być trafną i sensowną miarą oceny dysfunkcji i niesprawności u pacjentów z neuropatiami ruchowymi. Ten wynik składa się ze skali niepełnosprawności rąk i nóg z całkowitym wynikiem w zakresie od 0 (brak oznak niepełnosprawności) do 12 (najcięższy wynik niepełnosprawności). Pacjent i obserwator ocenią każdą czynność pod kątem: brak wpływu, wpływ i brak zapobiegania lub zapobieganie.

Analizy Płyn rdzeniowy i surowica będą analizowane w Medycznym Laboratorium Badawczym. Próbki płynu rdzeniowego i krwi zostaną zdeponowane w biobanku badawczym Szpitala Uniwersyteckiego w Aarhus. Planuje się przeprowadzenie wszystkich analiz biochemicznych w tym samym czasie, gdy zostaną pobrane wszystkie próbki. Nadmiar materiału biologicznego zostanie przekazany do biobanku do przyszłych badań.

Surowica i płyn mózgowo-rdzeniowy zostaną przeanalizowane pod kątem sCD163 i innych markerów stanu zapalnego za pomocą już ustalonych technik na Wydziale Medycyny Klinicznej Szpitala Uniwersyteckiego w Aarhus, a płyn rdzeniowy zostanie zbadany za pomocą spektrometrii.

Statystyka GBS jest chorobą rzadką i ze względu na małą liczbę pacjentów trudno jest przeprowadzić obliczenia mocy w badaniach pacjentów z GBS. Badacze przewidują jednak, że wystarczy 20 pacjentów i 40 osób z grupy kontrolnej.

Do analiz statystycznych wykorzystany zostanie program STATA. W zależności od rozkładu normalnego danych zostaną użyte testy parametryczne lub nieparametryczne. We wszystkich analizach statystycznych zastosowany zostanie 5% poziom istotności.

Względy etyczne Lokalna Komisja Etyki Regionu Centralnego Danii zatwierdzi badanie.

Badania wykonywane na pacjentach biorących udział w tym projekcie badawczym to nakłucie lędźwiowe, pobieranie krwi i badanie kliniczne.

Nakłucie lędźwiowe to procedura stosowana do pobrania płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) do analizy. Płyn mózgowo-rdzeniowy jest obiecującym źródłem biomarkerów w GBS, ponieważ proksymalne korzenie nerwowe, które są dotknięte wczesnym stadium choroby, mają ścisły kontakt anatomiczny z przestrzenią płynu mózgowo-rdzeniowego.

Podczas zabiegu za pomocą wydrążonej igły wprowadza się kanał kręgowy na poziomie trzeciego do czwartego lub czwartego do piątego kręgu lędźwiowego w odcinku lędźwiowym kręgosłupa. CSF następnie kapie przez igłę i jest zbierany. Wiąże się z pewnym ryzykiem wykonanie nakłucia lędźwiowego, do którego zalicza się bóle głowy po nakłuciu lędźwiowym z częstością 12%, najczęściej u młodszych pacjentów. Najczęściej ból głowy trwa krótko i można go wyleczyć za pomocą plastra z krwią. Ponadto nakłucie lędźwiowe może powodować przejściowy ból lędźwiowy i nagromadzenie krwi pod skórą. Istnieje bardzo małe ryzyko krwawienia w przestrzeni zewnątrzoponowej przy ucisku nerwów rdzeniowych i jeszcze mniejsze ryzyko infekcji (zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych lub zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych).

Należy jednak podkreślić, że nakłucie lędźwiowe będzie wykonywane jako rutynowa diagnostyka u pacjentów z GBS; w związku z tym nie będzie sprawiać uczestnikom dalszych problemów.

Badacze uważają ten projekt za etycznie akceptowalny, biorąc pod uwagę niskie ryzyko związane z tym projektem, powagę i koszty choroby oraz możliwość zidentyfikowania odpowiedniego biomarkera w GBS.

Przez cały czas pracy diagnostycznej, a co za tym idzie w projekcie badawczym, badacze będą to robić z poszanowaniem stanu psychicznego i fizycznego pacjentów. Projekt badawczy zostanie przeprowadzony zgodnie z ustawą o przetwarzaniu danych osobowych, a ponadto zostanie zgłoszony do wspólnego regionalnego systemu informacyjnego dla Regionu Midtjylland Publikacje Pozytywne, negatywne lub niejednoznaczne wyniki zostaną opublikowane w międzynarodowym czasopiśmie z Malalai Musleh jako pierwszy autor, profesor Henning Andersen jako starszy autor i Lars Markvardsen będą współautorami.