Wpływ ograniczonego w czasie jedzenia na wyniki związane z zespołem policystycznych jajników

Do badania zostaną zrekrutowane pięćdziesiąt dwie kobiety w wieku 18-40 lat. Obliczyliśmy wielkość próby za pomocą oprogramowania G*Power (RRID:SCR_013726); wielkość próby uczestników została również ustalona zgodnie z Li i in. 2021. Wielkość efektu obliczono na 1,04 na podstawie różnic w masie tkanki tłuszczowej pomiędzy wartościami wyjściowymi a wartościami po 6 tygodniach stosowania przez kobiety z PCOS diety ograniczonej w czasie. Przy wartości alfa wynoszącej 0,05, wielkość próby wynosząca osiem myszy na grupę dałaby moc 0,95.

Kobiety zarekrutowane do badania otrzymają szczegółowe informacje dotyczące: celu badania, protokołu badania, wykonanych pomiarów oraz czasu trwania badania. Rekrutacja będzie odbywać się poprzez portale społecznościowe tj. Facebook, na którym będą znajdować się grupy docelowe skupiające kobiety z PCOS oraz zamieszczane będą posty z ogłoszeniem i formularzem kontaktowym. Po uzyskaniu zgody na udział w badaniu grupa zakwalifikowanych kobiet zostanie poddana wywiadowi ogólnemu lekarskiemu prowadzonemu przez dr Jakuba Noskiewicza, który będzie obejmował wywiad osobisty, obejmujący aktualnie przyjmowane leki i suplementy, wywiad lekarski oraz podstawowe badanie fizykalne - badanie, perkusja. Jeżeli w wywiadzie ujawniona zostanie istniejąca infekcja, choroba przewlekła w ostrej fazie, podejrzenie m.in. niedokrwistość, zakaźne choroby skóry, niedożywienie lub przyjmowanie leków stanowiących kryterium wykluczenia, pacjent nie zostanie zakwalifikowany do badania. Podczas tej rozmowy uczestnicy zostaną poproszeni o przedstawienie dokumentacji medycznej potwierdzającej, że cierpią na PCOS.

Uczestnicy zostaną losowo przydzieleni (za pomocą specjalistycznego programu) do dwóch grup – kontrolnej i interwencyjnej. Uczestnicy badania przydzieleni do grupy kontrolnej otrzymają zalecenia dietetyczne zgodne z zasadą zdrowego odżywiania. Dodatkowo zalecana dzienna podaż energii będzie ustalana indywidualnie dla każdego pacjenta. Uczestnicy przydzieleni do grupy TRF zostaną poinstruowani, aby w trakcie trwania eksperymentu (bez żadnych ograniczeń jakościowych i ilościowych) kontynuować dotychczasową dietę (bez ograniczeń jakościowych i ilościowych), ale w określonych ramach czasowych – od 9:00 do 17:00, a następnie pościć aż do następnego dnia (protokół 8/16). Czas trwania badania wyniesie 3 miesiące (12 tygodni).

Przeprowadzona zostanie ocena żywieniowa diety (kwestionariusz KomPAN). Ocena żywieniowa zostanie dodatkowo uzupełniona wywiadem z ostatnich 24 godzin. Następnie zrekrutowane kobiety zostaną losowo przydzielone do grupy interwencyjnej, stosującej żywienie ograniczone w czasie, lub do grupy kontrolnej, stosującej zasady zdrowego odżywiania. Czas trwania eksperymentu wyniesie 12 tygodni, a wizyty kontrolne będą zaplanowane w odstępach 4-tygodniowych. Na początku eksperymentu oraz podczas wizyt kontrolnych kobietom zostanie pobrana krew (18 ml) w celu oceny parametrów biochemicznych. Każdorazowo zostanie pobrana także próbka kału w celu oceny składu mikroflory jelitowej i krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych, a także przeprowadzona zostanie analiza składu ciała, gęstości kości i parametrów antropometrycznych. Podczas ostatniej wizyty w 12. tygodniu kobiety zostaną poproszone o ponowne wypełnienie ankiety KomPAN, która zostanie uzupełniona wywiadem z ostatnich 24 godzin. Każdorazowo przeprowadzony zostanie wywiad dotyczący dobrostanu kobiety i stosowania się do przekazanych zaleceń. Stopień przestrzegania okna żywieniowego będzie weryfikowany za pomocą dzienniczka, w którym kobiety będą zapisywać każdy dzień, kiedy spożyły pierwszy i ostatni posiłek.

Zaplanowano następujące analizy szczegółowe:

• Ocena parametrów antropometrycznych (masa ciała, wzrost, obwód talii, obwód bioder) oraz składu ciała i gęstości kości.
• Ocena parametrów metabolizmu węglowodanów (stężenie glukozy, insuliny, obliczenie HOMA-IR, HOMA-β, QUICKI), metabolizmu lipidów (stężenie cholesterolu całkowitego (T-C), cholesterolu LDL (LDL-C), cholesterolu HDL (HDL-C ), cholesterol nie-HDL (nie-HDL-C) i trójglicerydy)
• Ocena parametrów hormonalnych (FSH, LH, testosteron, SHBG) i lipopolisacharydów we krwi.
• Ocena parametrów neurohormonalnych (kisspeptyna, kwas gamma-aminomasłowy) we krwi.
• Ocena składu mikroflory jelitowej i krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych w kale kobiet.

Normalność otrzymanego rozkładu danych zostanie sprawdzona za pomocą testu Shapiro-Wilka. W przypadku danych o rozkładzie normalnym zastosowany zostanie test Kruskala-Wallisa, a dla danych o rozkładzie normalnym zastosowany zostanie test Tukeya HSD. Statystycznie przyjęto wartość p mniejszą niż 0,05. Skład mikroflory zostanie przeanalizowany przy użyciu RStudio (wersja R 4.0.3.0). (2020-10-10)) z pakietami obejmującymi phyloseq, mikrobiom i wegańskie. Taksony zostaną przefiltrowane poprzez usunięcie wszystkich taksonów, które nie są przypisane do żadnego typu. W zbiorze danych pozostaną jedynie taksony, których liczebność przekracza 0,25% w co najmniej jednej próbce. Wszystkie analizy składu mikroflory jelitowej zostaną przeprowadzone na podstawie względnej liczebności (RA) OTU.

Dane zbierane w planowanych badaniach obejmować będą wyniki pomiarów i ich analizy statystyczne. Wszystkie dane zostaną zebrane bezpośrednio przez członków zespołu i zakodowane. Szczegółowe instrukcje dotyczące gromadzenia danych zostaną przygotowane przez lidera zespołu, a każdy członek będzie musiał się z nimi zapoznać i przejść odpowiednie szkolenie. Wszystkie pomiary biochemiczne i antropometryczne zostaną wykonane w co najmniej dwóch powtórzeniach i zostaną sprawdzone przez innego członka zespołu. Cały używany sprzęt specjalistyczny będzie przed każdym użyciem odpowiednio skalibrowany (waga, analizator składu ciała, spektrofotometr Nanodrop).