Ocena długoterminowej odporności po szczepieniu HPV

W latach 2008/9 Ministerstwo Zdrowia (Ministerstwo Zdrowia) Fidżi przyjęło darowiznę w postaci 110 000 dawek czterowalentnej szczepionki przeciw HPV Gardasil® w związku z dużym obciążeniem rakiem szyjki macicy. Szczepionki było wystarczająco dużo, aby zaszczepić wszystkie dziewczynki w wieku 9-12 lat (30 338 dziewcząt) według schematu trzech dawek, ale nie wszystkie dziewczynki otrzymały trzy dawki szczepionki. Oznacza to, że dziewczęta, które otrzymały zmniejszone dawki, mogą nie być w pełni chronione przed genotypami HPV obecnymi w szczepionce Gardasil®. W 2013 roku Ministerstwo Zdrowia Fidżi przy wsparciu australijskiej pomocy wprowadziło szczepionkę Cervarix ® w schemacie trzech dawek (0, 1 i 6 miesięcy), którą należy podawać wszystkim dziewczynkom w ostatniej klasie szkoły podstawowej w ramach krajowego programu szczepień. Jest to wyjątkowa okazja do ustalenia, czy mniej niż trzy dawki szczepionki Gardasil® są immunologicznie podobne do standardowego schematu trzech dawek 6 lat po otrzymaniu szczepionki (tj. co wskazuje na długotrwałą ochronę).

Jest to otwarte badanie kliniczne fazy II/III z udziałem dziewcząt (obecnie w wieku 14-17 lat), które wcześniej otrzymały zero, jedną, dwie lub trzy dawki szczepionki Gardasil® w sezonie 2008/9. Dawka szczepionki Cervarix ® zostanie podana wszystkim dziewczętom biorącym udział w tym badaniu, tak aby dowody immunologiczne świadczące o długoterminowej ochronie pod względem poziomów przeciwciał (w tym miana neutralizacji), liczby limfocytów B i T pamięci (w tym odpowiedzi na cytokiny) i ekspresji genów można zmierzyć profile.

Zrekrutowana zostanie nielosowa próba 200 dziewcząt; dziewczęta, które otrzymały wcześniej jedną, dwie lub trzy dawki szczepionki Gardasil®, zostaną zidentyfikowane na podstawie szkolnych list szczepień otrzymanych od Ministerstwa Zdrowia i Ministerstwa Edukacji; dziewczęta, które nie otrzymały wcześniej żadnych szczepionek, będą rekrutowane z rekomendacji przyjaciół dziewcząt i nieformalnych sieci. Badacze zamierzają objąć badaniem około 50% rdzennych mieszkańców Fidżi (i-Taukei)/innych oraz 50% mieszkańców Fidżi pochodzenia indyjskiego.

Świadoma zgoda zostanie uzyskana zarówno od rodzica/opiekuna uczestnika, jak i od uczestnika, jak również sprawdzenie uprawnień uczestnika przez pielęgniarki uczestniczące w badaniu. Od każdego uczestnika zostanie pobrane łącznie dwadzieścia pięć mililitrów (ml) krwi przed i 28 dni po dawce szczepionki Cervarix®. Aby upewnić się, że wszyscy uczestnicy otrzymają trzy dawki szczepionki przeciwko wirusowi HPV do końca badania, zostaną wyznaczone wizyty kontrolne dla uczestników badania w celu otrzymania szczepionki poza badaniem dla tych, którzy nie otrzymali wcześniej żadnej szczepionki przeciw HPV lub otrzymali tylko jedną dawkę szczepionki Gardasil® w kampania 2008/9; podczas wizyt kontrolnych nie będą pobierane żadne próbki.

Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) i osocze zostaną oddzielone od krwi i zamrożone odpowiednio w ciekłym azocie i zamrażarce -80 stopni do czasu analizy laboratoryjnej.

Wielkość próbki:

Głównym wynikiem jest porównanie średnich geometrycznych stężeń (GMC) odpowiedzi przeciwciał specyficznych dla HPV (w tym mian neutralizacji) przeciwko HPV 6, -11, -16 i -18, między grupami, które wcześniej otrzymały zero, jeden, dwa lub trzy dawki szczepionki Gardasil®. Na podstawie opublikowanych danych z 5-letniego badania kontrolnego (Olsson i wsp. 2007) odchylenia standardowe dla przeciwciał anty-HPV wynoszą 570 (HPV16) i 84 (HPV18). Wielkość próbki wymagana do zapewnienia 80% mocy do wykrycia 30% różnicy w przeciwciałach HPV mieści się w zakresie od 48/grupę (HPV16) do 49/grupę (HPV18). W tym badaniu zostanie wykorzystana próba o wielkości 50 osób na grupę.

Plan analizy statystycznej:

Porównanie GMC poziomów przeciwciał anty-HPV i poziomów przeciwciał neutralizujących zostanie porównane przy użyciu danych przekształconych logarytmicznie przy użyciu testu t-Studenta. Odsetek z seropozytywnością zostanie porównany przy użyciu dokładnego testu Fishera. Analizy te zostaną również wykorzystane do porównania poziomów przeciwciał anty-HPV i poziomów przeciwciał neutralizujących jeden miesiąc po Cervarix®. Porównanie częstotliwości limfocytów B i T zostanie przeprowadzone za pomocą testu U Manna-Whitneya. W przypadku wydzielania cytokin w supernatantach PBMC, porównanie GMC ± 95% przedziały ufności (CI) zostanie przeprowadzone na danych przekształconych logarytmicznie przy użyciu testu t-Studenta. Profile ekspresji genów (czynnik martwicy nowotworu-α, interleukina (IL)-6, IL-8, interferon-γ, IL-18 i IL-1β) w różnych grupach zostaną porównane za pomocą testu t Studenta dla par. Krotność wzrostu lub spadku ekspresji genów zostanie oceniona za pomocą testu znaków. Wartość p <0,05 będzie uważana za istotną statystycznie dla wszystkich analiz.

Gromadzenie danych:

Każde dziecko będzie miało unikalny numer badania i folder zawierający formularze opisów przypadków z badań terenowych (CRF). Całe przetwarzanie laboratoryjne zostanie przeprowadzone w sposób zaślepiony przy użyciu próbek pozbawionych elementów umożliwiających identyfikację. Dane terenowe i kliniczne zostaną wprowadzone w biurze badania przez przeszkolony personel badawczy za pomocą oprogramowania EpiData i przesłane do dr Russella i dr Licciardi w celu analizy. Projektowanie komputerowych baz danych i czyszczenie danych zostanie wykonane przez personel badawczy pod nadzorem głównych badaczy. Tylko wyznaczony personel badawczy i badacze związani z tym projektem będą mieli dostęp do tych danych. Dane zostaną przeanalizowane z pomocą personelu Oddziału Epidemiologii Klinicznej i Biostatystyki (CEBU), Murdoch Childrens Research Institute (MCRI).

Przechowywanie danych:

Wszystkie dane laboratoryjne zebrane w tym badaniu będą przechowywane w formie elektronicznej i papierowej oraz zabezpieczone w zamykanych szafkach na akta przez 15 lat po zakończeniu badania.

Przechowywanie dokumentacji badania:

Próbki biologiczne będą przechowywane w Laboratorium Immunologii MCRI przez 15 lat od zakończenia badania, zgodnie z wymogami etyki badania klinicznego. Próbki zostaną zniszczone, jeśli uczestnicy nie wyrażą zgody na wykorzystanie ich próbki krwi do dalszych badań związanych z HPV zatwierdzonych pod względem etycznym. Jeśli uczestnik wyrazi zgodę na wykorzystanie jego próbki krwi do przyszłych etycznie zatwierdzonych badań, związanych wyłącznie z tym badaniem, próbki będą przechowywane przez czas nieokreślony w MCRI, Melbourne, Australia. Wymagane jest dodatkowe zatwierdzenie etyczne, jeśli badacze chcą później wykorzystać te przyszłe próbki do badań związanych z HPV.

Wszystkie formularze zgody zostaną złożone w odpowiednich teczkach i zabezpieczone w zamykanych szafkach na dokumenty na miejscu na Fidżi przez 15 lat po zakończeniu badania. Formularze zgody zostaną zniszczone i wyrzucone do zamykanych pojemników bezpieczeństwa.

Wszyscy uczestniczący badacze i personel badawczy zachowają poufność tematu. Z wyjątkiem formularza zgody, uczestnicy będą identyfikowani wyłącznie na podstawie unikalnego numeru badania przez cały czas trwania badania. Obejmuje to informacje kliniczne, badanie próbek biologicznych, dokumentację i laboratoryjną bazę danych.

Rodzice/opiekunowie otrzymają zwrot kosztów czasu i podróży w celu pobrania próbki.

MCRI i Ministerstwo Fidżi podpisały protokół ustaleń (MoU). Ministerstwo Fidżi i MCRI opracowują szczegółową umowę badawczą, która będzie zawierała klauzule dotyczące własności intelektualnej i publikacji. Umowa, która ma zostać zawarta, nie opóźni w nieuzasadniony sposób publikacji wyników badania ani nie zaszkodzi wynikowi programu badawczego lub interesowi strony w zakresie własności intelektualnej opracowanej zgodnie z programem badawczym lub posiadanej przez stronę .