Valutazione dell'immunità a lungo termine dopo la vaccinazione contro l'HPV

Nel 2008/9, il Ministero della Salute (MoH) delle Fiji ha accettato una donazione di 110.000 dosi di vaccino quadrivalente contro l'HPV, Gardasil®, sulla base dell'elevato carico di malattia del cancro cervicale. C'era abbastanza vaccino per vaccinare tutte le ragazze di età compresa tra 9 e 12 anni (30.338 ragazze) con un programma a tre dosi, ma non tutte le ragazze hanno ricevuto tre dosi del vaccino. Ciò significa che le ragazze che hanno ricevuto dosi ridotte potrebbero non essere completamente protette contro i genotipi HPV presenti nel Gardasil®. Nel 2013, il Fiji MoH con il sostegno dell'Australian Aid ha introdotto il vaccino Cervarix ® come programma a tre dosi (0, 1 e 6 mesi) da somministrare a tutte le ragazze dell'ultimo anno della scuola primaria come parte del programma nazionale di immunizzazione. Questa è un'opportunità unica per determinare se meno di tre dosi di vaccino Gardasil® sono immunologicamente simili alla schedula standard di tre dosi 6 anni dopo aver ricevuto il vaccino (cioè indicando una protezione a lungo termine).

Si tratta di uno studio clinico di fase II/III in aperto su ragazze (ora di età compresa tra 14 e 17 anni) che in precedenza avevano ricevuto zero, una, due o tre dosi di Gardasil® nel 2008/9. Una dose di Cervarix ® sarà somministrata a tutte le ragazze in questo studio in modo che l'evidenza immunologica della protezione a lungo termine in termini di livelli di anticorpi (compresi i titoli di neutralizzazione), numero di cellule B e T di memoria (comprese le risposte alle citochine) ed espressione genica i profili possono essere misurati.

Verrà reclutato un campione non casuale di 200 ragazze; le ragazze che hanno ricevuto in precedenza una, due o tre dosi di Gardasil® saranno identificate attraverso gli elenchi delle vaccinazioni scolastiche ottenuti dal MoH e dal Ministero dell'Istruzione; le ragazze che non hanno ricevuto alcun vaccino in precedenza saranno reclutate tramite raccomandazioni di amici delle ragazze e da reti informali. I ricercatori mirano a includere nello studio circa il 50% di figiani indigeni (i-Taukei)/altri e il 50% di figiani di origine indiana.

I consensi informati saranno ottenuti sia dal genitore/tutore del partecipante che dal partecipante, oltre a verificare l'idoneità del partecipante da parte degli infermieri dello studio. Venticinque millilitri (ml) di sangue in totale verranno prelevati da ciascun partecipante prima e 28 giorni dopo una dose di vaccino Cervarix®. Per garantire che tutti i partecipanti ricevano tre dosi di vaccino HPV entro la fine dello studio, verranno fissati appuntamenti di follow-up per i partecipanti allo studio per ricevere il vaccino fuori dallo studio per coloro che non hanno ricevuto alcun vaccino HPV in precedenza o hanno ricevuto solo una dose di Gardasil® in campagna 2008/9; nessun campione verrà raccolto negli appuntamenti di follow-up.

Le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) e il plasma saranno separati dal sangue e congelati in azoto liquido e congelatore a -80 gradi fino all'analisi di laboratorio, rispettivamente.

Misura di prova:

L'esito primario è il confronto delle concentrazioni medie geometriche (GMC) delle risposte anticorpali specifiche per HPV (inclusi i titoli di neutralizzazione) contro HPV 6, -11, -16 e -18, tra i gruppi che hanno ricevuto in precedenza zero, uno, due o tre dosi di Gardasil®. Sulla base dei dati pubblicati da uno studio di follow-up di 5 anni (Olsson et al. 2007), le deviazioni standard per gli anticorpi anti-HPV sono 570 (HPV16) e 84 (HPV18). La dimensione del campione richiesta per fornire l'80% di potenza per rilevare una differenza del 30% negli anticorpi HPV varia da 48/gruppo (HPV16) a 49/gruppo (HPV18). In questo studio verrà utilizzata una dimensione del campione di 50 per gruppo.

Piano di analisi statistica:

Il confronto dei GMC dei livelli di anticorpi anti-HPV e dei livelli di anticorpi neutralizzanti verrà confrontato utilizzando dati trasformati in log utilizzando il test t di Student. La proporzione con la sieropositività verrà confrontata utilizzando il test esatto di Fisher. Queste analisi saranno utilizzate anche per confrontare i livelli di anticorpi anti-HPV ei livelli di anticorpi neutralizzanti un mese dopo Cervarix®. Il confronto delle frequenze delle cellule B e T sarà effettuato utilizzando il test U di Mann-Whitney. Per la secrezione di citochine nei surnatanti di PBMC, il confronto degli intervalli di confidenza (CI) ± 95% delle GMC sarà effettuato su dati log-trasformati utilizzando il test t di Student. I profili di espressione genica (fattore di necrosi tumorale-α, interleuchina (IL)-6, IL-8, interferone-γ, IL-18 e IL-1β) in diversi gruppi saranno confrontati utilizzando un test t di Student appaiato. L'aumento o la diminuzione dell'espressione genica verrà valutata utilizzando il test dei segni. Un p-value <0,05 sarà considerato statisticamente significativo per tutte le analisi.

Raccolta dati:

Ogni bambino avrà un numero di studio univoco e una cartella che colleziona i moduli per i casi di studio sul campo (CRF). Tutte le elaborazioni di laboratorio saranno effettuate in cieco utilizzando campioni non identificati. I dati sul campo e clinici verranno inseriti nell'ufficio dello studio da personale dello studio addestrato utilizzando il software EpiData e inviati ai dottori Russell e Licciardi per l'analisi. La progettazione dei database informatici e la pulizia dei dati saranno effettuate dal personale dello studio sotto la supervisione dei ricercatori principali. Solo il personale dello studio designato e i ricercatori associati a questo progetto avranno accesso a questi dati. I dati saranno analizzati con l'aiuto del personale dell'Unità di Epidemiologia Clinica e Biostatistica (CEBU), Murdoch Childrens Research Institute (MCRI).

Archivio dati:

Tutti i dati di laboratorio raccolti in questo studio saranno archiviati elettronicamente e in formato cartaceo e protetti in armadietti chiudibili a chiave per 15 anni dopo il completamento dello studio.

Conservazione dei record di studio:

I campioni biologici saranno conservati presso il Laboratorio di immunologia presso MCRI per 15 anni dopo il completamento dello studio, in conformità ai requisiti etici per una sperimentazione clinica. I campioni verranno distrutti se i partecipanti non acconsentono all'utilizzo del loro campione di sangue per ulteriori studi relativi all'HPV approvati dall'etica. Se il partecipante acconsente all'utilizzo del proprio campione di sangue per future ricerche approvate eticamente, relative solo a questo studio, i campioni verranno conservati a tempo indeterminato presso MCRI, Melbourne, Australia. È necessaria un'ulteriore approvazione etica se i ricercatori desiderano utilizzare questi campioni per uso futuro in seguito per studi correlati all'HPV.

Tutti i moduli di consenso saranno archiviati in apposite cartelle e protetti in armadietti chiudibili a chiave in loco alle Fiji per 15 anni dopo il completamento dello studio. I moduli di consenso verranno triturati e smaltiti in contenitori di sicurezza chiusi a chiave.

Tutti i ricercatori partecipanti e il personale di ricerca manterranno la riservatezza del soggetto. Ad eccezione del modulo di consenso, i partecipanti saranno identificati solo dal loro numero di studio univoco durante lo studio. Ciò si estende alle informazioni cliniche, al test dei campioni biologici, alla documentazione e al database di laboratorio.

I genitori/tutori saranno rimborsati per il loro tempo e il viaggio per la raccolta del campione.

MCRI e Fiji MoH hanno firmato un memorandum d'intesa (MoU). Un accordo specifico per la ricerca è in fase di sviluppo da parte del ministero della Sanità delle Fiji e del MCRI che includerà clausole sulla proprietà intellettuale e sulla pubblicazione. L'accordo da sviluppare non ritarderà irragionevolmente la pubblicazione dei risultati dello studio, né danneggerà o pregiudicherà un risultato del programma di ricerca o un interesse di una parte nella proprietà intellettuale, sviluppato ai sensi del programma di ricerca o di proprietà della parte .