Avaliação da imunidade a longo prazo após a vacinação contra o HPV

Em 2008/9, o Ministério da Saúde (MoH) em Fiji aceitou uma doação de 110.000 doses da vacina quadrivalente contra o HPV, Gardasil®, com base na alta incidência de câncer cervical. Havia vacina suficiente para vacinar todas as meninas de 9 a 12 anos (30.338 meninas) com um esquema de três doses, mas nem todas as meninas receberam três doses da vacina. Isso significa que as meninas que receberam doses reduzidas podem não estar totalmente protegidas contra os genótipos de HPV presentes no Gardasil®. Em 2013, o Ministério da Saúde de Fiji, com o apoio da Australian Aid, introduziu a vacina Cervarix ® como um esquema de três doses (0, 1 e 6 meses) a ser administrado a todas as meninas no último ano do ensino fundamental como parte do programa nacional de imunização. Esta é uma oportunidade única para determinar se menos de três doses da vacina Gardasil® são imunologicamente semelhantes ao esquema padrão de três doses 6 anos após receber a vacina (ou seja, indicando proteção a longo prazo).

Este é um ensaio clínico aberto de Fase II/III em meninas (agora com 14-17 anos de idade) que anteriormente receberam zero, uma, duas ou três doses de Gardasil® em 2008/9. Uma dose de Cervarix ® será administrada a todas as meninas neste estudo para que haja evidência imunológica de proteção a longo prazo em termos de níveis de anticorpos (incluindo títulos de neutralização), número de células B e T de memória (incluindo respostas de citocinas) e expressão gênica perfis podem ser medidos.

Será recrutada uma amostra não aleatória de 200 meninas; as meninas que receberam anteriormente uma, duas ou três doses de Gardasil® serão identificadas por meio de listas de vacinação escolar obtidas do MS e Ministério da Educação; as meninas que não receberam nenhuma vacina anteriormente serão recrutadas por indicação de amigas das meninas e por redes informais. Os investigadores pretendem ter aproximadamente 50% de Fijianos indígenas (i-Taukei)/outros e 50% de Fijianos descendentes de índios no estudo.

Os consentimentos informados serão obtidos dos pais/responsáveis ​​do participante e do participante, bem como a verificação da elegibilidade do participante pelas enfermeiras do estudo. Vinte e cinco mililitros (mL) de sangue no total serão coletados de cada participante antes e 28 dias após uma dose da vacina Cervarix®. Para garantir que todos os participantes recebam três doses da vacina contra o HPV até o final do estudo, serão marcadas consultas de acompanhamento para os participantes do estudo receberem a vacina fora do estudo para aqueles que não receberam nenhuma vacina contra o HPV anteriormente ou receberam apenas uma dose de Gardasil® em campanha 2008/9; nenhuma amostra será coletada nas consultas de acompanhamento.

Células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e plasma serão separados do sangue e congelados em nitrogênio líquido e freezer a -80 graus até análise laboratorial, respectivamente.

Tamanho da amostra:

O resultado primário é a comparação das concentrações médias geométricas (GMCs) de respostas de anticorpos específicos de HPV (incluindo títulos de neutralização) contra HPV 6, -11, -16 e -18, entre os grupos que receberam anteriormente zero, um, dois ou três doses de Gardasil®. Com base nos dados publicados de um estudo de acompanhamento de 5 anos (Olsson et al. 2007), os desvios padrão para anticorpos anti-HPV são 570 (HPV16) e 84 (HPV18). O tamanho da amostra necessário para fornecer 80% de poder para detectar uma diferença de 30% nos anticorpos do HPV varia de 48/grupo (HPV16) a 49/grupo (HPV18). Um tamanho de amostra de 50/grupo será usado neste estudo.

Plano de Análise Estatística:

A comparação de GMCs de níveis de anticorpos anti-HPV e níveis de anticorpos neutralizantes será feita usando dados transformados em log usando o teste t de Student. A proporção com soropositividade será comparada pelo teste exato de Fisher. Essas análises também serão usadas para comparar os níveis de anticorpos anti-HPV e os níveis de anticorpos neutralizantes um mês após Cervarix®. A comparação das frequências das células B e T será feita usando o teste Mann-Whitney U. Para secreção de citocinas em sobrenadantes de PBMC, a comparação de GMCs ± 95% de intervalo de confiança (CI) será feita em dados transformados em log usando o teste t de Student. Os perfis de expressão gênica (fator de necrose tumoral-α, interleucina (IL)-6, IL-8, interferon-γ, IL-18 e IL-1β) em diferentes grupos serão comparados por meio de um teste t de Student pareado. O aumento ou diminuição da expressão gênica será avaliado por meio do teste do sinal. Um valor de p < 0,05 será considerado estatisticamente significativo para todas as análises.

Coleção de dados:

Cada criança terá um número de estudo exclusivo e uma pasta com os formulários de relatório de caso (CRFs) de estudo do local de campo. Todo o processamento laboratorial será realizado de forma cega, usando amostras não identificadas. Os dados de campo e clínicos serão inseridos no escritório do estudo por uma equipe de estudo treinada usando o software EpiData e enviados aos Drs. Russell e Licciardi para análise. O design dos bancos de dados do computador e a limpeza dos dados serão feitos pela equipe do estudo sob a supervisão dos pesquisadores principais. Somente a equipe de estudo designada e os investigadores associados a este projeto terão acesso a esses dados. Os dados serão analisados ​​com a ajuda da equipe da Unidade de Epidemiologia Clínica e Bioestatística (CEBU), Murdoch Childrens Research Institute (MCRI).

Armazenamento de dados:

Todos os dados de laboratório coletados neste estudo serão armazenados eletronicamente e em formato de cópia impressa e protegidos em arquivos com chave por 15 anos após a conclusão do estudo.

Retenção de registro de estudo:

As amostras biológicas serão armazenadas no Laboratório de Imunologia do MCRI por 15 anos após a conclusão do estudo, de acordo com os requisitos éticos para um ensaio clínico. As amostras serão destruídas se os participantes não consentirem que sua amostra de sangue seja usada para outros estudos relacionados ao HPV aprovados pela ética. Se o participante consentir que sua amostra de sangue seja usada para futuras pesquisas aprovadas eticamente, relacionadas apenas a este estudo, as amostras serão mantidas indefinidamente no MCRI, Melbourne, Austrália. Aprovação ética adicional é necessária se os investigadores desejarem usar essas amostras de uso futuro posteriormente para estudos relacionados ao HPV.

Todos os formulários de consentimento serão arquivados em pastas apropriadas e protegidos em armários com chave no local em Fiji por 15 anos após a conclusão do estudo. Os formulários de consentimento serão triturados e descartados em caixas de segurança trancadas.

Todos os investigadores participantes e equipe de pesquisa manterão a confidencialidade do sujeito. Exceto pelo formulário de consentimento, os participantes serão identificados apenas por seu número de estudo único durante todo o estudo. Isso se estende às informações clínicas, testes de amostras biológicas, documentação e banco de dados de laboratório.

Os pais/responsáveis ​​serão reembolsados ​​pelo tempo e deslocamento para a coleta da amostra.

MCRI e Fiji MoH assinaram um Memorando de Entendimento (MoU). Um acordo específico de pesquisa está sendo desenvolvido pelo Ministério da Saúde de Fiji e pelo MCRI, que incluirá propriedade intelectual e cláusulas de publicação. O acordo a ser desenvolvido não atrasará injustificadamente a publicação dos resultados do estudo, nem prejudicará ou prejudicará um resultado do programa de pesquisa ou um interesse que uma parte tenha na propriedade intelectual, desenvolvida de acordo com o programa de pesquisa ou de propriedade da parte .