Evaluación de la inmunidad a largo plazo después de la vacunación contra el VPH

En 2008/9, el Ministerio de Salud (MoH) de Fiji aceptó una donación de 110 000 dosis de la vacuna tetravalente contra el VPH, Gardasil®, debido a la alta carga de morbilidad por cáncer de cuello uterino. Había suficiente vacuna para vacunar a todas las niñas de 9 a 12 años (30 338 niñas) con un esquema de tres dosis, pero no todas las niñas recibieron tres dosis de la vacuna. Esto significa que es posible que las niñas que recibieron dosis reducidas no estén totalmente protegidas contra los genotipos del VPH presentes en Gardasil®. En 2013, el Ministerio de Salud de Fiji con el apoyo de Australian Aid introdujo la vacuna Cervarix ® como un programa de tres dosis (meses 0, 1 y 6) para administrar a todas las niñas en el último año de la escuela primaria como parte del programa nacional de inmunización. Esta es una oportunidad única para determinar si menos de tres dosis de la vacuna Gardasil® son inmunológicamente similares al programa estándar de tres dosis 6 años después de recibir la vacuna (es decir, lo que indica protección a largo plazo).

Este es un ensayo clínico abierto de Fase II/III en niñas (ahora de 14 a 17 años de edad) que previamente recibieron cero, una, dos o tres dosis de Gardasil® en 2008/9. Se administrará una dosis de Cervarix ® a todas las niñas en este estudio para que exista evidencia inmunológica de protección a largo plazo en términos de niveles de anticuerpos (incluidos los títulos de neutralización), número de células B y T de memoria (incluidas las respuestas de citoquinas) y expresión génica. Los perfiles se pueden medir.

Se reclutará una muestra no aleatoria de 200 niñas; las niñas que recibieron previamente una, dos o tres dosis de Gardasil® serán identificadas a través de las listas de vacunación escolar obtenidas del Ministerio de Salud y el Ministerio de Educación; Las niñas que no recibieron ninguna vacuna anteriormente serán reclutadas a través de recomendaciones de amigos de las niñas y redes informales. Los investigadores pretenden tener aproximadamente un 50 % de indígenas fiyianos (i-Taukei)/otros y un 50 % de fiyianos de ascendencia india en el estudio.

Se obtendrán consentimientos informados tanto del padre/tutor del participante como del participante, así como la verificación de la elegibilidad del participante por parte de las enfermeras del estudio. Se extraerán veinticinco mililitros (mL) de sangre en total de cada participante antes y 28 días después de una dosis de la vacuna Cervarix®. Para garantizar que todos los participantes reciban tres dosis de la vacuna contra el VPH al final del estudio, se programarán citas de seguimiento para que los participantes del estudio reciban la vacuna fuera del estudio para aquellos que no recibieron ninguna vacuna contra el VPH anteriormente o recibieron solo una dosis de Gardasil® en campaña 2008/9; no se recogerán muestras en las citas de seguimiento.

Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) y el plasma se separarán de la sangre y se congelarán en nitrógeno líquido y en un congelador de -80 grados hasta el análisis de laboratorio, respectivamente.

Tamaño de la muestra:

El resultado primario es la comparación de las concentraciones medias geométricas (GMC) de las respuestas de anticuerpos específicos del VPH (incluidos los títulos de neutralización) contra el VPH 6, -11, -16 y -18, entre los grupos que recibieron previamente cero, uno, dos o tres dosis de Gardasil®. Según los datos publicados de un estudio de seguimiento de 5 años (Olsson et al. 2007), las desviaciones estándar de los anticuerpos contra el VPH son 570 (VPH16) y 84 (VPH18). El tamaño de la muestra necesario para proporcionar un poder del 80 % para detectar una diferencia del 30 % en los anticuerpos contra el VPH varía de 48/grupo (VPH16) a 49/grupo (VPH18). En este estudio se utilizará un tamaño de muestra de 50/grupo.

Plan de Análisis Estadístico:

La comparación de las GMC de los niveles de anticuerpos anti-VPH y los niveles de anticuerpos neutralizantes se comparará utilizando datos transformados logarítmicamente mediante la prueba t de Student. La proporción con seropositividad se comparará mediante la prueba exacta de Fisher. Estos análisis también se utilizarán para comparar los niveles de anticuerpos anti-VPH y los niveles de anticuerpos neutralizantes un mes después de Cervarix®. La comparación de las frecuencias de las células B y T se realizará mediante la prueba U de Mann-Whitney. Para la secreción de citoquinas en sobrenadantes de PBMC, la comparación de GMC ± 95 % de intervalos de confianza (IC) se realizará en datos transformados logarítmicamente utilizando la prueba t de Student. Los perfiles de expresión génica (factor de necrosis tumoral-α, interleucina (IL)-6, IL-8, interferón-γ, IL-18 e IL-1β) en diferentes grupos se compararán mediante una prueba t de Student pareada. El aumento o disminución en veces de la expresión génica se evaluará utilizando la prueba de signos. Un valor de p <0,05 se considerará estadísticamente significativo para todos los análisis.

Recopilación de datos:

Cada niño tendrá un número de estudio único y una carpeta que cotejará los formularios de informe de caso de estudio de sitio de campo (CRF). Todo el procesamiento de laboratorio se realizará de manera ciega utilizando muestras no identificadas. Los datos de campo y clínicos serán ingresados ​​en la oficina del estudio por personal capacitado del estudio utilizando el software EpiData y enviados a los Drs. Russell y Licciardi para su análisis. El diseño de las bases de datos informáticas y la limpieza de los datos estará a cargo del personal del estudio bajo la supervisión de los investigadores principales. Solo el personal designado del estudio y los investigadores asociados con este proyecto tendrán acceso a estos datos. Los datos se analizarán con la ayuda del personal de la Unidad de Bioestadística y Epidemiología Clínica (CEBU), Instituto de Investigación Infantil Murdoch (MCRI).

Almacenamiento de datos:

Todos los datos de laboratorio recopilados en este estudio se almacenarán electrónicamente y en formato impreso y se asegurarán en archivadores con cerradura durante 15 años después de la finalización del estudio.

Retención de registros de estudio:

Las muestras biológicas se almacenarán en el Laboratorio de Inmunología de MCRI durante 15 años después de la finalización del estudio, de acuerdo con los requisitos éticos para un ensayo clínico. Las muestras se destruirán si los participantes no dan su consentimiento para que su muestra de sangre se utilice para estudios adicionales relacionados con el VPH aprobados por ética. Si el participante da su consentimiento para que su muestra de sangre se utilice para futuras investigaciones éticamente aprobadas, relacionadas únicamente con este estudio, las muestras se conservarán indefinidamente en MCRI, Melbourne, Australia. Se requiere una aprobación ética adicional si los investigadores desean utilizar estas muestras de uso futuro más adelante para estudios relacionados con el VPH.

Todos los formularios de consentimiento se archivarán en carpetas adecuadas y se asegurarán en archivadores con cerradura en el sitio en Fiji durante 15 años después de la finalización del estudio. Los formularios de consentimiento serán triturados y desechados en contenedores de seguridad cerrados.

Todos los investigadores participantes y el personal de investigación mantendrán la confidencialidad del tema. A excepción del formulario de consentimiento, los participantes serán identificados solo por su número de estudio único durante todo el estudio. Esto se extiende a la información clínica, análisis de muestras biológicas, documentación y base de datos de laboratorio.

A los padres/tutores se les reembolsará el tiempo y el viaje para la recolección de muestras.

MCRI y Fiji MoH han firmado un Memorando de Entendimiento (MoU). El Ministerio de Salud de Fiji y el MCRI están desarrollando un Acuerdo Específico de Investigación que incluirá cláusulas de propiedad intelectual y publicación. El acuerdo que se desarrollará no retrasará injustificadamente la publicación de los resultados del estudio, ni dañará o perjudicará un resultado del programa de investigación o un interés que una parte tenga en la propiedad intelectual, ya sea desarrollado de conformidad con el programa de investigación o que sea propiedad de la parte. .