Ostre uszkodzenie nerek podczas treningu o wysokiej intensywności (HIFRT-KH)

Proponuje się, aby śledztwo HIT-KH trwało dwa lata kalendarzowe. W pierwszym roku współpraca z siłowniami specjalizującymi się w treningach o wysokiej intensywności i treningu funkcjonalnym (zwanych dalej miejscami zbierania danych satelitarnych), a także lokalnymi uczelniami lokalnymi i plemiennymi (zwanymi dalej instytucjami partnerskimi) obiekty zostaną wzmocnione. Ponadto latem w miejscu gromadzenia danych lokalnym na Uniwersytecie Wyoming odbędzie się jedno gromadzenie danych na niewielkim podzbiorze osób (~40) (Rysunek 1.). Naszym planem jest wykorzystanie tego pierwszego gromadzenia danych w Laramie, WY jako sesji szkoleniowej dla wszystkich studentów z instytucji partnerskich, tak aby uczniowie byli przygotowani, gdy gromadzenie danych zostanie rozszerzone na miejsca zbierania danych satelitarnych w roku 2.

Śledczy oszacowali, że aby właściwie zasilić to śledztwo, potrzebnych będzie około 100 uczestników. Biorąc pod uwagę, że badacze mogą spodziewać się około 40 uczestników z lokalnej sali do zbierania danych w Larmie (CrossFit® 7220), będzie to wymagać od badaczy nawiązania współpracy z innymi siłowniami do treningu oporowego i funkcjonalnego o wysokiej intensywności w całym stanie Wyoming w roku 2. Badacze wybrali skontaktować się z siłowniami CrossFit®, ponieważ powszechną praktyką większości siłowni CrossFit® jest programowanie treningu, który badacze są zainteresowani obserwowaniem (Murph), co najmniej raz w roku. Zbieranie danych o 60 dodatkowych uczestnikach będzie wymagało partnerstwa z 3 dodatkowymi siłowniami (tj. 20 uczestników/obiekt). W tym momencie śledczy skontaktowali się z 3 właścicielami siłowni, z których wszyscy zaoferowali ustną zgodę na pomoc w zbieraniu danych. Wśród tych siłowni jest CrossFit® Leveler, zlokalizowany w rezerwacie Wind River w Fort Washikie w stanie Wyoming. Obiekt ten jest własnością rdzennych Amerykanów i jest przeznaczony przede wszystkim dla rdzennych Amerykanów mieszkających w rezerwacie. Ponieważ stan Wyoming zamieszkuje około 2% rdzennych Amerykanów, włączenie tego obiektu do naszego dochodzenia jest bardzo ważne dla prawidłowego pobierania próbek (patrz załączony list poparcia od właściciela Mike'a Ute). Dodatkowe siłownie, z którymi się skontaktowano i które są w trakcie udzielania pisemnej zgody, to CrossFit® Frontier (Cheyenne) i Cloud Peak CrossFit® (Sheridan).

Ponieważ nasze gromadzenie danych będzie miało miejsce w całym stanie, śledczy planują również współpracować z lokalną społecznością i kolegiami plemiennymi lokalnymi w wielu z powyższych miejsc gromadzenia danych satelitarnych. W skrócie, badacze planują włączyć do trzech studentów i jednego mentora wydziału z każdej z następujących instytucji edukacyjnych; Laramie County Community College, Wind River Tribal College i Sheridan Community College. Jeśli chodzi o włączenie Wind River Tribal College i Wind River Indian Reservation, śledczy Johnson jest pod kierunkiem dr Christine Porter, która również pracuje na Wydziale Kinezjologii i Zdrowia Uniwersytetu Wyoming. Dr Porter z powodzeniem wdrożył kilka badań naukowych w rezerwacie Wind River i jest dobrze zorientowany w zawiłościach i wymaganiach niezbędnych do zakończenia gromadzenia danych w ramach tego partnerstwa. Wreszcie, instytucje partnerskie są korzystne dla projektu, ponieważ gromadzenie danych odbywa się w ciągu 5 kolejnych dni, szkolenie i praca z lokalnymi naukowcami umożliwią projektowi obniżenie kosztów, ponieważ duży zespół badawczy z Laramie w stanie Wyoming nie będzie wymagane dla każdego zbierania danych.

Jak wspomniano powyżej, 1-3 studentów z każdej z powyższych instytucji zostanie poproszonych o pomoc w zbieraniu danych dla HIT-KH. Część naszych dotacji przeznaczona jest na opłacenie opłat za kształcenie tych studentów. Obejmuje to opłaty za podróż i pobyt w Laramie w stanie Wyoming w ciągu roku 1 na obserwację i pomoc na poziomie podstawowym przy początkowym gromadzeniu danych. Na koniec roku 1 i/lub na początku roku 2 przeznaczono dodatkowe fundusze na szkolenie flebotomii dla zainteresowanych studentów. Uczniowie ci zostaną następnie wykorzystani podczas drugiego roku gromadzenia danych do pomocy przy pobieraniu krwi. Wreszcie, środki zostały przeznaczone na podróż i udział w konferencji Rocky Mountain Regional American College of Sports Medicine. Naszym celem jest, aby przynajmniej jeden student mógł wykorzystać wstępne dane z pierwszego roku zbierania danych do opracowania streszczenia badań, które zostanie przedłożone do prezentacji. Wszyscy pozostali studenci będą mogli uczestniczyć w konferencji wiosną 2019 roku.

Krew zostanie pobrana dzień przed przystąpieniem do treningu oraz 24 i 48 godzin po jego zakończeniu. Pobieranie próbek będzie odbywać się przez pojedyncze nakłucie żyły do ​​żyły łokciowej przez wyszkolonego badacza przy użyciu sterylnych technik i uniwersalnych środków ostrożności. Po wyjęciu igły należy mocno uciskać miejsce pobrania krwi za pomocą gazy, aby zminimalizować możliwość wystąpienia krwiaka. Krew zostanie pobrana do próżniaków specyficznych dla każdego z analitów do późniejszej analizy. Probówki zostaną jak najszybciej odwirowane, następnie osocze krwi, surowica lub krwinki białe zostaną usunięte i podzielone na porcje do osobnych kriofiolek. Te kriofiolki zostaną jak najszybciej zamrożone w zamrażarce -80C. W przypadku gromadzenia danych satelitarnych, jeśli w lokalnej instytucji partnerskiej nie są dostępne zamrażarki do temperatury -80C, do zamrażania i przechowywania próbek zostanie użyty ciekły azot, dopóki próbki nie będą mogły zostać przetransportowane z powrotem na Uniwersytet Wyoming w celu bardziej trwałego przechowywania.

Próbki moczu będą pobierane do 24-godzinnych pojemników do pobierania w okresie bezpośrednio przed treningiem i przez dwa kolejne 24-godzinne okresy. Każda próbka zostanie zważona w celu zmierzenia całkowitej objętości, oceny koloru moczu i ciężaru właściwego moczu. Paseczki będą używane do świeżych próbek, podczas gdy trzy porcje po 2 ml z każdej 24-godzinnej próbki zostaną oddzielone i przechowywane w temperaturze pokojowej, aż próbki zostaną zwrócone na University of Wyoming, gdzie próbki zostaną zamrożone w temperaturze -80°C do przyszłej analizy.

Świeże 24-godzinne próbki moczu będą analizowane przy użyciu tradycyjnych pasków testowych pod kątem następujących zmiennych: leukocytów, azotynów, urobilinogenu, białka, pH, hemoglobiny, ciał ketonowych, bilirubiny i glukozy. Dodatkowo świeże próbki zostaną ocenione pod kątem koloru moczu i ciężaru właściwego za pomocą ręcznego refraktometru w celu ustalenia stanu nawodnienia. Dalsza analiza biochemiczna moczu została omówiona poniżej.

Proenkefalina-A będzie analizowana w Centrum Badań Klinicznych przy użyciu chemiluminometrycznego testu immunologicznego kanapkowego. Grupa laboratoryjna w Malmo wcześniej z powodzeniem mierzyła ten hormon (Schulz i in., 2017). Wszystkie pozostałe próbki krwi i moczu zostaną przeanalizowane w laboratorium Human Integrated Physiology znajdującym się na Uniwersytecie Wyoming przy użyciu kolorymetrycznych testów immunoenzymatycznych (ELISA). Próbki te zostaną przeanalizowane pod kątem następujących zmiennych; kreatynina w surowicy, azot mocznikowy we krwi, kreatynina w moczu, lipokalina związana z żelatynazą neutrofili [NGAL] i cząsteczka uszkodzenia nerek 1 [KIM-1]). Wszystkie przeciwciała ELISA zostaną dostarczone przez firmę „Abcam” (Cambridge, Massachusetts, USA), a mikropłytki zostaną odczytane zgodnie z instrukcjami producenta na spektrofotometrze (Epoch 2, Biotek, Winooski, Vermont, USA).