Pobieranie próbek odporności skóry obejmujące pęcherze i biopsje

Częstość występowania pozaszpitalnych (CA) zakażeń gronkowcowych, zwłaszcza wywołanych przez metycylinooporny Staphylococcus aureus (MRSA), wzrosła w ostatnich latach. Skóra i tkanki miękkie są głównymi miejscami tych infekcji. Chociaż wielu pacjentów bez widocznej podstawowej dysfunkcji immunologicznej cierpi na nawracające i uporczywe infekcje skóry wywołane przez S. aureus, pacjenci z takimi schorzeniami jak zespół hiperimmunoglobuliny E (HIES lub zespół Joba) i przewlekła choroba ziarniniakowa (CGD) są nieproporcjonalnie dotknięci. Chociaż w ostatnich latach odkryto leżące u podstaw defekty molekularne gospodarza odpowiedzialne za niektóre z tych stanów predysponujących, odpowiedź immunologiczna skóry na infekcje S. aureus nie została wyjaśniona ani u zdrowych ochotników, ani w podatnych populacjach. Stawiamy hipotezę, że miejscowa reakcja skórna determinuje podatność na zakażenie skóry S. aureus.

W tym protokole pobierania próbek przeprowadzimy eksploracyjne oceny odpowiedzi immunologicznych przeciwko gronkowcom u zdrowych ochotników, osób z HIES i osób z CGD. Po badaniach przesiewowych i procedurach podstawowych, w tym pobraniu krwi i wymazu ze skóry, badani będą mieli możliwość poddania się indukcji pęcherzy, podczas której zostanie użyte urządzenie ssące do wywołania pęcherzy na skórze na przedramieniu. Wierzchołki blistrów i płyn z pęcherzy zostaną zebrane do testów badawczych i przechowywania do przyszłych badań. Opcjonalnie można przeprowadzić nocny pobyt pacjenta w szpitalu w celu zebrania dodatkowych nacieków komórkowych w odpowiedzi na autologiczną surowicę i/lub sterylną sól fizjologiczną. Pacjenci mogą również mieć do 4 biopsji skóry z przedramienia w ciągu tygodnia, aby uchwycić postęp gojenia się rany i zidentyfikować zaangażowane geny. Wszystkie procedury badawcze będą wykonywane w Centrum Klinicznym Narodowego Instytutu Zdrowia (CC PZH).

Głównym celem tych badań jest ocena ex vivo ścieżek gojenia się ran przy użyciu modelu pęcherzy skórnych i biopsji skóry w celu uzyskania hodowli keratynocytów i oceny odpowiedzi immunologicznej skóry. Zastosujemy trzy podejścia eksperymentalne: 1) ocena ex vivo odpowiedzi przeciwdrobnoustrojowych i przebudowy tkanek poprzez wyprowadzenie hodowli keratynocytów z pęcherzy skórnych i biopsji, 2) ocena in vivo i ex vivo odpowiedzi komórkowej po wywołaniu pęcherzy przy użyciu całonocnej ekspozycji na autologiczne surowicę i/lub sterylną sól fizjologiczną oraz 3) ocenę odpowiedzi in vivo na biopsje skóry. Przewidujemy, że badania dostarczą kluczowych nowych informacji na temat odpowiedzi immunologicznej i przebudowy ludzkiej skóry i będą miały bezpośrednie znaczenie dla rozwoju szczepionek, diagnostyki i terapii.