Płytki krwi i odpowiedź immunologiczna w szczepionce Covid-19 (Vax-SPEED-IT)

Choroba wywołana przez koronawirusa 2019 (COVID-19) to ogólnoustrojowa, potencjalnie ciężka i zagrażająca życiu choroba, wywołana przez koronawirusa 2 zespołu ostrej niewydolności oddechowej (SARS-CoV-2). Od czasu oficjalnego zdiagnozowania pierwszych przypadków zakażenia SARSCoV-2 w grudniu 2019 roku na całym świecie zadeklarowano ponad 280 milionów przypadków i 5 milionów zgonów. W odpowiedzi na ten stan zagrożenia zdrowia publicznego międzynarodowa społeczność naukowa podjęła ogromny wysiłek, aby zrozumieć wirusa i opracować bezpieczną szczepionkę zapobiegającą rozprzestrzenianiu się COVID-19. Zaledwie kilka dni po tym, jak Światowa Organizacja Zdrowia ogłosiła wybuch SarsCoV-2 globalną pandemią, opublikowano strukturę białka wirusowego Spike [1], co dostarczyło kluczowych wskazówek do projektowania szczepionek. W ciągu niespełna 12 miesięcy opracowano kilka szczepionek przeciwko SARS-CoV-2. Pierwszą szczepionką, która została zatwierdzona w Europie i która jest już podawana we Włoszech, jest szczepionka RNA COVID-19, opracowana przez BioNTech-Pfizer (BNT162b2). Zarówno ta szczepionka, jak i szczepionka opracowana przez firmę Moderna składają się z nanocząsteczek lipidowych (LNP), które dostarczają zmodyfikowany nukleozydami informacyjny RNA (mRNA) kodujący precyzyjną informację genetyczną immunogenu (pełnowymiarowe białko szczytowe SARS-CoV-2) do antygenu prezentujących komórki i wywołuje silną odpowiedź immunologiczną. mRNA ulega przejściowej ekspresji, nie integruje się z genomem i jest degradowany przez szlaki fizjologiczne.mRNA szczepionki są dobrze zdefiniowane molekularnie, wydajnie syntetyzowane z matryc DNA przez transkrypcję in vitro, która jest wolna od materiału komórkowego i zwierzęcego. Produkcja mRNA i formułowanie LNP to szybkie procesy o dużej skalowalności, co czyni tę technologię odpowiednią do szybkiego opracowywania szczepionek i dostarczania szczepionek pandemicznych [2].

Wykazano, że obie szczepionki mRNA, podawane w schemacie dwudawkowym, zapewniają 94-95% ochronę przed Covid-19 u osób w wieku 16 lat lub starszych [3,4]. Jednak odpowiedź zakrzepowo-zapalna na te szczepionki nigdy nie została zbadana, ponieważ wykorzystują one całkowicie nową technologię. Na przykład doniesiono, że szczepionki mRNA są wysoce reaktogenne zaraz po podaniu szczepionki, w szczególności u młodych dorosłych [3], ale nie wiemy, które komórki napędzają wczesną odpowiedź immunologiczną na szczepionki LNP-mRNA u ludzi i czy płytki krwi ulegną aktywacji jako dobrze. Co więcej, nie wiadomo, czy kobiety, które mają podwyższoną odpowiedź immunologiczną na inne szczepionki, są w stanie uzyskać szybszą odpowiedź na ten nowy typ szczepionek.

CELE BADANIA

Cel główny Scharakteryzowanie odpowiedzi płytkowej i immunologicznej oraz krzyżowej odpowiedzi immunologicznej między płytkami krwi u osób poddawanych szczepieniu przeciwko SARS-CoV-2.

Cel drugorzędny Badanie krótkoterminowej kinetyki odpowiedzi immunologicznej i przeciwciał u osób poddawanych szczepieniu przeciw SARS-CoV-2.

PROTOKÓŁ BADANIA

Będziemy rekrutować ochotników płci żeńskiej i męskiej (1:1) bez objawów infekcji, którzy zostaną poddani szczepieniu przeciwko SARS-CoV-2.

Zarejestrowani zdrowi ochotnicy zostaną poproszeni o poddanie się pobraniu krwi żylnej w następujących punktach czasowych:

• T0: 0-24 godziny przed pierwszą dawką szczepionki;
• T1: 72±24 godziny po podaniu pierwszej dawki szczepionki;
• T2: 10±2 dni po podaniu pierwszej dawki szczepionki;
• T3: 0-24 godziny przed drugą dawką szczepionki;
• T4: 72±24 godziny po podaniu drugiej dawki szczepionki;
• T5: 10±2 dni po podaniu drugiej dawki szczepionki.

Niewielka porcja krwi antykoagulowanej cytrynianem sodu zostanie wykorzystana w ciągu 1 godziny od pobrania krwi do przeprowadzenia testów in vivo (patrz lista poniżej), reszta zostanie odwirowana w ciągu 2 godzin, a próbki osocza i surowicy będą przechowywane w temperaturze -80°C do dalszej analizy (patrz lista poniżej).

BIBLIOGRAFIA

1. Wrapp D, Wang N, Corbett KS, Goldsmith JA, Hsieh CL, Abiona O, Graham BS, McLellan JS.Cryo-EM struktura skoku 2019-nCoV w konformacji prefuzyjnej. Nauka. 2020 13 marca;367(6483):1260-1263. doi:10.1126/science.abb2507.
2. Szczepionki mRNA Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, Weissman D. – nowa era w wakcynologii. Nat Rev Drug Discov. 2018 kwiecień;17(4):261-279. doi:10.1038/nr.2017.243.
3. Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N i in. Bezpieczeństwo i skuteczność szczepionki BNT162b2 mRNA Covid-19. N angielski J Med. 2020;383(27):2603-2615. doi:10.1056/NEJMoa2034577
4. Anderson EJ, Rouphael NG, Widge AT, Jackson LA i in.; Grupa badawcza mRNA-1273. Bezpieczeństwo i immunogenność szczepionki SARS-CoV-2 mRNA-1273 u osób starszych. N angielski J Med. 2020 17 grudnia;383(25):2427-2438. doi: 10.1056/NEJMoa2028436.
5. Lanza GA, Barone L, Scalone G i in.; Związane z zapaleniem skutki adiuwantowej szczepionki przeciw grypie Szczepienie na aktywację płytek krwi i autonomiczną funkcję serca. J Stażysta Med. Styczeń 2011;269(1):118-25. doi: 10.1111/j.1365-2796.2010.02285.x.

Na początku (T0) każda zarejestrowana osoba dorosła zostanie poproszona o wypełnienie krótkiego kwestionariusza, aby podać informacje na temat charakterystyki wyjściowej, wcześniejszej istotnej historii medycznej (tj. przewlekłe schorzenia, stosowanie leków ze szczególnym uwzględnieniem środków immunosupresyjnych), palenie tytoniu i narażenie na SARS-CoV-2 (tj. jeśli otrzymano wcześniejszą diagnozę COVID-19).

W każdym kolejnym punkcie czasowym (T1-T4) każdy uczestnik zostanie poproszony o wypełnienie krótkiego kwestionariusza dotyczącego objawów związanych ze szczepieniem, występowaniem zakażenia COVID-19 i stosowanych leków, aby uwzględnić potencjalne czynniki zakłócające.