Тромбоциты и иммунный ответ в вакцине против Covid-19 (Vax-SPEED-IT)

Коронавирусная болезнь 2019 (COVID-19) — системное, потенциально тяжелое и опасное для жизни заболевание, спровоцированное коронавирусом тяжелого острого респираторного синдрома 2 (SARS-CoV-2). С тех пор, как в декабре 2019 года были официально диагностированы первые случаи заражения SARSCoV-2, во всем мире было зарегистрировано более 280 миллионов случаев заболевания и 5 миллионов случаев смерти. В ответ на эту чрезвычайную ситуацию в области общественного здравоохранения международное научное сообщество приложило огромные усилия, чтобы понять вирус и разработать безопасную вакцину для предотвращения распространения COVID-19. Всего через несколько дней после того, как Всемирная организация здравоохранения объявила вспышку SarsCoV-2 глобальной пандемией, была опубликована структура вирусного белка Spike [1], которая послужила важным ключом к разработке вакцин. Менее чем за 12 месяцев было разработано несколько вакцин против SARS-CoV-2. Первой вакциной, которая была одобрена в Европе и которая уже применяется в Италии, является РНК-вакцина против COVID-19, разработанная BioNTech-Pfizer (BNT162b2). И эта вакцина, и вакцина, разработанная Moderna, состоят из липидных наночастиц (LNP), которые доставляют модифицированную нуклеозидами информационную РНК (мРНК), кодирующую точную генетическую информацию иммуногена (полноразмерный спайковый белок SARS-CoV-2) к антигену. представляет клетки и вызывает мощные иммунные ответы. мРНК временно экспрессируется, не интегрируется в геном и расщепляется физиологическими путями. мРНК вакцины хорошо определены на молекулярном уровне, эффективно синтезируются из матриц ДНК с помощью транскрипции in vitro, которая не содержит материалов клеточного и животного происхождения. Производство мРНК и формулировка LNP представляют собой быстрые процессы с высокой степенью масштабируемости, что делает эту технологию пригодной для быстрой разработки вакцин и поставок пандемических вакцин [2].

Было показано, что обе мРНК-вакцины, вводимые по схеме с двумя дозами, обеспечивают 94-95% защиту от Covid-19 у лиц в возрасте 16 лет и старше [3,4]. Однако тромбовоспалительный ответ на эти вакцины никогда не изучался, поскольку они используют совершенно новую технологию. Например, сообщалось, что мРНК-вакцины обладают высокой реактогенностью сразу после введения вакцины, особенно у молодых людей [3], но мы не знаем, какие клетки запускают ранний иммунный ответ на вакцины с мРНК LNP у людей и активируются ли тромбоциты при этом. хорошо. Кроме того, неизвестно, способны ли женщины с повышенным иммунным ответом на другие вакцины быстрее реагировать на этот новый тип вакцин.

ЦЕЛИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Основная цель Охарактеризовать тромбоцитарный и иммунный ответ, а также взаимодействие тромбоцитов и иммунитета у субъектов, подвергающихся вакцинации против SARS-CoV-2.

Второстепенная цель. Изучить краткосрочную кинетику иммунного ответа и ответа антител у субъектов, подвергающихся вакцинации против SARS-CoV-2.

ПРОТОКОЛ ОБУЧЕНИЯ

Мы будем регистрировать добровольцев женского и мужского пола (1:1) без признаков инфекции, которые будут подвергнуты вакцинации против SARS-CoV-2.

Зарегистрированным здоровым добровольцам будет предложено пройти забор венозной крови в следующие моменты времени:

• T0: 0-24 часа до введения первой дозы вакцины;
• T1: 72 ± 24 часа после введения первой дозы вакцины;
• T2: 10 ± 2 дня после введения первой дозы вакцины;
• T3: 0-24 часа до введения второй дозы вакцины;
• T4: 72 ± 24 часа после введения второй дозы вакцины;
• T5: 10 ± 2 дня после введения второй дозы вакцины.

Небольшая аликвота крови, антикоагулированная цитратом натрия, будет использована в течение 1 часа после забора крови для проведения анализов in vivo (см. список ниже), оставшаяся часть будет центрифугирована в течение 2 часов, а образцы плазмы и сыворотки будут храниться при температуре -80°C. для дальнейшего анализа (см. список ниже).

ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Wrapp D, Wang N, Corbett KS, Goldsmith JA, Hsieh CL, Abiona O, Graham BS, McLellan JS. Структура крио-ЭМ шипа 2019-nCoV в конформации перед слиянием. Наука. 2020 13 марта; 367(6483):1260-1263. doi:10.1126/science.abb2507.
2. Парди Н., Хоган М.Дж., Портер Ф.В., Вайсман Д. мРНК-вакцины – новая эра в вакцинологии. Nat Rev Drug Discov. 2018 апр; 17 (4): 261-279. doi: 10.1038/nrd.2017.243.
3. Полак Ф.П., Томас С.Дж., Китчин Н. и др. Безопасность и эффективность мРНК-вакцины BNT162b2 Covid-19. N Engl J Med. 2020;383(27):2603-2615. дои: 10.1056/NEJMoa2034577
4. Андерсон Э.Дж., Руфаэль Н.Г., Видж А.Т., Джексон Л.А. и др.; Исследовательская группа мРНК-1273. Безопасность и иммуногенность мРНК-вакцины SARS-CoV-2-1273 у пожилых людей. N Engl J Med. 2020 17 декабря; 383 (25): 2427-2438. дои: 10.1056/NEJMoa2028436.
5. Lanza GA, Barone L, Scalone G и др.; Связанные с воспалением эффекты адъювантной вакцинации против гриппа А на активацию тромбоцитов и вегетативную функцию сердца. J Интерн Мед. 2011 Январь; 269(1):118-25. doi: 10.1111/j.1365-2796.2010.02285.x.

На исходном уровне (T0) каждому зарегистрированному взрослому будет предложено заполнить короткую анкету, чтобы предоставить информацию об исходных характеристиках, предыдущем соответствующем анамнезе (т. хронические заболевания, использование препаратов с особым акцентом на иммунодепрессанты), курение и воздействие SARS-CoV-2 (т. е. если ранее был поставлен диагноз COVID-19).

В любой другой момент времени (T1-T4) каждому участнику будет предложено заполнить короткую анкету о симптомах, связанных с вакцинацией, возникновением инфекции COVID-19 и используемыми препаратами, чтобы учесть потенциальные искажающие факторы.