Piastrine e risposta immunitaria nel vaccino contro il Covid-19 (Vax-SPEED-IT)

La malattia da coronavirus 2019 (COVID-19) è una malattia sistemica, potenzialmente grave e pericolosa per la vita, scatenata dalla sindrome respiratoria acuta grave coronavirus 2 (SARS-CoV-2). Da quando sono stati ufficialmente diagnosticati i primi casi di infezione da SARSCoV-2, nel dicembre 2019, sono stati dichiarati in tutto il mondo oltre 280 milioni di casi e 5 milioni di decessi. In risposta a questa emergenza sanitaria pubblica, la comunità scientifica internazionale ha compiuto uno sforzo enorme per comprendere il virus e sviluppare un vaccino sicuro per prevenire la diffusione del COVID-19. Pochi giorni dopo che l'Organizzazione Mondiale della Sanità ha dichiarato l'epidemia di SarsCoV-2 una pandemia globale, è stata pubblicata la struttura della proteina virale Spike [1], che ha fornito indizi fondamentali per progettare i vaccini. In meno di 12 mesi sono stati sviluppati diversi vaccini contro SARS-CoV-2. Il primo vaccino che è stato approvato in Europa e che è già in corso di somministrazione in Italia è il vaccino a RNA COVID-19, sviluppato da BioNTech-Pfizer (BNT162b2). Sia questo vaccino che quello sviluppato da Moderna sono costituiti da una nanoparticella lipidica (LNP) che fornisce un RNA messaggero modificato da nucleosidi (mRNA) che codifica le informazioni genetiche precise dell'immunogeno (proteina spike a lunghezza intera SARS-CoV-2) all'antigene presentando cellule e suscita potenti risposte immunitarie. L'mRNA è espresso transitoriamente, non si integra nel genoma ed è degradato da percorsi fisiologici.mRNA i vaccini sono molecolarmente ben definiti, sintetizzati in modo efficiente da modelli di DNA mediante trascrizione in vitro, che è priva di materiale di origine cellulare e animale. La produzione di mRNA e la formulazione di LNP sono processi rapidi di elevata scalabilità, che rendono questa tecnologia adatta per lo sviluppo rapido di vaccini e la fornitura di vaccini pandemici [2].

Entrambi i vaccini a mRNA, somministrati con un regime a due dosi, hanno dimostrato di fornire una protezione del 94-95% contro Covid-19 nelle persone di età pari o superiore a 16 anni [3,4]. Tuttavia, la risposta tromboinfiammatoria verso questi vaccini non è mai stata esplorata in quanto sfruttano una tecnologia completamente nuova. Ad esempio, è stato riportato che i vaccini mRNA sono altamente reattogeni subito dopo la somministrazione del vaccino, in particolare nei giovani adulti [3], ma non sappiamo quali cellule guidano la risposta immunitaria precoce ai vaccini LNP-mRNA negli esseri umani e se le piastrine si attivano come bene. Inoltre, non è noto se le donne, che hanno una maggiore risposta immunitaria ad altri vaccini, siano in grado di montare una risposta più rapida a questo nuovo tipo di vaccini.

OBIETTIVI DELLO STUDIO

Obiettivo primario Caratterizzare la risposta piastrinica e immunitaria e il cross-talk immunitario-piastrinico in soggetti sottoposti a vaccinazione SARS-CoV-2.

Obiettivo secondario Studiare la cinetica a breve termine della risposta immunitaria e anticorpale in soggetti sottoposti a vaccinazione SARS-CoV-2.

PROTOCOLLO DI STUDIO

Arruoleremo volontarie donne e uomini (1:1) senza segni di infezione che saranno sottoposti a vaccinazione SARS-CoV-2.

Ai volontari sani iscritti verrà chiesto di sottoporsi a prelievi di sangue venoso nei seguenti momenti:

• T0: 0-24 ore prima della prima dose di vaccino;
• T1: 72±24 ore dopo la prima dose di somministrazione del vaccino;
• T2: 10±2 giorni dopo la prima dose di somministrazione del vaccino;
• T3: 0-24 ore prima della seconda dose di vaccino;
• T4: 72±24 ore dopo la somministrazione della seconda dose di vaccino;
• T5: 10±2 giorni dopo la seconda dose di somministrazione del vaccino.

Una piccola aliquota di sangue anticoagulato con citrato di sodio verrà utilizzata entro 1 ora dal prelievo del sangue per eseguire saggi in vivo (vedi elenco sotto), il resto verrà centrifugato entro 2 ore e i campioni di plasma e siero verranno conservati a -80°C per ulteriori analisi (vedi elenco sotto).

RIFERIMENTI

1. Wrapp D, Wang N, Corbett KS, Goldsmith JA, Hsieh CL, Abiona O, Graham BS, McLellan JS.Cryo-EM struttura del picco 2019-nCoV nella conformazione di prefusione. Scienza. 2020 Mar 13;367(6483):1260-1263. doi:10.1126/science.abb2507.
2. Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, Weissman D. Vaccini mRNA: una nuova era nella vaccinologia. Nat Rev Drug Discov. 2018 aprile;17(4):261-279. doi:10.1038/nrd.2017.243.
3. Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. Sicurezza ed efficacia del vaccino BNT162b2 mRNA Covid-19. N Inglese J Med. 2020;383(27):2603-2615. doi:10.1056/NEJMoa2034577
4. Anderson EJ, Rouphael NG, Widge AT, Jackson LA, et al.; Gruppo di studio sull'mRNA-1273. Sicurezza e immunogenicità del vaccino SARS-CoV-2 mRNA-1273 negli anziani. N Inglese J Med. 17 dicembre 2020; 383 (25): 2427-2438. doi: 10.1056/NEJMoa2028436.
5. Lanza GA, Barone L, Scalone G, et al.; Effetti correlati all'infiammazione della vaccinazione adiuvante contro l'influenza A sull'attivazione piastrinica e sulla funzione autonomica cardiaca. J Tirocinante Med. 2011 gennaio;269(1):118-25. doi: 10.1111/j.1365-2796.2010.02285.x.

Al basale (T0) a ciascun adulto arruolato verrà chiesto di compilare un breve questionario, per fornire informazioni sulle caratteristiche al basale, precedente anamnesi medica rilevante (es. condizioni mediche croniche, uso di farmaci con particolare attenzione agli agenti immunosoppressori), fumo ed esposizione a SARS-CoV-2 (ovvero se è stata ricevuta una precedente diagnosi di COVID-19).

In qualsiasi ulteriore momento (T1-T4), a ciascun partecipante verrà chiesto di compilare un breve questionario sui sintomi correlati alla vaccinazione, all'insorgenza dell'infezione da COVID-19 e ai farmaci utilizzati, per tenere conto di potenziali fattori confondenti.