Determinantes Patobiológicos da Aterosclerose na Juventude (PDAY)

FUNDO:

O International Atherosclerosis Project (IAP) quantificou a aterosclerose da aorta e das artérias coronárias em mais de 31.000 pessoas de 10 a 69 anos que morreram entre 1960 e 1965 em quinze cidades e países em todo o mundo. O IAP estabeleceu que a gravidade média da aterosclerose diferia amplamente em muitas partes do mundo e que as diferenças se correlacionavam com a mortalidade por doença isquêmica do coração. Também demonstrou que as estrias gordurosas da infância eram prevalentes e graves em meninos e meninas. As placas fibrosas geralmente aparecem pela primeira vez entre as idades de 20 e 30 anos e proporcionalmente à prevalência de doença isquêmica na população adulta. Desde que os resultados do IAP foram publicados pela primeira vez em 1968, a pesquisa em aterosclerose mudou muito de métodos morfológicos macroscópicos e microscópicos para manipulação de animais experimentais, cultura in vitro de células da parede arterial e aplicação de métodos microquímicos, físico-químicos e técnicas imunológicas aos tecidos.

O uso dessas novas técnicas permitiu testar a hipótese de que uma série de mudanças na estria gordurosa entre os quinze e os vinte e cinco anos leva à placa fibrosa típica e testar a hipótese de que outras lesões que não as estrias gordurosas precedem e podem progredir para placas fibrosas. O estudo também testou associações dos fatores de risco estabelecidos para aterosclerose com estágios iniciais de progressão da lesão, como observado em pessoas jovens.

O protocolo deste estudo serviu de base para o protocolo desenvolvido pelo Comitê sobre Determinantes Patobiológicos da Aterosclerose na Juventude da Organização Mundial da Saúde (OMS). Foi planejado incorporar este estudo ao estudo da OMS para que fatores transculturais e geográficos pudessem ser avaliados em populações com maior e menor incidência de aterosclerose.

NARRATIVA DO DESENHO:

Um protocolo comum foi seguido para coletar dados de fatores de risco e artérias coronárias e aortas de aproximadamente 1.000 autópsias por ano durante três anos. Os espécimes foram coletados e preservados de forma padronizada em cada centro de coleta. O gerenciamento de dados e a análise estatística foram conduzidos na Universidade do Texas em San Antonio. A unidade da Louisiana State University era composta por três laboratórios centrais: o centro de bioquímica lipídica; o centro de fatores de risco para doença cardíaca coronária; e um centro de morfologia grosseira. O laboratório central de morfometria estava localizado na Ohio State University. A administração e a coordenação foram dirigidas pela Universidade de Chicago e pela Universidade de Illinois.

Além de servir como centros de coleta, muitos dos centros realizaram projetos de pesquisa individuais. Na Universidade do Alabama em Birmingham, duas investigações separadas, mas relacionadas, foram conduzidas: o Dr. Miller analisou os vários colágenos solubilizando-os como frações peptídicas e isolando os peptídeos por meio de cromatografia; Dr. Gay usou anticorpos monoclonais para definir a distribuição dos vários colágenos em lesões ateromatosas. Na West Virginia University sob o Dr. Jagannathan, havia estudos sobre ácidos graxos isoméricos e proteoglicanos. O Dr. Reichenbach, da Universidade de Washington, estudou a distribuição de marcadores imunocitoquímicos de diferenciação de células musculares lisas e subpopulações de leucócitos nas artérias coronárias, bem como procurou DNA viral em placas. Em Baylor, a distribuição tridimensional de inclusões lipídicas, macrófagos e células musculares lisas nas artérias coronárias foi determinada por fluorescência digital. O Dr. Mergner, da Universidade de Maryland, coletou espécimes no programa de autópsia imediata, que forneceu espécimes livres de autólise. Ele também realizou microscopia eletrônica de transmissão e varredura, microanálise de raios X, análise lipídica e procedimentos de imunofluorescência e imunoperoxidase para definir o conteúdo de cálcio e os componentes do citoesqueleto. Dr. Virmani em Vanderbilt determinou o papel de aminas biogênicas como histamina, serotonina e catecolaminas na aterosclerose e correlacionou o conteúdo de aminas com a presença de mastócitos na adventícia.

Em 1988, duas bolsas de pesquisa regulares foram concedidas como parte deste estudo multicêntrico. A concessão da Southwest Foundation for Biomedical Research determinou os genótipos para cada indivíduo com relação aos polimorfismos do comprimento do fragmento de restrição na apolipoproteína e nos genes do receptor de LDL usando análises Southern blot de DNA de amostras de fígado enviadas de cada centro de coleta. Ele também tipificou os indivíduos para genótipos de isoforma apo E usando sondas oligonucleotídicas. A bolsa da Ohio State University correlacionou geometria axial coronariana 3-D e patologia.

Algumas das principais questões abordadas pelo estudo incluíram: se algumas ou todas as estrias gordurosas evoluíram para placas fibrosas e lesões transicionais; as alterações morfométricas e bioquímicas das lesões indicadas pela progressão; a frequência e as características das lesões insudativas e proliferativas que podem indicar doença progressiva; diferenças sexuais nas lesões; se imunocomplexos ou infecções virais estavam implicados.

No ano fiscal de 1991, seis bolsas foram concedidas sob o título "Fatores de risco na aterogênese humana precoce" (RFEHA). O objetivo era estender o PDAY em curso e: obter um número adequado de casos femininos para que as associações de fatores de risco pudessem ser detectadas e estudadas com precisão; aumentar o poder do estudo em geral para detectar associações de fatores de risco com lesões elevadas, que começaram a aparecer nessa faixa etária; e aumentar o poder do estudo para detectar influências genéticas na aterosclerose. A REFHA adicionou 1.400 novos espécimes aos 1.800 casos já coletados no PDAY para atingir aproximadamente 3.000 espécimes totais. A ênfase foi colocada nos casos femininos e naqueles que proporcionaram a melhor oportunidade para estudar lesões de transição entre estrias gordurosas e placas fibrosas.

Em 1998, o NHLBI concedeu R24HL60808 por cinco anos para fornecer e manter um arquivo de tecidos cardiovasculares e outros tecidos humanos que podem ser usados ​​por outros Estados Unidos e investigadores internacionais para estudar a aterosclerose humana. Os investigadores, como parte do PDAY e RFEHA, reuniram material de autópsia (principalmente de aorta e artéria coronária, mas com outros tecidos, incluindo fígado, soro e tecido adiposo) de mais de 3.000 homens e mulheres negros e brancos. Estes foram de autópsias em indivíduos com idades entre 15 e 34 anos e obtidos dentro de 48 horas após a morte. A concessão para o espécime cardiovascular e a biblioteca de dados foi renovada até julho de 2007.