Como a supercompensação de glicogênio é regulada no músculo esquelético humano (Supercomp)

Nove voluntários saudáveis ​​e moderadamente aptos participaram do estudo. Os sujeitos deram consentimento informado por escrito após terem sido informados de qualquer possível risco e desconforto associado ao estudo. O estudo foi aprovado pelo comitê de ética regional da Dinamarca (Journal number: H-4-2013-071) e realizado de acordo com as Declarações de Helsinki II.

Todos os indivíduos foram submetidos a 3 investigações clínicas (dia 1, dia 2 e dia 5) durante um regime de supercompensação de glicogênio de 5 dias. Os indivíduos foram orientados a abster-se de atividade física e comer uma dieta controlada contendo 60% de carboidratos (CHO) por 4 dias antes dos experimentos iniciais.

Na chegada ao laboratório no dia 1, os sujeitos realizaram exercícios extensores de joelho unipodais por 1 hora a 80% do PWL intercalados por sessões de 5 minutos a 90% do PWL. Isso foi seguido por exercícios intervalados até a exaustão contendo sessões de 4 min começando em 100% PWL seguido de 1 min a 50% de PWL. Ao cessar o exercício, os indivíduos tomaram banho e descansaram na posição supina por 4 horas. Em seguida, um clamp euglicêmico hiperinsulinêmico de 120 min foi iniciado por uma injeção de insulina em bolus (9,0 mU/kg, Actrapid, Novo Nordisk, Dinamarca) seguida de infusão contínua de insulina (1,42 mU/kg/min de insulina) atingindo um nível de insulina plasmática em torno de 100 µU /mL (n=9). Pelo menos 2 horas antes do clamp de insulina, os cateteres foram colocados em ambas as veias femoral, antecubital e dorsal da mão. Uma almofada térmica foi colocada em torno da parte inferior do braço e da mão para "arterializar" o sangue retirado da veia da mão. A absorção/liberação de substrato nas pernas foi calculada multiplicando a diferença arterio-venosa (AV) na concentração de substrato sanguíneo pelo fluxo sanguíneo arterial femoral (medido por ultrassom, Philips DICOM). Os níveis de glicose no sangue foram mantidos no alvo pré-definido euglicêmico ajustando continuamente a taxa de infusão de glicose (GIR) (solução de glicose a 20%; Fresenius Kabi, Suécia). Medidas simultâneas de diferenças de substrato AV e fluxo sanguíneo foram realizadas a cada 20 min. Biópsias musculares de m. vastos laterais foram obtidos sob anestesia local (3-5 ml de xilocaína, 20 mg/ml.) no estado basal e estimulado por insulina (120 min) pelo uso da técnica de biópsia por agulha. Os espécimes musculares foram congelados em 20 segundos em nitrogênio líquido e armazenados a -80°C para análise posterior. Uma nova incisão foi feita para cada biópsia e espaçada de 4 a 5 cm.

Este procedimento de clamp de insulina em combinação com biópsias musculares basais e estimuladas por insulina foi repetido no estado de repouso (sem exercício prévio) no dia 2 e no dia 5. Os indivíduos chegaram de manhã em jejum noturno no dia 1, dia 2 e dia 5. Durante o regime de supercompensação de 5 dias, os indivíduos receberam uma dieta isocalórica predefinida contendo 80% de carboidratos, 10% de gordura e 10% de proteínas. Todos os itens alimentares foram fornecidos aos sujeitos e o cumprimento do regime alimentar foi assegurado por meio de pesquisa.