Intervenção em Crianças com Desnutrição

As crianças mexicanas enfrentam ambas as formas de desnutrição: subnutrição e supernutrição. A desnutrição é comum entre crianças que vivem em áreas rurais e populações indígenas, onde as crianças sofrem de insegurança alimentar e não têm acesso a nutrição de qualidade com níveis adequados de micronutrientes. Estudos com grupos populacionais vulneráveis, como crianças, no México mostraram que existem deficiências de micronutrientes de vitaminas A, E, D, C e minerais como ferro, zinco, cálcio e selênio. As deficiências de micronutrientes podem afetar as funções fisiológicas, o crescimento das crianças, a função cognitiva e prejudicar os processos metabólicos a nível bioquímico e celular. Além disso, a exposição precoce de crianças à desnutrição, em conjunto com a existência de suscetibilidade genética, pode predispor as crianças a desenvolverem anormalidades metabólicas como a síndrome metabólica (SM). Assim, aumentando o risco das crianças desenvolverem diabetes e doenças cardiovasculares na idade adulta.

Os pesquisadores decidiram implementar um estudo de intervenção em comunidades rurais no estado de Yucatán porque esta região apresenta uma proporção maior de população maia do que outros estados do México, mas também Yucatán tem a maior prevalência de obesidade e desnutrição em crianças no país. Estudos anteriores do grupo de pesquisadores em uma população infantil maia revelaram uma frequência de 50% de MetS, 34,9% de resistência à insulina (IR), além de deficiências de micronutrientes essenciais. Apesar de os micronutrientes serem essenciais para o funcionamento adequado dos processos metabólicos, poucos estudos no México propõem uma intervenção com alimentos enriquecidos com múltiplos nutrientes, como micronutrientes e ácidos graxos ômega-3. Além disso, há pouca evidência de estudos de intervenção com micronutrientes em escolares com desnutrição no México, como estratégia para impactar no estado nutricional e nas condições metabólicas preventivas. Por exemplo, um estudo de García-López S et al em escolares mexicanos com sobrepeso e SM mostrou uma diminuição nos perfis lipídico e glicêmico quando suplementados com ácidos graxos ômega 3 por 1 mês. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da intervenção de 4 semanas com biscoitos enriquecidos contendo uma fórmula de micronutrientes projetada especificamente para atingir as deficiências nutricionais identificadas nas crianças. Os investigadores avaliaram parâmetros antropométricos, clínicos, bioquímicos e cognitivos; dieta e parâmetros moleculares foram avaliados apenas no pré-intervenção.

1. Local do estudo: Este estudo foi realizado em três escolas primárias de comunidades rurais maias de Yucatán. As comunidades são Xocén, Tahmek e San José Oriente.
2. Desenho do estudo: Este estudo foi um ensaio clínico pareado. Os participantes foram seu próprio controle para a intervenção de alimentos enriquecidos.
3. Tamanho da amostra: Os investigadores usaram uma equação para população finita. O tamanho da amostra foi estimado em 80% de poder estatístico e 95% de nível de confiança. Foi considerado 15% para cálculos de desistência durante a intervenção. Com base na prevalência de desnutrição no México e em uma comunidade (Xocén), o número total de participantes foi de 106.
4. Procedimento de amostragem: Os investigadores consideraram os critérios de inclusão e exclusão. Os participantes foram designados com a técnica de amostragem por conveniência.
5. Intervenção: A intervenção consistiu em biscoito de aveia artesanal ou biscoito industrializado, ambos enriquecidos com a fórmula FV-UNAM. Os biscoitos artesanais de aveia enriquecidos com a fórmula do suplemento foram administrados a escolares de Xocén. Os biscoitos industrializados, chamados de Globitos, foram doados pela fábrica de biscoitos DONDÉ, e foram suplementados com a mesma fórmula dos biscoitos de aveia. Os Globitos enriquecidos foram distribuídos aos escolares de Tahmek e San José Oriente. A fórmula FV para crianças foi elaborada pela Facultad de Química-UNAM. A fórmula de FLV é em forma de pó que contém vitaminas, minerais, antioxidantes e ácidos graxos ômega-3, nutrientes observados como deficientes nas populações escolares estudadas. A formulação estava dentro dos requisitos da Ingestão Diária de Referência (RDI) para a população mexicana, de acordo com a idade, do Padrão Oficial Mexicano (NOM)-051-SCFI/SSA1-2010.

6. Medidas: Foi realizada entrevista nutricional-clínica face a face com pais ou responsáveis ​​e crianças. Quando necessário, foi utilizado o auxílio de um tradutor local. Os dados nutricionais foram coletados antes da pré-intervenção. Parâmetros antropométricos, clínicos, bioquímicos e cognitivos foram coletados pré e pós-intervenção; dieta e parâmetros moleculares foram avaliados apenas no pré-intervenção.

   1. Os parâmetros antropométricos foram medidos de acordo com a International Society for the Advancement of Kinanthropometry (ISAK). Os parâmetros incluídos foram: peso corporal (SECA 869), altura (SECA 217); circunferência do punho, braço e cintura (LUFKIN); dobra cutânea tricipital (LANGE); diâmetros do punho, úmero e fêmur (VITRUVIAN). Em seguida, estimaram-se os indicadores IMC para idade e estatura para idade, que foram traduzidos para escore-z de acordo com a classificação de padrões de crescimento da Organização Mundial da Saúde (OMS). Os diâmetros ósseos foram traduzidos para o escore z e a dobra cutânea triciptal para o percentil.
   2. A composição corporal (gordura corporal e massa livre de gordura) foi determinada por análise de bioimpedância (TANITA BC-1500).
   3. A pressão arterial foi medida duas vezes com um período de descanso de 10 minutos. Os investigadores usaram a média das duas medições e converteram o valor em percentil.
   4. Parâmetros bioquímicos foram coletados de amostras de sangue periférico (8ml) após 12 horas de jejum na presença dos pais ou responsáveis. O 4ml foi usado para hemograma completo e determinações químicas do sangue, e também os parâmetros moleculares. O restante da amostra (4ml) será utilizado para a determinação de micronutrientes no soro (vitamina A, vitamina E e vitamina D). As amostras de sangue foram centrifugadas 15 minutos após a coleta e separadas em alíquotas. As alíquotas foram mantidas em condições ótimas (2-8◦C) até o processamento. Todos os parâmetros bioquímicos foram determinados pelo laboratório central do Hospital Juárez de México de acordo com as instruções específicas dos fabricantes dos kits comerciais. Os micronutrientes serão quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC).
   5. O teste cognitivo foi avaliado por meio do Draw-A-Person Intellectual Ability Test for Children, Adolescents and Adults (DAP:IQ), que permite estimar a capacidade intelectual. O teste cognitivo foi analisado por dois avaliadores.
   6. A ingestão alimentar foi avaliada por meio de um questionário recordatório alimentar padrão de 24 horas antes da intervenção. Esta avaliação consiste em entrevistas presenciais com pais ou tutores e crianças. Os pesquisadores usaram medidas caseiras para estimar o tamanho das porções de alimentos e bebidas consumidos. Os dados de ingestão dietética foram analisados ​​por um programa de análise dietética (software Nutrimind). Este software usa o sistema de alimentos equivalente mexicano e o banco de dados de alimentos do Departamento de Agricultura dos EUA (USDA).
   7. A frequência da ingestão de alimentos foi estimada usando o Questionário Semi-Quantitativo de Frequência Alimentar (SFFQ), específico para a população mexicana em idade escolar. Esta avaliação foi uma entrevista face a face com as crianças na presença do professor. O SFFQ foi analisado usando um método válido de Ramírez-Silva I et al., 2016.
   8. Os parâmetros moleculares incluíram a genotipificação de polimorfismos genéticos associados a alterações metabólicas em adultos mexicanos e comunidades indígenas do México. Primeiramente, a extração do DNA genômico do sangue total foi realizada pela técnica de Miller. Polimorfismos de genes Cassete de ligação de ATP (trifosfato de adenosina) subfamília A membro 1 (ABCA1), receptor ativado por proliferador de peroxissoma gama (PPARG), regulador de glucoquinase (GCKR), inibidor de quinase dependente de ciclina-2A/B (CDKN2A/2B), massa gorda e associado à obesidade (FTO) e fator nuclear 4 alfa do hepatócito (HNF4A) foram genotipados usando sondas TaqMan® em Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR) (QS5 da Applied Biosystem). O equilíbrio de Hardy-Weinberg (H-W) foi verificado. As frequências alélicas foram obtidas e comparadas com as frequências relatadas pelo Projeto 1000 Genomas.
7. Efeitos adversos dos cookies enriquecidos. Quaisquer efeitos adversos foram avaliados durante uma visita semanal. As informações foram obtidas por professores, pais ou tutores.
8. Aprovação ética. O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética do Hospital Juárez de México (HJM2315/14-C).
9. Análise de dados. Os dados foram analisados ​​usando o Statistical Program for Social Sciences (SPSS), versão 20. Os dados descritivos foram apresentados com tabelas pré e pós-intervenção. Variáveis ​​categóricas foram usadas como porcentagens. Variáveis ​​contínuas foram testadas quanto à normalidade e foram apresentadas como média e desvio padrão. Para determinar a significância das diferenças observadas entre as medições pré e pós-intervenção, os investigadores usaram testes pareados t-Student (variáveis ​​paramétricas) e Wilcoxon (não paramétricos). Uma ANCOVA foi realizada para identificar as correlações entre o estado nutricional e os parâmetros, e foi ajustada por idade, sexo e IMC-z-score como variáveis ​​fixas. A regressão logística foi utilizada para determinar os efeitos do polimorfismo sob o risco de anormalidade metabólica. Foi utilizado um nível de confiança de 95% e um valor de P < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.