Marcadores de Exacerbações da DPOC (MARKED)

O estudo MARKED é um estudo exploratório, prospectivo, de centro único, longitudinal, observacional com acompanhamento de oito semanas. O objetivo principal é explorar quais biomarcadores de um painel de biomarcadores frequentemente medidos (sintomas, sinais vitais, parâmetros de função pulmonar e escarro espontâneo, esfregaços nasofaríngeos, fezes e amostras de sangue) predizem uma exacerbação e/ou infecção respiratória em pacientes com DPOC. Além disso, os objetivos secundários são:

I. investigar alterações longitudinais na composição microbiana e interações hospedeiro-microbioma no estado estável, na AECOPD e durante a recuperação.

II. estudar a heterogeneidade da EADPOC por meio da caracterização clínica, funcional, microbiana, proteômica, transcriptômica, genética, metabolômica, inflamatória e bioquímica abrangente desses eventos.

III. determinar a correlação entre alterações microbianas nas vias aéreas/intestino e biomarcadores inflamatórios no sangue durante o acompanhamento longitudinal.

4. para investigar longitudinalmente biomarcadores de AECOPD em subgrupos clinicamente relevantes de pacientes com DPOC (por exemplo, atuais versus ex-fumantes, eosinófilos sanguíneos altos versus baixos, exacerbadores frequentes versus infrequentes).

V. investigar de forma abrangente se as interações hospedeiro-microbioma, biomarcadores e modelos preditivos identificam os pacientes que não exacerbam apesar de terem uma infecção respiratória.

Todas as EADPOC avaliadas pelo médico do Ciro como moderadas ou graves serão registradas neste estudo. A EADPOC moderada é definida por uma piora dos sintomas > 2 dias consecutivos, levando ao tratamento com glicocorticóides sistêmicos, antibióticos ou ambos. Os eventos graves são caracterizados por oxigenoterapia (aumentada), ventilação não invasiva (VNI) ou internação hospitalar que durou > 24 horas, além de tratamento com glicocorticóides sistêmicos, antibióticos ou ambos.

Embora com o objetivo de incluir pelo menos 50 pacientes com AECOPD e pelo menos 50 pacientes sem AECOPD, serão recrutados para o estudo até 150 pacientes consecutivos com diagnóstico primário de DPOC admitidos para reabilitação pulmonar internada no Ciro. Embora existam regras práticas de tamanho de amostra para modelagem de regressão multivariada e estratégias de modelagem de previsão, este estudo é de natureza exploratória. Portanto, a quantidade de biomarcadores supera a quantidade quando se aplica a regra de ouro que afirma que para cada potencial variável preditiva devem ser observados 10 eventos. O estudo visa incluir pelo menos 50 pacientes individuais únicos que apresentam ≥1 AECOPD e pelo menos 50 pacientes individuais sem AECOPD, para fornecer dados de referência precisos (ou seja, precisão suficiente para estimar a média e o desvio padrão [DP]) para biomarcadores exploratórios. A partir de estudos anteriores em Ciro, sabe-se que aproximadamente 42% dos pacientes desenvolverão pelo menos uma EADPOC durante a internação (16). Como as EADPOC são imprevisíveis e variáveis, o que é uma justificativa importante para o presente estudo, espera-se que o estudo precise de 100 a 150 pacientes para ser incluído. O objetivo deste estudo não é desenvolver um modelo multivariado, mas sim explorar as associações entre biomarcadores e a ocorrência de um evento.

As características da linha de base serão relatadas como média e DP ou como mediana e intervalo interquartílico (IQR) para variáveis ​​contínuas, conforme apropriado, e como contagem e porcentagem para características categóricas. Os preditores de tempo para o primeiro AECOPD durante o período do estudo serão modelados usando regressão de riscos proporcionais de Cox univariada e multivariada. As associações serão apresentadas como taxa de risco (HR) e intervalo de confiança de 95% (CI). A dependência do desempenho preditivo dos biomarcadores será testada usando termos de interação. A estatística de concordância, ou estatística c, será estimada para avaliar a capacidade discriminativa. Além disso, serão criados gráficos AUC-Receiver Operating Characteristics (ROC) dependentes do tempo. A calibração será avaliada comparando a probabilidade prevista com a probabilidade observada de um AECOPD e examinada com um gráfico de calibração e inclinação de calibração, assumindo que não há censura de dados antes do final do acompanhamento.

A caracterização do microbioma será determinada pela diversidade alfa e beta e abundância relativa de táxons bacterianos. A diversidade alfa será tratada como uma variável contínua e analisada por meio de testes estatísticos apropriados, enquanto a ordenação das distâncias da diversidade beta será feita por meio de análise de componentes principais. Análises multiômicas serão usadas para gerar hipóteses sobre os fatores que promovem a progressão para EADPOC. A análise de enriquecimento diferencial para seleção de recursos em todas as 'ômicas será feita após contabilizar o teste de múltiplas hipóteses usando um modelo robusto que considera suposições distribucionais. A associação entre variantes genéticas e (AE)DPOC e infecções microbianas será estudada usando dados de sequenciamento de todo o exoma.

Mapas auto-organizados (SOMs, também conhecidos como mapas de Kohonen) serão usados ​​para criar uma representação ordenada dos atributos selecionados no momento da AECOPD usando o Viscovery Profiler 7.1 (Viscovery Software GmbH, Viena, Áustria). Com base nos grupos de dados homogêneos identificados criados no modelo SOM, os clusters serão gerados usando o algoritmo SOM-Ward Cluster da Vicovery. As variáveis ​​resumidas das características clínicas para a amostra total, e para os conglomerados, serão apresentadas como média e DP para variáveis ​​quantitativas, e como porcentagens para variáveis ​​discretas. As diferenças entre os grupos serão avaliadas por meio de testes t bilaterais integrados. Correlações de medidas repetidas serão usadas para determinar a associação individual entre alterações microbianas nas vias aéreas/intestino e biomarcadores inflamatórios sistêmicos entre os pacientes.

No caso de dados ausentes nos preditores, a imputação de regressão estocástica com especificação totalmente condicional será usada para imputar o conjunto de dados para permitir o uso de todos os pacientes incluídos para as análises. Os valores serão desenhados usando correspondência de média preditiva. A significância estatística será denotada por p

O presente estudo é classificado como pesquisa com risco insignificante. Não há riscos sérios associados à participação neste estudo. Hematomas podem ocorrer a partir de amostras de sangue venoso. Pode ocorrer desconforto nasal durante a amostragem nasal. Os pacientes podem sentir falta de ar e fadiga devido a medições diárias adicionais (p. questionários, função pulmonar) e/ou pode recusar a participação ou desistir do estudo devido ao fardo de amostragem frequente e outras avaliações. Extensas diretrizes foram estabelecidas para monitorar a pesquisa científica de forma estruturada e baseada em protocolos no Ciro. No contexto do relatório NFU 'Garantia de qualidade para pesquisa relacionada a pessoas', a pesquisa iniciada pelo investigador atual foi classificada como pesquisa com risco insignificante. O monitor do local de estudo designado monitorará a segurança dos participantes e a precisão dos procedimentos descritos no protocolo pela equipe de pesquisa, anualmente. O monitoramento será realizado em conformidade com as Boas Práticas Clínicas (GCP) para obter pesquisas de alta qualidade e garantir a segurança do paciente.

De acordo com a Lei de Pesquisa Médica Envolvendo Seres Humanos (WMO), o estudo será suspenso se a saúde ou a segurança dos participantes for comprometida. O Comitê de Ensino de Ética Médica credenciado (Comitês de Ética em Pesquisa Médica Unidos [MEC-U], Nieuwegein, Holanda) será notificado sem demora indevida após obter conhecimento desses eventos. Eventos adversos graves e adversos serão registrados. AECOPD hospitalizada não será considerada um evento adverso grave. Exacerbações e EADPOC hospitalizadas serão informadas anualmente ao MEC-U. Ciro estabeleceu protocolos para a gestão de AECOPD; esses protocolos também serão seguidos para os pacientes incluídos no estudo. AECOPD moderado é tratado no Ciro, o programa de reabilitação pulmonar será ajustado conforme necessário. Os pacientes com EADPOC grave que requerem internação hospitalar serão encaminhados para um hospital próximo.

A aprovação ética para o estudo foi concedida pelo MEC-U (NL71364.100.19). O estudo será conduzido de acordo com os princípios da Declaração de Helsinque (64ª Assembleia Geral da WMA, Fortaleza, Brasil, outubro de 2013 (17)) e de acordo com a OMM. O consentimento informado por escrito será obtido de todos os participantes antes da participação no estudo. Os resultados do estudo serão publicados em revistas científicas revisadas por pares e serão apresentados em conferências (inter)nacionais. Se desejar, os participantes serão informados sobre os resultados do estudo.