A COPD exacerbáció markerei (MARKED)

A MARKED vizsgálat egy feltáró, prospektív, egyközpontú, longitudinális, megfigyeléses vizsgálat, nyolc hetes követéssel. Az elsődleges cél annak feltárása, hogy a gyakran mért biomarkerek paneléből (tünetek, életjelek, tüdőfunkciós paraméterek és spontán köpet, orrgarat-tamponok, széklet- és vérminták) mely biomarkerek jelzik előre a COPD-s betegek exacerbációját és/vagy légúti fertőzését. Ezenkívül a másodlagos célok a következők:

I. A mikrobiális összetétel és a gazda-mikrobióm kölcsönhatások longitudinális változásainak vizsgálata stabil állapotban, AECOPD-ben és gyógyulás során.

II. az AECOPD heterogenitásának tanulmányozása ezen események átfogó klinikai, funkcionális, mikrobiális, proteomikai, transzkriptomikus, genetikai, metabolomikus, gyulladásos és biokémiai jellemzésével.

III. a légutak/bélrendszer mikrobiális elváltozásai és a vérben lévő gyulladásos biomarkerek közötti összefüggés meghatározása a longitudinális követés során.

IV. az AECOPD biomarkereinek longitudinális vizsgálata COPD-s betegek klinikailag releváns alcsoportjaiban (pl. jelenlegi versus volt dohányosok, magas vagy alacsony vér eozinofil, gyakori vs. ritka exacerbátorok).

V. átfogóan megvizsgálni, hogy a gazda-mikrobióm interakciók, biomarkerek és prediktív modellek azonosítják-e azokat a betegeket, akik légúti fertőzésük ellenére sem súlyosbodnak.

Ebben a vizsgálatban minden olyan AECOPD-t rögzítenek, amelyet a cirói orvos közepesnek vagy súlyosnak értékelt. A mérsékelt AECOPD-t a tünetek több mint 2 egymást követő napon át történő súlyosbodása határozza meg, ami szisztémás glükokortikoidokkal, antibiotikumokkal vagy mindkettővel történő kezeléshez vezet. A súlyos eseményeket a szisztémás glükokortikoidokkal, antibiotikumokkal vagy mindkettővel végzett kezelés mellett (fokozott) oxigénterápia, non-invazív lélegeztetés (NIV) vagy több mint 24 órán át tartó kórházi felvétel jellemzi.

Miközben az a cél, hogy legalább 50 AECOPD-ben szenvedő és legalább 50 AECOPD-ben nem szenvedő beteget vonjanak be, legfeljebb 150 egymást követő COPD-s elsődleges diagnózissal rendelkező beteget vesznek fel a Ciro-ban fekvőbeteg tüdőrehabilitációra. Bár a többváltozós regressziós modellezéshez és előrejelzési modellezési stratégiákhoz léteznek mintanagyság-szabályok, ez a tanulmány feltáró jellegű. Ezért a biomarkerek mennyisége meghaladja azt az ökölszabályt alkalmazva, amely szerint minden potenciális prediktív változó esetén 10 eseményt kell megfigyelni. A vizsgálat célja legalább 50 egyedi beteg bevonása, akiknél ≥1 AECOPD-t tapasztaltak, és legalább 50 AECOPD-ben nem szenvedő beteg, hogy pontos viszonyítási alapadatokat (pl. elegendő pontosság az átlag és a szórás [SD]) becsléséhez a feltáró biomarkerek esetében. A Ciroban végzett korábbi vizsgálatokból ismert, hogy a betegek körülbelül 42%-ánál legalább egy AECOPD alakul ki a felvétel során (16). Mivel az AECOPD előre nem látható és változó, ami jelen vizsgálat fontos indoka, a vizsgálatba várhatóan 100-150 beteg bevonása szükséges. A tanulmány célja nem egy többváltozós modell kidolgozása, hanem a biomarkerek és egy esemény előfordulása közötti összefüggések feltárása.

A kiindulási jellemzőket átlagként és SD-ként, vagy medián és interkvartilis tartományként (IQR) kell jelenteni a folytonos változók esetében, a kategorikus jellemzők esetében pedig számként és százalékként. Az első AECOPD-ig eltelt idő előrejelzőit a vizsgálati időszakban egy- és többváltozós Cox-arányos hazard regresszióval modellezik. Az asszociációkat a kockázati arány (HR) és a 95%-os konfidencia intervallum (CI) formájában mutatjuk be. A biomarkerek prediktív teljesítményének függőségét interakciós kifejezések segítségével teszteljük. A konkordancia-statisztika vagy c-statisztika becslése a megkülönböztető képesség felmérésére szolgál. Ezenkívül időfüggő AUC-vevő működési jellemzők (ROC) diagramok jönnek létre. A kalibrálást úgy értékelik, hogy összehasonlítják az előre jelzett valószínűséget az AECOPD megfigyelt valószínűségével, és megvizsgálják egy kalibrációs görbével és a kalibrációs meredekséggel, feltételezve, hogy a nyomon követés vége előtt nem történik adatcenzúra.

A mikrobiom jellemzését a baktérium taxonok alfa- és béta-diverzitása és relatív abundanciája határozza meg. Az alfa-diverzitást folytonos változóként kezeljük, és megfelelő statisztikai tesztekkel elemezzük, míg a béta-diverzitás távolságok ordinációját főkomponens-analízissel végezzük. Multiomikus elemzések segítségével hipotéziseket állítanak elő az AECOPD-be való előrehaladást elősegítő tényezőkről. A jellemzők kiválasztásához az összes ómikus differenciáldúsítási elemzést a többszörös hipotézis tesztelése után kell elvégezni egy robusztus modell segítségével, amely figyelembe veszi az eloszlási feltevéseket. A genetikai variánsok és az (AE)COPD, valamint a mikrobiális fertőzések közötti összefüggést teljes exome szekvenálási adatok felhasználásával vizsgálják.

Önszerveződő térképek (SOM-ok, más néven Kohonen térképek) a kiválasztott attribútumok rendezett ábrázolásának létrehozására szolgálnak az AECOPD idején a Viscovery Profiler 7.1 (Viscovery Software GmbH, Bécs, Ausztria) használatával. A SOM-modellben létrehozott azonosított homogén adatcsoportok alapján klaszterek jönnek létre a Viscovery SOM-Ward Cluster algoritmusával. A teljes minta és a klaszterek klinikai jellemzőinek összefoglaló változóit a mennyiségi változók átlagaként és SD-jeként, a diszkrét változók esetében pedig százalékként kell bemutatni. A csoportok közötti különbségeket integrált kétoldalú t-próbák segítségével értékeljük. Ismételt mérési korrelációkat használnak a légutakban/bélrendszerben előforduló mikrobiális elváltozások és a szisztémás gyulladásos biomarkerek közötti egyénen belüli összefüggés meghatározására a betegek között.

A prediktorokra vonatkozó adatok hiánya esetén a teljesen feltételes specifikációval rendelkező sztochasztikus regressziós imputációt használjuk az adatkészlet imputálására, hogy az összes bevont beteget felhasználhassák az elemzésekhez. Az értékek kiszámítása prediktív átlagillesztéssel történik. A statisztikai szignifikanciát p

A jelenlegi tanulmány elhanyagolható kockázatú kutatásnak minősül. A tanulmányban való részvétel nem jár komoly kockázatokkal. Vénás vérmintavétel következtében hematómák léphetnek fel. Az orrmintavétel során kellemetlen érzés tapasztalható az orrban. A betegek légszomjat és fáradtságot tapasztalhatnak a további napi mérések miatt (pl. kérdőívek, tüdőfunkció) és/vagy a gyakori mintavételezés és egyéb értékelések terhe miatt megtagadhatják a részvételt, vagy kihagyhatják a vizsgálatot. Kiterjedt iránymutatások születtek a tudományos kutatások strukturált és protokoll-alapú nyomon követésére a Cironál. Az NFU „Minőségbiztosítás az emberekkel kapcsolatos kutatásokhoz” című jelentésében a jelenlegi kutató által kezdeményezett kutatás elhanyagolható kockázatú kutatásnak minősült. A kijelölt vizsgálati helyszín monitora évente felügyeli a résztvevők biztonságát és a jegyzőkönyvben leírt eljárások pontosságát a kutatószemélyzet által. A monitorozást a helyes klinikai gyakorlat (GCP) betartásával végzik a magas színvonalú kutatás és a betegek biztonsága érdekében.

Az emberi alanyokat érintő orvosi kutatásokról szóló törvény (WMO) értelmében a vizsgálatot felfüggesztik, ha az alanyok egészsége vagy biztonsága veszélybe kerül. Az akkreditált Orvosetikai Oktatási Bizottságot (Medical Research Ethics Committees United [MEC-U], Nieuwegein, Hollandia) haladéktalanul értesítik, miután tudomást szereztek ezekről az eseményekről. A káros és súlyos nemkívánatos eseményeket rögzítik. A kórházi AECOPD nem tekinthető súlyos nemkívánatos eseménynek. Az exacerbációkat és a kórházi AECOPD-t évente jelenteni fogják a MEC-U-nak. Ciro protokollokat dolgozott ki az AECOPD kezelésére; ezeket a protokollokat a vizsgálatba bevont betegek esetében is követni fogják. A mérsékelt AECOPD-t a Ciro-ban kezelik, a tüdőrehabilitációs programot szükség szerint módosítják. A súlyos AECOPD-ben szenvedő, kórházi felvételt igénylő betegeket egy közeli kórházba irányítják.

A vizsgálat etikai jóváhagyását a MEC-U (NL71364.100.19) adta. A tanulmányt a Helsinki Nyilatkozat (64. WMA Közgyűlés, Fortaleza, Brazília, 2013. október (17)) elvei szerint és a WMO-val összhangban végzik el. A vizsgálatban való részvétel előtt minden résztvevőtől írásos beleegyezést kell kérni. A tanulmány eredményeit lektorált tudományos folyóiratokban teszik közzé, és (nemzetközi) konferenciákon mutatják be. Kívánság szerint a résztvevőket tájékoztatják a vizsgálat eredményeiről.