Sessão única de exercícios máximos e a resposta metabólica de jovens adultos fisicamente inativos (EASY-Study) (EASY)

Desenho: Este é um estudo quase experimental comparando pré e pós-intervenção. A questão de pesquisa investiga a influência das alterações do lactato sanguíneo influenciadas pelo exercício físico na concentração plasmática de FGF21 em pessoas fisicamente inativas. Este projeto conta com a aprovação do Comitê de Ética Científica do Serviço de Saúde de Valdivia (Ord. 222/2022) e possui certificação de Biossegurança pelo Comitê Institucional de Biossegurança da Universidade Austral do Chile (nº 36/23).

Amostra: Serão incluídas pessoas maiores de 18 anos (e até 30 anos) matriculadas no programa de Fisioterapia da Universidade Austral do Chile. Devem ser inativos fisicamente (realizar menos de 150 minutos/semana de atividade física moderada e/ou 75 minutos/semana de atividade física vigorosa) e sem contraindicações médicas para a realização de atividade física. Serão excluídas pessoas que estejam tomando medicamentos que influenciem nos níveis de glicemia ou insulina e/ou com efeitos anti-inflamatórios. O cálculo do tamanho da amostra foi realizado considerando os seguintes parâmetros: poder de 95%, valor alfa de 0,05, diferença nas médias pré e pós-intervenção do FGF21 de 50 pg/ml (100 vs 150 pg/ml), com um desvio padrão para ambos os grupos de 50 pg/ml. Com estes dados, o tamanho da amostra é de 16 participantes, e considerando uma desistência de 20%, o tamanho final é de 20 participantes, onde o recrutamento será por conveniência e mantendo a paridade de género.

Variáveis: No momento da entrada no estudo, serão registrados a idade, anos e sexo dos participantes. Variáveis ​​​​antropométricas como peso em quilogramas e altura em metros serão registradas em balança (InBody® 270) e barra de estatura (SECA), respectivamente. A partir dessas medidas, o índice de massa corporal (IMC) será calculado em quilogramas/metros. Para os cálculos da relação cintura-quadril (RCQ) e da relação cintura-estatura (RCQ), a circunferência da cintura será medida em centímetros tendo como ponto de referência a região do umbigo. A circunferência do quadril será medida como a maior circunferência obtida no nível femoral trocantérico. Os níveis de massa muscular e gordura total e segmentar serão medidos usando o medidor de bioimpedância InBody® 270. O nível de atividade física espontânea será medido por meio do Questionário Internacional de Atividade Física (IPAQ) em sua versão curta. Para induzir elevações no lactato sanguíneo, será aplicado um teste de carga incremental em cicloergômetro ou bicicleta ergométrica, no qual a carga de pedalada será aumentada em 30W a cada 3 minutos, partindo de uma carga inicial de 30W até atingir o ponto de fadiga. Antes de iniciar o teste, os participantes permanecerão sentados por 10 minutos, tempo durante o qual a frequência cardíaca, sensação subjetiva de esforço (SSE) com a escala de Borg modificada, pressão arterial, oximetria de pulso e músculo (vasto lateral do quadríceps) serão registrados em descansar. Além disso, será coletada amostra de sangue venoso em tubo de 2 ml com EDTA e outro tubo sem anticoagulante para posterior dosagem plasmática de FGF21 com kit ELISA específico para isso (catálogo RayBio® ELH-FGF21) e exames bioquímicos complementares (glicemia , insulinemia, colesterol total, triglicerídeos, HDL, LDL, VLDL, colesterol não HDL, transaminases (GOT e GPT), creatinina, ácido úrico, ureia e nitrogênio ureico). Além disso, a medição do lactato será realizada a partir de uma picada digital com lanceta estéril. Para isso, será utilizada uma tira reativa específica, que será medida com o aparelho AccuTrend Plus ®. Paralelamente, o participante será solicitado a trazer amostra de urina do mesmo dia com o estômago vazio para análise bioquímica (proteinúria, creatinúria, albuminúria, glicosúria). Depois que essas medições forem feitas em repouso, o teste de estresse incremental começará. Assim, em cicloergômetro, cada participante iniciará o teste com uma cadência de pedalada de 60-70 RPM a carga de 30W. A cada 3 minutos esta carga aumentará 30W, mantendo sempre a mesma cadência de pedalada. Durante a execução do teste, os participantes serão sempre supervisionados e orientados por um fisioterapeuta profissional. A frequência cardíaca, a oximetria de pulso e muscular e o SSE serão avaliados minuto a minuto, enquanto a pressão arterial será medida a cada 3 minutos. Ao final do teste serão registrados o tempo de execução do teste, a distância percorrida em metros, frequência cardíaca, pressão arterial, SSE e oximetria final de pulso e muscular. O percentual de reserva de frequência utilizado durante o teste será calculado pela fórmula de Karvonen, que depende das frequências cardíacas de repouso e pós-teste. A fadiga ao final do teste será entendida como o cumprimento de um ou mais dos seguintes critérios: utilização de frequência cardíaca de reserva ≥ 90%, sensação subjetiva de esforço ≥ 18/20 segundo a escala original de Borg, pressão arterial ≥ 200 /100 mg de Hg, desejo do participante em finalizar o teste (Figura 3).

Imediatamente após o exame, será coletada nova amostra de sangue venoso em um tubo de 2 ml de EDTA e outro tubo sem anticoagulante. Além disso, a concentração de lactato sanguíneo pós-exercício será medida por punção digital com tira reagente específica e com aparelho AccuTrend Plus ®. Além disso, será solicitada amostra de urina pós-exercício para análise bioquímica descrita anteriormente. Posteriormente, os sinais vitais do participante serão monitorados por 10 minutos após o teste para garantir a recuperação adequada.

Reitera-se que, como avaliação de potenciais variáveis ​​de confusão/intermediárias, os seguintes parâmetros bioquímicos serão medidos a partir de amostras de sangue coletadas pré e pós-exercício: Colesterol total, triglicerídeos, HDL, LDL, VLDL, colesterol não HDL, insulina , glicose e transaminases (GOT, GPT), creatinina, ácido úrico, uréia e nitrogênio ureico. Enquanto, para amostras de urina, serão avaliados os níveis de proteinúria, albuminúria, creatinúria e glicose.

Análise estatística

As variáveis ​​quantitativas serão expressas como mediana e intervalo interquartil, enquanto as variáveis ​​qualitativas serão descritas em termos de frequências absolutas. Para calcular possíveis diferenças entre os valores pré e pós-teste de estresse, particularmente lactato e FGF21, bem como os níveis de transaminases e marcadores de função renal, será utilizado o teste de Wilcoxon ou o teste t de Student para amostras relacionadas, dependendo de como a distribuição dos dados comporta (normal ou não paramétrico). Além disso, associações entre as concentrações de lactato e FGF21, tanto pré quanto pós-exercício, serão exploradas por meio do índice de correlação de Spearman e modelos de regressão bivariada. Além disso, outras potenciais associações de interesse serão exploradas utilizando o índice de correlação de Spearman. Para todas as análises, será considerado estatisticamente significativo valor de p igual ou inferior a 0,05, utilizando os softwares SPSS versão 20 e GraphPad versão 8.