ETASTs do Sangue Periférico para Prever a Eficácia da Quimioimunoterapia no CPCNP

O cancro do pulmão de não pequenas células (NSCLC) representa a maioria dos casos de cancro do pulmão a nível global. Embora os inibidores de checkpoint imunológico (ICIs), particularmente os inibidores de PD-1/PD-L1 combinados com quimioterapia à base de platina, tenham-se tornado a terapia de primeira linha padrão para NSCLC avançado, apenas um subconjunto de doentes alcança benefício clínico. Os biomarcadores atuais, incluindo a expressão de PD-L1 e a carga mutacional tumoral (TMB), têm precisão preditiva limitada, criando uma necessidade urgente de biomarcadores mais fiáveis.

Os linfócitos T específicos de antigénio tumoral (TASTs) são os efetores reais na terapia com ICIs, e a resposta bem-sucedida a ICIs depende da reativação destas células. No entanto, a deteção de linfócitos T específicos de antigénio tumoral circulantes (CTASTs) tem sido tecnicamente desafiadora devido à sua baixa frequência e heterogeneidade no sangue periférico.

Este estudo utiliza uma nova Tecnologia de Nanodetecção de Linfócitos T Específicos de Tumor Circulantes (CTT-NanoDT) desenvolvida pela equipa de investigação. A tecnologia emprega Nanopartículas Ativadoras de Linfócitos T Específicos de Antigénio Tumoral (TATAN) carregadas com componentes completos de células tumorais para ativar e quantificar especificamente os TASTs efetores (ETASTs) no sangue periférico.

Desenho do Estudo:

Este é um estudo de coorte observacional, prospetivo e unicêntrico, que recruta 80 doentes com NSCLC em estádio IIIB-IV a receber inibidor de PD-1 padrão mais quimioterapia à base de platina. Amostras de sangue periférico (5 mL) serão colhidas em dois momentos: linha de base (T0, até 1 dia antes do início do tratamento) e após a conclusão do ciclo 2 (T1, dia 21 do ciclo 2).

Protocolo de Deteção de ETAST:

1. Isolamento de PBMCs do sangue periférico utilizando centrifugação em gradiente de densidade de Ficoll
2. Co-incubação de PBMCs com nanopartículas TATAN (50 µg/mL) durante 48 horas a 37°C
3. Quantificação por citometria de fluxo dos ETASTs ativados, definidos como células duplamente positivas para CD3+CD8+IFN-γ+ e CD3+CD8+CD137+
4. Cálculo de ΔETAST: [(ETASTs-T1 - ETASTs-T0) / ETASTs-T0] × 100%

Desfecho Primário:

Sobrevivência livre de progressão (PFS), definida como o tempo desde o início do tratamento até à primeira progressão documentada da doença de acordo com RECIST 1.1 ou morte por qualquer causa, avaliada por comité de radiologia independente.

Desfechos Secundários:

1. Comparação do desempenho preditivo (área sob a curva ROC) entre ΔETASTs e biomarcadores tradicionais (PD-L1 TPS, TMB) utilizando o teste de DeLong
2. Taxa de resposta objetiva (ORR), sobrevivência global (OS), taxa de controlo da doença (DCR)
3. Eventos adversos relacionados com o tratamento classificados de acordo com CTCAE 5.0

Análise Estatística:

A regressão de riscos proporcionais de Cox avaliará a associação entre ΔETASTs e PFS. Os doentes serão estratificados pelo valor mediano de ΔETAST em grupos de alteração alta e baixa para comparações de sobrevivência utilizando curvas de Kaplan-Meier e testes de log-rank. O tamanho da amostra de 80 fornece 80% de poder para detetar HR=0,42 com α=0,05, considerando uma taxa de desistência de 15%.

O estudo visa estabelecer ΔETASTs como um biomarcador superior para prever a eficácia da quimioimunoterapia no NSCLC, potencialmente permitindo uma seleção precisa de doentes e melhorando os resultados do tratamento.