Омализумаб при неатопической астме

Основная цель исследования — получить доказательство того, что терапия омализумабом поддерживает функцию легких, контроль симптомов и качество жизни в группе неатопических астматиков средней/тяжелой степени, регулярная противоастматическая терапия которых унифицирована и снижена на 8 дней. недельный период после терапии омализумабом/плацебо, пока последняя терапия продолжается.

Вторичная цель состоит в том, чтобы увидеть, снижает ли омализумаб по сравнению с терапией плацебо воспаление бронхов и локальную продукцию IgE в слизистой оболочке бронхов у этой же группы астматиков.

Критерии клинического исхода

Группы, получавшие омализумаб и плацебо, будут сравниваться на предмет изменения следующих клинических результатов (для повторных измерений, таких как суточная пиковая скорость потока и симптомы, будут сравниваться средние значения за первые и последние 10 дней соответствующего периода исследования).

1. до снижения существующей противоастматической терапии (первые 12 недель исследования):

   • ОФВ1 до бронходилятатора (основной критерий исхода)
   • Утренняя и вечерняя пиковая скорость выдоха
   • Выдыхаемый оксид азота
   • Оценка симптомов в дневное и ночное время
   • Общие дозы спасительного бета2-агониста
   • Всего дней без симптомов
   • Подтвержденные показатели качества жизни при астме

2. на этапе снижения противоастматической терапии (последующие 8 недель исследования):

   • Первичной конечной мерой будет обострение заболевания, определяемое как потребность в пероральных кортикостероидных препаратах экстренной помощи при ухудшении симптомов и/или ухудшении функции легких, по согласованию между пациентом и врачом-исследователем.
   • Вторичные показатели исхода будут включать все параметры, перечисленные в разделе (а) выше, если только они не могут быть измерены из-за обострения заболевания (первичный показатель исхода).

Лабораторные показатели результатов

Они будут возникать в результате иммунологического, иммуногистохимического и молекулярного анализа биоптатов периферической крови и бронхов, взятых у всех пациентов в начале и в конце первых 12 недель исследования до снижения противоастматической терапии, и будут включать изменения в:

• Закладка коллагена типов I, III, IV и V и тенасцина
• Сосудистые структуры и ангиогенные стимулы (коллаген типа IV, CD31 и VEGF человека (29,30)
• Воспалительные клетки (эозинофилы, Т-клетки, В-клетки, плазматические клетки, макрофаги, нейтрофилы, тучные клетки)
• Бокаловидные клетки будут окрашиваться моноклональными антителами против Muc-5AC.
• Иммуноглобулин Е и его высоко- и низкоаффинные рецепторы будут окрашиваться с использованием специфических моноклональных антител, как и в наших предыдущих исследованиях. В-клетки (CD20+) и плазматические клетки (CD138+) будут исследованы на экспрессию свободных легких цепей каппа- и лямбда-IgE с использованием двойной последовательной ИГХ.

Анализ окрашивания: целые области окрашенных биопсийных срезов будут подвергаться анализу изображения с использованием системы Zeiss Vision KS300, позволяющей проводить объективный, беспристрастный цифровой анализ изображения с использованием мощного макроязыка.

Концентрации цитокинов и хемокинов в гомогенатах эндобронхиальной ткани: они будут измерены в гомогенатах двух биоптатов с помощью электрохемилюминесценции с использованием SECTOR Imager 6000 и наборов для анализа, произведенных Meso Scale Discovery. Базовый набор MS6000 Human TH1/TH2 10-Plex будет использоваться для измерения IFN-gamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12p70, IL-13, TNF- альфа. Базовый набор MS6000 Human Chemokine 9-Plex Base Kit будет использоваться для измерения эотаксина, эотаксина-3, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1beta, TARC.

Синтез IgE: позже две биоптата от каждого пациента будут быстро заморожены в РНК для последующего анализа экспрессии транскриптов круга переключения и мРНК зрелого IgE и зародышевой линии, как в нашей предыдущей недавней публикации, и клонирования генов С-эпсилон Н-цепи для поиска доказательств. клональной экспансии В-клеток, вызванной суперантигенами В-клеток. Будут две биопсии.

\гомогенизированный для выделения В-клеток для клонирования и анализа продукции IgE с помощью антигенного микрочипа.

Сыворотка: Хранящиеся образцы сыворотки, взятые во время бронхоскопии, будут проанализированы на наличие полного репертуара антиген-специфических IgE с использованием микрочипов и активности анти-Fc-эпсилон-RI с использованием анализа дегрануляции базофилов in vitro.