Omalizumab vid icke-atopisk astma

Det primära syftet med studien är att erhålla principbevis för att omalizumab-behandling upprätthåller lungfunktion, symtomkontroll och livskvalitet hos en grupp icke-atopiska, måttliga/svåra astmatiker vars regelbundna anti-astmabehandling är enhetlig och reducerad i 8 vecka efter omalizumab/placebobehandling medan den senare behandlingen fortsätter.

Ett sekundärt syfte är att se om omalizumab, jämfört med placebobehandling, minskar bronkial inflammation och lokal IgE-produktion i bronkial slemhinna hos samma grupp astmatiker.

Kliniska utfallsmått

De omalizumab- och placebobehandlade grupperna kommer att jämföras med avseende på förändringar i följande kliniska resultat (för upprepade mätningar såsom dagligt toppflöde och symtom kommer medelvärdena för de första och sista 10 dagarna av den relevanta studieperioden att jämföras).

1. före minskning av befintlig anti-astmabehandling (första 12 veckorna av studien):

   • Pre-bronkodilator FEV1 (primärt resultatmått)
   • Utandningsflöde på morgon och kväll
   • Utandad kväveoxid
   • Symtompoäng dag och natt
   • Totala doser av räddningsbeta2-agonist
   • Totalt symptomfria dagar
   • Validerad astma livskvalitetspoäng

2. under reduktionsfasen av anti-astmaterapi (efterföljande 8 veckors studie):

   • Det primära utfallsmåttet kommer att vara sjukdomsexacerbation, definierat som ett behov av räddnings oral kortikosteroidmedicin för försämring av symtom och/eller försämring av lungfunktionen, enligt överenskommelse mellan patienten och studieläkaren
   • Sekundära utfallsmått kommer att inkludera alla de mätningar som anges i avsnitt (a) ovan, såvida de inte kan mätas på grund av sjukdomsexacerbation (det primära utfallsmåttet)

Laboratorieresultatmått

Dessa kommer att uppstå från immunologisk, immunhistokemisk och molekylär analys av perifert blod och bronkialbiopsier tagna från alla patienter i början och slutet av de första 12 veckorna av studien före reduktion av anti-astmabehandling och kommer att bestå av förändringar i:

• Nedläggning av kollagen typ I, III, IV och V och tenascin
• Vaskulära strukturer och angiogena stimuli (kollagen typ IV, CD31 och human VEGF (29,30)
• Inflammatoriska celler (eosinofiler, T-celler, B-celler, plasmaceller, makrofager, neutrofiler, mastceller)
• Bägareceller kommer att färgas med monoklonal anti-Muc-5AC-antikropp
• Immunglobulin E och dess hög- och lågaffinitetsreceptorer kommer att färgas med specifika monoklonala antikroppar som i våra tidigare studier. B-celler (CD20+) och plasmaceller (CD138+) kommer att undersökas för uttryck av fria kappa och lambda IgE lätta kedjor med hjälp av dubbel, sekventiell IHC.

Färgningsanalys: Hela områden av färgade biopsisektioner kommer att utsättas för bildanalys med hjälp av ett Zeiss Vision KS300-system som tillåter objektiv, opartisk digital bildanalys med ett kraftfullt makrospråk.

Cytokin- och kemokinkoncentrationer i endobronkial vävnadshomogenat: Dessa kommer att mätas i homogenat av 2 biopsier genom elektrokemiluminescens med hjälp av SECTOR Imager 6000 och analyskit tillverkade av Meso Scale Discovery. MS6000 Human TH1/TH2 10-Plex Base Kit kommer att användas för att mäta IFN-gamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12p70, IL-13, TNF- alfa. MS6000 Human Chemokine 9-Plex Base Kit kommer att användas för att mäta Eotaxin, Eotaxin-3, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1beta, TARC.

IgE-syntes: Två biopsier från varje patient kommer att snabbfrysas i RNA senare för efterföljande analys av uttryck av switch-cirkel-transkript och IgE-moget och könslinje-mRNA som i vår tidigare senaste publikation och kloning av C-epsilon H-kedjegener för att leta efter bevis av klonal expansion av B-celler orsakad av B-cellssuperantigener. Två biopsier kommer att bli

\homogeniserad för extraktion av B-celler för kloning och analys av IgE-produktion med antigenmikroarray.

Serum: Förvarade serumprover tagna vid tidpunkten för bronkoskopi kommer att analyseras för fullständig antigenspecifik IgE-repertoar med hjälp av mikroarray och anti-Fc-epsilon-RI-aktivitet med användning av en in vitro basofila granuleringsanalys.