Omalizumab bei nicht-atopischem Asthma

Das primäre Ziel der Studie ist der prinzipielle Nachweis, dass die Omalizumab-Therapie die Lungenfunktion, Symptomkontrolle und Lebensqualität in einer Gruppe von nicht-atopischen, mittelschweren/schweren Asthmatikern erhält, deren regelmäßige Anti-Asthma-Therapie vereinheitlicht und auf 8 reduziert wird Woche nach der Omalizumab/Placebo-Therapie, während die letztgenannte Therapie fortgesetzt wird.

Ein sekundäres Ziel ist es zu sehen, ob Omalizumab im Vergleich zu einer Placebotherapie die Bronchialentzündung und die lokale IgE-Produktion in der Bronchialschleimhaut derselben Gruppe von Asthmatikern reduziert.

Klinische Ergebnismessungen

Die mit Omalizumab und Placebo behandelten Gruppen werden auf Änderungen der folgenden klinischen Ergebnisse verglichen (bei wiederholten Messungen wie täglichem Peak-Flow und Symptomen werden die Mittelwerte der ersten und letzten 10 Tage des relevanten Studienzeitraums verglichen).

1. vor Reduktion der bestehenden Anti-Asthma-Therapie (erste 12 Wochen der Studie):

   • FEV1 vor Bronchodilatation (primärer Endpunkt)
   • Exspiratorischer Spitzenfluss am Morgen und Abend
   • Ausgeatmetes Stickoxid
   • Tag- und Nachtzeit-Symptomwerte
   • Gesamtdosierungen des Rettungs-Beta2-Agonisten
   • Gesamtzahl symptomfreier Tage
   • Validierte Asthma-Quality-of-Life-Scores

2. während der Reduktionsphase der Anti-Asthma-Therapie (nachfolgende 8 Wochen der Studie):

   • Der primäre Endpunkt ist die Exazerbation der Krankheit, definiert als die Notwendigkeit einer oralen Notfallmedikation mit Kortikosteroiden zur Verschlechterung der Symptome und/oder Verschlechterung der Lungenfunktion, wie zwischen dem Patienten und dem Studienarzt vereinbart
   • Sekundäre Ergebnismessungen umfassen alle in Abschnitt (a) oben aufgeführten Messungen, es sei denn, sie können aufgrund einer Exazerbation der Krankheit nicht gemessen werden (die primäre Ergebnismessung).

Laborergebnismessungen

Diese ergeben sich aus der immunologischen, immunhistochemischen und molekularen Analyse von peripherem Blut und bronchialen Biopsien, die allen Patienten zu Beginn und am Ende der ersten 12 Wochen der Studie vor der Reduzierung der Anti-Asthma-Therapie entnommen wurden, und umfassen Veränderungen in:

• Ablagerung von Kollagen Typ I, III, IV und V und Tenascin
• Gefäßstrukturen und angiogene Stimuli (Kollagen Typ IV, CD31 und humanes VEGF (29,30)
• Entzündungszellen (Eosinophile, T-Zellen, B-Zellen, Plasmazellen, Makrophagen, Neutrophile, Mastzellen)
• Becherzellen werden mit monoklonalem Anti-Muc-5AC-Antikörper gefärbt
• Immunglobulin E und seine Rezeptoren mit hoher und niedriger Affinität werden wie in unseren früheren Studien mit spezifischen monoklonalen Antikörpern gefärbt. B-Zellen (CD20+) und Plasmazellen (CD138+) werden auf die Expression von freien Kappa- und Lambda-IgE-Leichtketten unter Verwendung von doppeltem, sequenziellem IHC untersucht.

Färbeanalyse: Ganze Bereiche gefärbter Biopsieschnitte werden einer Bildanalyse mit einem Zeiss Vision KS300-System unterzogen, das eine objektive, unvoreingenommene digitale Bildanalyse mit einer leistungsstarken Makrosprache ermöglicht.

Cytokin- und Chemokinkonzentrationen in Endobronchialgewebehomogenaten: Diese werden in Homogenaten von 2 Biopsien durch Elektrochemilumineszenz unter Verwendung des SECTOR Imager 6000 und von Meso Scale Discovery hergestellten Assay-Kits gemessen. Das MS6000 Human TH1/TH2 10-Plex Base Kit wird verwendet, um IFN-gamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12p70, IL-13, TNF- Alpha. Das MS6000 Human Chemokine 9-Plex Base Kit wird zur Messung von Eotaxin, Eotaxin-3, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1beta, TARC verwendet.

IgE-Synthese: Zwei Biopsien von jedem Patienten werden später in RNA schockgefroren, um anschließend die Expression von Switch-Circle-Transkripten und reifem IgE und Keimbahn-mRNA wie in unserer vorherigen jüngsten Veröffentlichung und dem Klonen von C-epsilon-H-Ketten-Genen zu analysieren, um nach Beweisen zu suchen der klonalen Expansion von B-Zellen, verursacht durch B-Zell-Superantigene. Zwei Biopsien werden sein

\homogenisiert für die Extraktion von B-Zellen zur Klonierung und Analyse der IgE-Produktion durch Antigen-Microarray.

Serum: Gelagerte Serumproben, die zum Zeitpunkt der Bronchoskopie entnommen wurden, werden auf das vollständige Antigen-spezifische IgE-Repertoire mit Microarray und die Anti-Fc-Epsilon-RI-Aktivität mit einem In-vitro-Basophilen-Degranulationsassay analysiert.