Сердечные биомаркеры и статус железа у пациентов, находящихся на гемодиализе

Исследуемая популяция и источник данных

Это перекрестное, одноцентровое исследование, которое будет проводиться в Диализном центре больницы Tungs' Taichung MetroHarbour (TTMHH) в прибрежном районе центрального Тайваня. Будет включена когорта из 500 пациентов в возрасте 20 лет и старше, которые находились на ГД не менее 3 месяцев до включения в исследование. Медицинские карты этих пациентов просматриваются для определения приемлемости, они должны быть совместимы с критериями включения/исключения и включены в наш анализ. Исследование проводилось с соблюдением этических норм в соответствии с Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации. Субъекты предоставили письменное информированное согласие, и Местный комитет по этике одобрил исследование.

Будут собраны исходные данные, такие как демографические данные, сопутствующие заболевания, антропометрические данные и соответствующие лабораторные данные, клинический диагноз сердечной недостаточности на основе кардиоэхокардиографических измерений и история лечения. Ни один из пациентов не получал переливание крови или внутривенную терапию препаратами железа в течение двух недель до момента включения. Доплеровская эхокардиография с использованием стандартизированного оборудования и в соответствии с рекомендациями Американского общества эхокардиографии (2009 г.)[20]. Для измерения ФВ левого желудочка (ЛЖ) использовали биплоскостной метод дисков. Пациенты имели право на участие в исследовании, если они имели функциональный класс II-IV по классификации New York Heart Association (NYHA); HFnEF и ФВ левого желудочка (LVEF) ≤40%. Характеристики пациентов, которые будут исключены из нашего исследования, включали (1) декомпенсированный цирроз печени, (2) неопластические заболевания, (3) неполные данные, (4) получающие гемодиализ <3 месяцев и активную инфекцию.

Статус железа и другие лабораторные измерения

Кровь брали с антикоагулянтом ЭДТА утром после ночного голодания не менее чем за 12 часов до сеанса диализа. Образцы отделяли центрифугированием (3000 об/мин, 10 мин) и сразу же хранили при -80°С для последующих анализов. Глюкоза, холестерин липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), триглицериды и общий холестерин измеряются стандартными анализами с использованием анализатора. Холестерин липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) измеряется стандартным анализом. Высокочувствительный С-реактивный белок (hsCRP) измеряют с помощью стандартной нефелометрии. Уровень hs-cTnT в сыворотке измеряли с использованием метода сэндвич-иммуноанализа, нового высокочувствительного анализа с нижним измеримым пределом 3 нг/л.

Дефицит железа определялся с использованием критериев Инициативы по качеству исходов заболеваний почек: ферритин < 100 нг/мл или насыщение трансферрина (TSAT) < 20%, когда ферритин < 800 нг/мл.[21] Железо в сыворотке измеряли с помощью спектрофотометрии; Сывороточный ферритин и трансферрин измеряли с помощью иммунотурбидиметрии. TSAT оценивали по формуле: TSAT сывороточное железо (мкг/дл)/[трансферрин сыворотки (мг/дл) × 1,25].[22] Дополнительными показателями статуса железа были: растворимый в сыворотке рецептор трансферрина (sTfR) (измеренный с помощью иммуноферментного анализа) [23-24] и индекс ферритина. Индекс ферритина был предложен в качестве полезного инструмента для диагностики состояний ДЖ, когда соотношение > 2 указывает на ДЖ. Индекс ферритина рассчитывается путем деления sTfR (выраженного в нмоль/л или мг/л) на log10 ферритина (измеряется в нг/мл) и, таким образом, увеличивается всякий раз, когда sTfR повышается или ферритин снижается.[25] Гепсидин представляет собой пептид из 25 аминокислот, который вырабатывается в основном печенью, секретируется в плазму и выводится с мочой. Это основной регулятор системного гомеостаза железа, который ограничивает всасывание железа в кишечнике и высвобождение железа из макрофагов [26]. Гепсидин в сыворотке анализировали с использованием набора ELISA для гепсидина (Human Hepc25), метода сэндвич-ELISA.

Измерение биомаркеров

Концентрации GDF15 определяют методом количественного сэндвич-иммуноферментного анализа (Quantikine®; R&D Systems, Inc., Миннеаполис, Миннесота, США). Образцы контроля качества (QC) от R&D Systems, которые имели общий коэффициент вариации (CV) 6,3% при низких концентрациях (159 нг/л), 9,7% при средних концентрациях (436 нг/л) и 15,1% при высоких концентрациях. концентрации (827 нг/л) были включены в каждый анализ, и результаты были приняты, когда КК находились в пределах концентрации, указанной производителем для конкретной партии. Общий диапазон обнаружения GDF15 составил 308-13790 нг/л. Концентрацию Gal-3 в плазме анализировали в двух повторностях с помощью имеющегося в продаже набора ELISA (Norcross, GA или BG Medicine, Inc., Уолтем, Массачусетс, США). Уровни растворимого ST2 оценивали в исходных образцах с использованием высокочувствительного сэндвич-моноклонального иммуноанализа (Presage® ST2 Assay, Critical Diagnostics, New York, NY) с нижним пределом обнаружения 2 нг/мл, верхним пределом обнаружения 200 нг. /мл, коэффициент вариации внутри анализа <2,5% и коэффициент вариации между анализами <4,6%15. H-FABP в сыворотке измеряли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (Hycult Biotech, Уден, Нидерланды). Концентрации hsTnT измеряли с помощью электрохемилюминесцентного иммуноанализа с использованием высокочувствительных анализов тропонина Т на анализаторе Cobas (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germany или Abott). Сывороточный NT-pro-BNP анализировали с использованием коммерческого набора NT-proBNP ELISA. Обнаружение NT-proBNP колебалось от 12 нг/л до 35 000 нг/л, а hsTnT — от 3 нг/л до 1172 нг/л. Все анализы проводились в двух экземплярах техническими специалистами, которые не знали всех клинических данных.