Biomarcadores cardíacos e status de ferro em pacientes em hemodiálise

População do estudo e fonte de dados

Este é um estudo transversal de centro único que será conduzido no Centro de Diálise do Hospital Tungs' Taichung MetroHarbor (TTMHH) na região costeira do centro de Taiwan. Será incluída uma coorte de 500 pacientes com 20 anos ou mais, que estiveram em HD por pelo menos 3 meses antes da inscrição. Os prontuários desses pacientes são revisados ​​para identificação da elegibilidade, devendo ser compatíveis com os critérios de inclusão/exclusão e inscritos em nossa análise. A pesquisa foi conduzida de forma ética de acordo com a Declaração de Helsinque da Associação Médica Mundial. Os indivíduos forneceram consentimento informado por escrito e o Comitê de Ética Local aprovou o estudo.

Os dados iniciais, como dados demográficos, comorbidades, antropometria e dados laboratoriais relevantes, diagnóstico clínico de insuficiência auditiva com base em medidas de ecocardiografia cardíaca e histórico de medicamentos serão coletados. Nenhum dos pacientes estava recebendo transfusões de sangue ou terapia com ferro intravenoso nas duas semanas anteriores ao momento da inclusão. Ecodopplercardiografia com equipamentos padronizados e seguindo as recomendações da American Society of Echocardiography (2009)[20]. O método biplano dos discos foi usado para medir a FE do ventrículo esquerdo (VE). Os pacientes eram elegíveis para o estudo se tivessem classe funcional II-IV da New York Heart Association (NYHA); ICFEr e FE do ventrículo esquerdo (FEVE)≤40%. As características dos pacientes que serão excluídas de nosso estudo foram (1) cirrose descompensada, (2) doenças neoplásicas, (3) dados incompletos, (4) recebendo hemodiálise < 3 meses e infecção ativa.

Status de Ferro e Outras Medições Laboratoriais

O sangue foi coletado com anticoagulante EDTA pela manhã após um jejum noturno de pelo menos 12 horas antes de uma sessão de diálise. As amostras foram separadas por centrifugação (3000 rpm, 10 min) e imediatamente armazenadas a -80°C para ensaios subsequentes. Glicose, colesterol de lipoproteína de alta densidade HDL), triglicerídeos e colesterol total são todos medidos por ensaios padrão usando o analisador. O colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL) é medido por ensaio padrão. Proteína C-reativa de alta sensibilidade (hsCRP) e são medidos usando nefelometria padrão. A hs-cTnT sérica foi medida usando um método de imunoensaio em sanduíche, um novo ensaio altamente sensível com um limite mensurável inferior de 3 ng/L.

A deficiência de ferro foi definida usando os critérios das diretrizes da Kidney Disease Outcomes Quality Initiative: ferritina <100 ng/mL ou saturação de transferrina (TSAT) <20% quando a ferritina é <800 ng/mL.[21] O ferro sérico foi medido por espectrofotometria; ferritina sérica e transferrina foram medidos usando imunoturbidimetria. O TSAT foi estimado usando a fórmula: TSAT ferro sérico (μg/dL)/[transferrina sérica (mg/dL)×1,25].[22] Medidas adicionais de status de ferro foram: receptor de transferrina solúvel no soro (sTfR) (medido usando um imunoensaio enzimático) [23-24] e índice de ferritina. O índice de ferritina tem sido proposto como uma ferramenta útil no diagnóstico de estados de DI, onde razões > 2 sugerem DI. O índice de ferritina é calculado dividindo-se o sTfR (expresso em nmol/L ou mg/L) por log10 de ferritina (medido em ng/mL) e, portanto, aumenta sempre que o sTfR aumenta e/ou a ferritina diminui.[25] A hepcidina é um peptídeo de 25 aminoácidos produzido principalmente pelo fígado, secretado no plasma e excretado na urina. É o principal regulador da homeostase sistêmica do ferro, que restringe a absorção intestinal de ferro e a liberação de ferro dos macrófagos [26]. A hepcidina sérica foi analisada usando um kit ELISA de hepcidina (Human Hepc25), uma técnica de ELISA em sanduíche.

Medição de biomarcadores

As concentrações de GDF15 são determinadas por uma técnica quantitativa de imunoensaio enzimático em sanduíche (Quantikine®; R&D Systems, Inc. Minneapolis, MN, EUA). Amostras de controle de qualidade (QC) da R&D Systems, que tiveram um coeficiente total de variação (CV) de 6,3% em baixas concentrações (159 ng/L), 9,7% em concentrações médias (436 ng/L) e 15,1% em altas concentrações (827 ng/L) foram incluídas em cada ensaio e os resultados foram aceitos quando os QCs caíram dentro da concentração específica do lote especificada pelo fabricante. A faixa geral de detecção de GDF15 foi de 308-13790 ng/L. A concentração de Gal-3 no plasma foi analisada em duplicata por um kit ELISA disponível comercialmente (Norcross, GA ou BG Medicine, Inc., Waltham, Mass., EUA). Os níveis de ST2 solúvel foram avaliados em amostras basais usando um imunoensaio monoclonal sanduíche altamente sensível (Presage® ST2 Assay, Critical Diagnostics, Nova York, NY), com um limite inferior de detecção de 2 ng/mL, um limite superior de detecção de 200 ng /mL, coeficiente de variação intraensaio <2,5% e coeficiente de variação interensaio <4,6%15. O soro H-FABP foi medido por um ensaio imunossorvente ligado a enzima (Hycult Biotech, Uden, Holanda). As concentrações de hsTnT foram medidas por imunoensaio de eletroquimioluminescência usando os ensaios de alta sensibilidade da troponina T, em um analisador Cobas (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Alemanha ou Abott ). O soro NT-pro-BNP foi analisado usando um kit comercial de NT-proBNP ELISA. A detecção de NT-proBNP variou de 12 ng/L a 35.000 ng/L e hsTnT variou de 3 ng/L a 1172 ng/L. Todos os ensaios foram realizados em duplicata por técnicos que desconheciam todos os dados clínicos.