Уровни Чемерина, Фетуина-А, IL-34 и IL-13 у пациентов с диабетическим пародонтитом

Диабет 2 типа (СД2) увеличивает риск тяжелого заболевания пародонта в три раза, что делает его фактором риска прогрессирования пародонтита. Пародонтит выступает как очаг местной инфекции и источник вялотекущего хронического воспаления. Пародонтальная терапия в первую очередь нацелена на микробный компонент заболевания путем механической обработки поверхностей зубов.

Чемерин, адипокин, специфичный для жировой ткани, влияет на путь глюкозы, липидный обмен, уровень воспаления, хемотаксис незрелых дендритных клеток и интеграцию макрофагально-фагоцитарной активности с белками внеклеточного матрикса и молекулами адгезии. Фетуин-А блокирует тирозинкиназу инсулинового рецептора, что связано с резистентностью к инсулину, метаболическим синдромом и повышенным риском развития сахарного диабета 2 типа. Интерлейкин (IL)-34 модулирует дифференцировку, пролиферацию и выживаемость миелоидных клеток. В зависимости от микроокружения IL-34 может трансформировать циркулирующие моноциты в специфические нерезидентные макрофаги с «провоспалительным» фенотипом М1 или «противовоспалительным» фенотипом М2. IL-13 ингибирует высвобождение воспалительных цитокинов, таких как IL-1, IL-6 и TNF-α, из моноцитов и макрофагов.

Это исследование является первым контролируемым клиническим исследованием, в котором изучаются уровни хемерина, фетуина-А, IL-34 и IL-13 в слюне и сыворотке крови при пародонтите с СД2 и без него (хорошо контролируемый и плохо контролируемый СД2) и оценивается эффективность Ситуация до и после лечения. Первая гипотеза этого исследования заключается в том, что в группах с пародонтитом уровни хемерина и IL-34 будут высокими в слюне и сыворотке, а уровни IL-13 и фетуина-А будут низкими в отличие от групп без пародонтита. Вторая гипотеза этого исследования заключается в том, что в группах с СД2 уровни фетуина-А и хемерина будут высокими по сравнению с участниками без СД2. Третья гипотеза этого исследования: после пародонтологического лечения уровни хемеина и IL-34 снизятся, а IL-13 и фетуина-А повысятся в слюне и сыворотке. Основываясь на этих гипотезах, исследование направлено на сравнение уровней хемерина, фетуина-А, IL-34 и IL-13 в слюне и сыворотке крови пациентов с непериодонтитом (NP), NP с СД2 (DM.NP), пародонтитом (P). ), P с хорошо контролируемым СД2 (WDM.P) и P с плохо контролируемым СД2 (PDM.P), а также для оценки эффекта пародонтологического лечения.

Всего в это исследование было включено 110 участников: 22 NP, 22 DM.NP, 22 P, 22 WDM.P и 22 PDM.P. Клиническое пародонтологическое обследование всего рта включало измерение глубины зондирования (PPD), уровня клинического прикрепления (CAL), наличия кровотечения при зондировании (BOP), десневого индекса (GI) и индекса зубного налета (PI) в 6 участках на зуб, за исключением третьи моляры. Наличие и тип потери альвеолярной кости оценивались на цифровой панорамной рентгенограмме у каждого участника, которая при необходимости дополнялась периапикальными рентгенограммами.

Статус пародонта каждого пациента оценивался одним калиброванным пародонтологом с помощью ручного датчика. Диагноз пародонтита или здоровья пародонта был установлен в соответствии с данными Всемирного семинара по классификации заболеваний и состояний пародонта и периимплантатов 2017 года. У лиц с НП (здоровых и больных гингивитом) (n=22) в контрольной группе не было участков с ПД >3 мм и КАЛ >2 мм, а также не было рентгенологических признаков потери альвеолярной кости. В группе NP также не было выявлено пародонтита в анамнезе. У пациентов с пародонтитом III/IV стадии имелось как минимум три зуба, кроме первых моляров и резцов, с CAL ≥5 мм и PD ≥6 мм. Рентгенологическая потеря костной массы, распространяющаяся от корональной части до средней трети или дальше. % потери костной массы/возраст был выше 1,0.

Диагностика пациентов с СД2 основывалась на критериях Всемирной организации здравоохранения. В исследование были включены как хорошо контролируемые, так и плохо контролируемые пациенты с диабетом, у которых по крайней мере один год назад был диагностирован СД2 и лечились пероральными противодиабетическими препаратами и/или инсулином, без серьезных диабетических осложнений (ретинопатии, нефропатии, нейропатии).

Уход

Набранные пациенты с пародонтитом прошли традиционное квадрантное масштабирование и планирование корня (SRP) под местной анестезией в общей сложности 4 сеанса в течение четырех недель. SRP выполнялся тем же пародонтологом с использованием ультразвуковых вставок и ручных пародонтальных кюрет. Повторные оценки проводились через 1 и 3 месяца после завершения SRP. Никакого пародонтологического вмешательства не проводилось в контрольной группе без пародонтита.

Отбор проб слюны и сыворотки. Между 9:00 и 10:00 утра методом пассивного слюноотделения было собрано в общей сложности 5 мл нестимулированной цельной слюны. Участникам посоветовали избегать употребления пищи в течение трех часов перед сбором образцов. Участники сидели вертикально, и в течение 5 минут собирали слюну с инструкциями собрать слюну на дне рта и пассивно слить ее в стерильный стеклянный стакан. Затем образцы слюны немедленно переносят в полипропиленовую пробирку объемом 2 мл и хранят при -80°C. Из локтевой ямки методом венепункции было собрано 10,5 мл крови. Сыворотку из крови выделяли центрифугированием при 4000 об/мин в течение 12 минут с последующим быстрым переносом ее в стерильную полипропиленовую пробирку и хранением при -80°С.

Биомаркерный иммуноанализ. Образцы слюны и сыворотки оттаивали на льду. Образцы слюны центрифугировали при 5000 об/мин в течение 15 минут при комнатной температуре и супернатанты сразу же использовали для анализов. Используя коммерческие наборы, образцы сыворотки и слюны хемерина, фетуина-А, IL-34 и IL-13 измеряли с помощью ELISA.

Статистический анализ Для определения распределения клинических и биохимических данных применялся критерий нормальности Шапиро Уилка. Непараметрические тесты использовались, поскольку переменные не подчинялись нормальному распределению. Гендерное распределение между группами анализировалось с использованием критерия хи-квадрат. Множественные сравнения клинических и биохимических параметров анализировали с использованием шкалы Крускала-Уоллиса; если значимость имела место, для парных сравнений применялся U-критерий Манна-Уитни с поправкой Бонферрони. Внутригрупповые сравнения проводили с использованием знаково-рангового критерия Уилкоксона. Корреляции между клиническими и биохимическими параметрами на исходном уровне определяли с использованием рангового корреляционного анализа Спирмена. Полиномиальную логистическую регрессию использовали для определения связи между группами пародонтита и биохимическими параметрами. Уровень значимости был установлен на уровне P <0,05.