Chemerin-, Fetuin-A-, IL-34- ja IL-13-tasot diabeettisilla parodontiittipotilailla

Tyypin 2 diabetes (T2DM) lisää vakavan parodontiitin riskiä kolme kertaa, mikä tekee siitä riskitekijän parodontiitin etenemiselle. Parodontiitti toimii paikallisen infektion keskuksena ja matala-asteisen kroonisen tulehduksen lähteenä. Parodontaalihoito kohdistuu ensisijaisesti sairauden mikrobikomponenttiin poistamalla mekaanisesti hampaiden pinnat.

Chemerin, rasvakudosspesifinen adipokiini, vaikuttaa glukoosireitiin, lipidiaineenvaihduntaan, tulehdustasoihin, kypsymättömien dendriittisolujen kemotaksiin ja makrofagi-fagosyyttisen aktiivisuuden integroitumiseen solunulkoisiin matriksiproteiineihin ja adheesiomolekyyleihin. Fetuiini-A estää insuliinireseptorin tyrosiinikinaasia, mikä liittyy insuliiniresistenssiin, metaboliseen oireyhtymään ja lisääntyneeseen tyypin 2 diabeteksen riskiin. Interleukiini (IL)-34 moduloi myeloidisolujen erilaistumista, lisääntymistä ja eloonjäämistä. Mikroympäristöstä riippuen IL-34 voi muuttaa kiertävät monosyytit spesifisiksi ei-residentiksi makrofageiksi, joilla on "tulehdusta edistävä" M1-fenotyyppi tai "anti-inflammatorinen" M2-fenotyyppi. IL-13 estää tulehduksellisten sytokiinien, kuten IL-1:n, IL-6:n ja TNF-a:n, vapautumisen monosyyteistä ja makrofageista.

Tämä tutkimus on ensimmäinen kontrolloitu kliininen tutkimus, jossa tutkitaan kemeriinin, fetuiini-A:n, IL-34:n ja IL-13:n pitoisuuksia syljessä ja seerumissa periodontiitissa T2DM:n kanssa ja ilman sitä (hyvin kontrolloitu ja huonosti kontrolloitu T2DM) ja arvioidaan tilanne ennen ja jälkeen hoidon. Tämän tutkimuksen ensimmäinen hypoteesi on, että parodontiittiryhmissä kemeriini- ja IL-34-tasot ovat korkeat syljessä ja seerumissa ja IL-13- ja fetuiini-A-tasot ovat alhaiset toisin kuin ei-parodontiittiryhmissä. Tämän tutkimuksen toinen hypoteesi on, että T2DM-ryhmissä fetuiini-A- ja chemerin-tasot ovat korkeat verrattuna osallistujiin, joilla ei ole T2DM:ää. Tämän tutkimuksen kolmas hypoteesi, parodontaalihoidon jälkeen kemeiinin ja IL-34:n tasot laskevat ja IL-13:n ja fetuiini-A:n määrä lisääntyy syljessä ja seerumissa. Näihin hypoteeseihin perustuen tutkimuksessa pyritään vertailemaan kemeriinin, fetuiini-A:n, IL-34:n ja IL-13:n tasoja ei-parodontiittikontrollien (NP), NP:n ja T2DM:n (DM.NP) ja parodontiittien (P) syljessä ja seerumissa. ), P hyvin kontrolloidun T2DM:n (WDM.P) kanssa ja P huonosti kontrolloidun T2DM:n (PDM.P) kanssa sekä parodontaalihoidon vaikutuksen arvioimiseksi.

Tähän tutkimukseen osallistui yhteensä 110 osallistujaa, 22 NP, 22 DM.NP, 22 P, 22 WDM.P ja 22 PDM.P. Koko suun kliiniseen parodontaalitutkimukseen sisältyi koetussyvyyden (PPD), kliinisen kiinnittymisen tason (CAL), verenvuodon esiintymisen koetuksella (BOP), ienindeksin (GI) ja plakkiindeksin (PI) mittaamisen 6 kohdasta hammasta kohti, paitsi kolmannet poskihampaat. Alveolaarisen luukadon esiintyminen ja tyyppi arvioitiin kullakin osallistujalla digitaalisella panoraamaröntgenkuvalla, jota täydennettiin tarvittaessa periapikaalisilla röntgenkuvilla.

Jokaisen potilaan parodontaalin tilan arvioi yksi kalibroitu parodontologi manuaalisella anturilla. Parodontiitti- tai parodontaalisen terveyden diagnoosi määritettiin vuonna 2017 järjestetyn World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions mukaisesti. NP-yksilöillä (terveillä ja ientulehdus) (n=22) kontrolliryhmässä ei ollut kohtia, joissa PD >3 mm ja CAL >2 mm, eikä röntgenkuvaa alveolaarisesta luukadosta. NP-ryhmällä ei myöskään esiintynyt parodontiittia. Parodontiittivaiheen III/IV potilailla oli vähintään kolme hammasta ensimmäisten poskihampaiden ja etuhampaiden välissä, CAL ≥5 mm ja PD ≥6 mm. Radiologinen luukado, joka ulottuu koronaalisesta keskikolmanteen tai sen yli. Luuston menetys %/ikä oli yli 1,0.

T2DM-potilaiden diagnoosi perustui Maailman terveysjärjestön antamiin kriteereihin. Sekä hyvin hallinnassa että huonosti hallinnassa olevat diabeetikot, joilla diagnosoitiin vähintään vuosi sitten T2DM ja joita hoidettiin suun kautta otetuilla diabeteslääkkeillä ja/tai insuliinilla, ei ollut merkittäviä diabeettisia komplikaatioita (retinopatia, nefropatia, neuropatia).

Hoito

Rekrytoidut parodontiittipotilaat saivat tavanomaisen kvadrantin skaalaus- ja juurisuunnittelun (SRP) paikallispuudutuksessa yhteensä 4 kertaa neljässä viikossa. Sama parodontologi suoritti SRP:n ultraääni-inserteillä ja manuaalisilla parodontaalikyreteillä. Uudelleenarvioinnit suoritettiin 1 ja 3 kuukauden kuluttua SRP:n valmistumisesta. Ei-parodontiittikontrollissa ei tehty parodontaalista interventiota.

Syljen ja seerumin näytteenotto Yhteensä 5 ml stimuloimatonta kokonaista sylkeä kerättiin passiivisella kuolaamismenetelmällä klo 9.00-10.00. Osallistujia kehotettiin välttämään ruoan syömistä kolmen tunnin ajan ennen näytteenottoa. Osallistujat istuivat pystyasennossa, ja sylkeä kerättiin 5 minuutin aikana ohjeiden kera sylki suun pohjalle ja kuolata se passiivisesti steriiliin dekantterilasiin. Sitten sylkinäytteet siirretään välittömästi 2 ml:n polypropeeniputkeen ja säilytetään -80 °C:ssa. Antecubitaalisesta kuopasta otettiin venepunktiomenetelmällä yhteensä 10,5 ml verta. Seerumi eristettiin verestä sentrifugoimalla nopeudella 4000 rpm 12 minuuttia, minkä jälkeen se siirrettiin nopeasti steriiliin polypropeeniputkeen ja säilytettiin -80 °C:ssa.

Biomarkkeri-immunoanalyysit Sylki- ja seeruminäytteet sulatettiin jäillä. Sylkinäytteet sentrifugoitiin nopeudella 5 000 rpm 15 minuuttia huoneenlämpötilassa, ja supernatantit käytettiin välittömästi määrityksiin. Kaupallisia tarvikkeita käyttämällä mitattiin ELISA:lla kemeriinin, fetuiini-A:n, IL-34:n ja IL-13:n seerumi- ja sylkinäytteet.

Tilastollinen analyysi Kliinisen ja biokemiallisen datajakauman määrittämiseen käytettiin Shapiro Wilkin normaaliteettitestiä. Ei-parametrisia testejä käytettiin, koska muuttujat eivät noudattaneet normaalijakaumaa. Sukupuolijakaumat ryhmien välillä analysoitiin Chi-Square-testillä. Useita kliinisten ja biokemiallisten parametrien vertailuja analysoitiin käyttämällä Kruskal-Wallisia; jos merkitsevyyttä esiintyi, Bonferroni-korjattua Mann-Whitney U -testiä sovellettiin parivertailuihin. Ryhmän sisäiset vertailut suoritettiin käyttämällä Wilcoxon signed-rank -testiä. Kliinisten ja biokemiallisten parametrien väliset korrelaatiot lähtötilanteessa suoritettiin käyttämällä Spearmanin rankkorrelaatioanalyysiä. Multinomiaalista logistista regressiota käytettiin määrittämään parodontiittiryhmien ja biokemiallisten parametrien väliset yhteydet. Merkitystasoksi asetettiin P < 0,05.