Vanadin vid sen-debut Preeklampsi (Vanadium PE)

Denna observationella fallkontrollstudie genomfördes vid avdelningen för obstetrik och gynekologi, Cengiz Gokcek Public Hospital, Gaziantep, Turkiet, mellan mars 2018 och juni 2019. Protokollet godkändes av Etikkommittén för klinisk forskning vid Gaziantep University (referensnummer: 2019/36). Studien följde strikt principerna i Helsingforsdeklarationen. Alla försökspersoner som ingick i studien gav muntligt och skriftligt informerat samtycke. Nittiotvå kvinnor deltog i studien i två grupper.

Datainsamling och studieintervention:

Diagnosen L-PrE, enligt definitionen av terminologikommittén vid American College of Obstetricians and Gynecologists (ACOG), fastställs baserat på närvaron av proteinuri (urinutsöndring av protein ≥300 mg i ett 24-timmars urinprov, eller proteinüria ≥1+ i oljesticka) och en blodtrycksnivå på ≥90/140 mmHg (två blodtrycksmätningar med 6 timmars mellanrum) som inträffar efter 34 veckors graviditet hos en tidigare normotensiv kvinna. Det diastoliska och/eller systoliska blodtrycket <110/160 mm Hg, det accepterades som mildt; och om dessa värden översteg denna nivå, accepterades det som allvarligt. Alla kvinnor i studiepopulationen genomgick obstetrisk ultraljudsundersökning och foster-modern bedömning utfördes av en av författarna. Den obstetriska anamnesen erhölls från alla försökspersoner. Dempogratiska data som ålder, graviditet, paritet, body mass index (BMI) och graviditetsålder registrerades. Graviditetsåldern bestämdes genom beräkning från den senaste menstruationen och stöddes av ultraljudsmätningarna vid graviditetens första trimester. Moderns venösa plasmaprover togs för mätning av kadmium-, bly- och vanadinnivåer efter diagnosen L-PrE på poliklinik. Dessa prover centrifugerades snabbt vid 1 500 g under 10 minuter, plasmaprover separerades och lagrades vid -80 C fram till mätningsdagen. Alla patienter med L-PrE lades också in på sjukhus och deras graviditeter avbröts. Proverna från kontrollgrupperna erhölls under den rutinmässiga obstetriska vårdundersökningen under graviditetens tredje trimester. Sedan följdes dessa gravida kvinnor upp fram till förlossningen. Båda grupperna jämfördes med avseende på moderns ålder, BMI, graviditetsvecka, gravida, paritet, levande födda, systoliskt/diastoliskt blodtryck, totalt protein i punkturinprov, hemoglobin, hematokrit, antal blodplättar, antal vita blodkroppar, urea, urinsyra, albumin, blodureakväve, kreatinin, leverfunktionstester (AST, ALT), mjölksyradehydrogenas, kadmium, bly och vanadinkoncentrationer och spädbarnsvikt vid förlossningen. Liten för gestationsålder (SGA) nyfödd definierades som födelsevikt <10:e percentilen för graviditetsålder med Turkiets nationella nomogram som referens för fostertillväxt. Proverna överfördes i lådor i isformar till Yozgat Bozok University Science and Technology Application and Research Center (Occupational and Environmental Toxicology Laboratory) för mätning av tungmetaller och spårämnen. Frekvensen av skaldjurskonsumtion delades in i fyra kategorier: 2-3 per vecka, 1-2 per vecka, 1-2 per månad och sällsynta. Rökning klassificerades i 3 grupper (ingen, tidigare rökare och aktiv rökning). Passiv rökning kategoriserades också i 2 grupper (nej och ja). Utbildningsnivåerna klassificerades i 4 grupper (analfabeter, grundskoleutbildning, gymnasieskola och universitet). Kvinnors bostäder klassificerades som landsbygd och urban. Dessutom har kvinnornas bostäder delat sig antingen som bor nära en trafikerad gata (cirka 100 meter) eller inte. Liten för gestationsålder (SGA) nyfödd definierades som födelsevikt <10:e percentilen för gestationsålder med Turkiets nationella nomogram som referens för foster tillväxt.

Metoden utvecklad av Aliyev et al. användes för att förbereda proverna för analys En milliliter plasmaprov placerades i högtemperaturbeständiga teflonrör i en mikrovågsugn, och 5 mL Suprapur® (Merck, Darmstadt, Tyskland) salpetersyra (HNO3) och 5 mL ultra- rent vatten tillsattes. Alla plasmaprover smältes med användning av ett mikrovågsuppslutningssystem (Start D; Milestone, MD, USA). Efter digestion gjordes varje prov till en total volym av 20 ml med 9 ml ultrarent vatten i ett 50 ml polypropenrör. Salpetersyra (Suprapur®, 65%) användes för rötning av prover och standardreferensmaterial. Ultrarent vatten (Direct-Q®; Millipore, Darmstadt, Tyskland) användes för utspädning av standarden (flerelementstandard Chem-Lab, Zedelgem, Belgien) och provberedningar.

De tre metallerna (kadmium, bly och vanadin) mättes med hjälp av induktivt kopplad plasma-masspektrometri (Thermo Scientific ICAPQc, USA). Driftsparametrarna ställdes in enligt följande: radiofrekvenseffekt 1550 W, nebulisatorgas 0,96 L/min, plasmagas 0,88 L/min, nebulisatortryck 3,01 bar, uppehållstid 0,01 millisekunder och spraykammarens temperatur 3,7°C. Provtagningssonden tvättades mellan injektionerna genom att skölja med ultrarent vatten i 30 s, följt av tvättning med 2% HNO3 i 45 s, och slutligen skölja med ultrarent vatten i 45 s. Efter tvättstegen körde instrumentet automatiskt nästa prov. En 11-punkts kalibreringskurva (0,5-500 µg/L) användes för att mäta nivån av varje element. r2-värdena för kalibreringskurvorna för alla metaller beräknades, och minimivärdet var 0,9994. För att säkerställa noggrannheten av resultaten upprepades varje mätning av proverna och standarderna tre gånger. Resultaten av dessa mätningar visade att den relativa standardavvikelsen (RSD) inte översteg 5 %. Certifierat referensmaterial (CRM-Seronorm™ Trace Elements Whole Blood L-2, Sero AS, Billingstad, Norge) användes för valideringsmetoden. För att kontrollera instrumentets stabilitet och känslighet användes en blandning av interna standarder (Hf) och även medel- och RSD-värden för metaller beräknades. Variationerna för varje mätning av kvalitetskontrollerna var <15 %. De relativa procentuella skillnaderna i replikatanalyser var <5 % i proverna och standarderna.