Wanad w późnym stanie przedrzucawkowym (Vanadium PE)

To obserwacyjne badanie kliniczno-kontrolne przeprowadzono na Oddziale Położnictwa i Ginekologii Szpitala Publicznego Cengiz Gokcek w Gaziantep w Turcji w okresie od marca 2018 r. do czerwca 2019 r. Protokół został zatwierdzony przez Komisję Etyki ds. Badań Klinicznych Uniwersytetu Gaziantep (sygnatura: 2019/36). Badanie ściśle przestrzegało zasad Deklaracji Helsińskiej. Wszyscy pacjenci włączeni do badania wyrazili ustną i pisemną świadomą zgodę. Do badania włączono dziewięćdziesiąt dwie kobiety podzielone na dwie grupy.

Gromadzenie danych i interwencja w badaniu:

Rozpoznanie L-PrE, zgodnie z definicją Komitetu ds. Terminologii Amerykańskiego Kolegium Położników i Ginekologów (ACOG), ustala się na podstawie obecności białkomoczu (wydalanie białka z moczem ≥300 mg w dobowej próbce moczu, lub białkomocz ≥1+ w teście paskowym) i wartości ciśnienia tętniczego ≥90/140 mmHg (dwa pomiary ciśnienia tętniczego w odstępie 6 godzin), które występuje po 34 tygodniach ciąży u kobiety z wcześniej prawidłowym ciśnieniem. Ciśnienie rozkurczowe i/lub skurczowe <110/160 mm Hg przyjęto jako łagodne; aw przypadku, gdy wartości te przekraczały ten poziom, przyjmowano go jako dotkliwy. Wszystkie kobiety z badanej populacji zostały poddane położniczemu badaniu ultrasonograficznemu, a ocena matczyno-płodowa została przeprowadzona przez jedną z autorek. Od wszystkich pacjentek uzyskano wywiad położniczy. Rejestrowano dane demograficzne, takie jak wiek, ciąża, liczba porodów, wskaźnik masy ciała (BMI) i wiek ciążowy. Wiek ciążowy określono na podstawie obliczeń z ostatniej miesiączki i potwierdzono pomiarami ultrasonograficznymi wykonanymi w pierwszym trymestrze ciąży. Próbki osocza żylnego matki pobrano do pomiaru stężenia kadmu, ołowiu i wanadu po rozpoznaniu L-PrE w poradni ambulatoryjnej. Próbki te szybko odwirowano przy 1500 g przez 10 minut, próbki osocza oddzielono i przechowywano w -80°C do dnia pomiaru. Wszystkie pacjentki z L-PrE były również hospitalizowane, a ich ciąże przerwano. Próbki z grup kontrolnych pobrano podczas rutynowego badania położniczego w III trymestrze ciąży. Następnie kobiety w ciąży były obserwowane aż do porodu. Obie grupy porównano pod względem wieku matki, BMI, tygodnia ciąży, ciąży, rodności, żywo urodzonych, ciśnienia skurczowego/rozkurczowego, białka całkowitego w moczu punktowym, hemoglobiny, hematokrytu, liczby płytek krwi, liczby krwinek białych, mocznika, kwas moczowy, albumina, azot mocznikowy we krwi, kreatynina, próby wątrobowe (AST, ALT), dehydrogenaza kwasu mlekowego, stężenia kadmu, ołowiu i wanadu oraz masa noworodka przy porodzie. Noworodek mały w stosunku do wieku ciążowego (SGA) został zdefiniowany jako masa urodzeniowa <10 percentyla dla wieku ciążowego z narodowym nomogramem Turcji jako punktem odniesienia dla wzrostu płodu. Próbki zostały przeniesione w pudełkach w foremkach lodowych do Centrum Aplikacji i Badań Naukowo-Technicznych Uniwersytetu Yozgat Bozok (Laboratorium Toksykologii Zawodowej i Środowiskowej) w celu pomiaru poziomów metali ciężkich i pierwiastków śladowych. Częstotliwość spożycia owoców morza podzielono na cztery kategorie: 2-3 razy w tygodniu, 1-2 razy w tygodniu, 1-2 razy w miesiącu oraz rzadkie. Palenie podzielono na 3 grupy (brak, dawniej palacz i aktywne palenie). Palenie bierne podzielono również na 2 grupy (nie i tak). Poziomy wykształcenia podzielono na 4 grupy (analfabetyzm, wykształcenie podstawowe, średnie i wyższe). Domy kobiet podzielono na wiejskie i miejskie. Co więcej, miejsca zamieszkania kobiet podzieliły się, mieszkając w pobliżu ruchliwej ulicy (około 100 metrów) lub nie. Noworodek mały w stosunku do wieku ciążowego (SGA) został zdefiniowany jako masa urodzeniowa <10 percentyla dla wieku ciążowego z narodowym nomogramem Turcji jako odniesieniem dla płodu wzrost.

Metoda opracowana przez Alijewa i in. użyto do przygotowania próbek do analizy Jeden mililitr próbek osocza umieszczono w odpornych na wysoką temperaturę probówkach teflonowych w kuchence mikrofalowej, a 5 ml Suprapur® (Merck, Darmstadt, Niemcy) kwasu azotowego (HNO3) i 5 ml ultra- dodano czystą wodę. Wszystkie próbki osocza trawiono przy użyciu systemu roztwarzania mikrofalowego (Start D; Milestone, MD, USA). Po trawieniu każdą próbkę uzupełniono do całkowitej objętości 20 ml z 9 ml ultraczystej wody w 50 ml probówce polipropylenowej. Kwas azotowy (Suprapur®, 65%) zastosowano do roztwarzania próbek i standardowego materiału odniesienia. Ultraczystą wodę (Direct-Q®; Millipore, Darmstadt, Niemcy) zastosowano do rozcieńczenia wzorca (wzorzec wielopierwiastkowy Chem-Lab, Zedelgem, Belgia) i preparatów próbek.

Trzy metale (kadm, ołów i wanad) zmierzono za pomocą spektrometrii masowej z plazmą sprzężoną indukcyjnie (Thermo Scientific ICAPQc, USA). Parametry robocze ustawiono następująco: moc częstotliwości radiowej 1550 W, gaz nebulizatora 0,96 l/min, gaz plazmowy 0,88 l/min, ciśnienie nebulizatora 3,01 bara, czas przebywania 0,01 milisekundy i temperatura komory natryskowej 3,7°C. Sonda próbnika była myta między wstrzyknięciami przez płukanie wodą ultraczystą przez 30 s, następnie przemywanie 2% HNO3 przez 45 s, a na koniec płukanie wodą ultraczystą przez 45 s. Po krokach przemywania, przyrząd automatycznie przeanalizował następną próbkę. Do pomiaru poziomu każdego pierwiastka zastosowano 11-punktową krzywą kalibracyjną (0,5-500 µg/l). Obliczono wartości r2 krzywych kalibracyjnych dla wszystkich metali, a minimalna wartość wynosiła 0,9994. Aby zapewnić dokładność wyników, każdy pomiar próbek i wzorców powtarzano trzykrotnie. Wyniki tych pomiarów wykazały, że względne odchylenie standardowe (RSD) nie przekraczało 5%. W metodzie walidacji zastosowano certyfikowany materiał referencyjny (CRM-Seronorm™ Trace Elements Whole Blood L-2, Sero AS, Billingstad, Norwegia). Do sprawdzenia stabilności i czułości instrumentu wykorzystano mieszaninę wzorców wewnętrznych (Hf), obliczono również wartości średnie i RSD metali. Odchylenia każdego pomiaru kontroli jakości wynosiły <15%. Względne różnice procentowe w powtórzonych analizach wynosiły <5% w próbkach i standardach.