骨髓移植幸存者的代谢综合征

具体目标 1：监测内分泌病

• 我们将使用 GH 刺激测试来测试生长激素 (GH) 轴的缺陷。 简而言之，患者（受试者）将按照内分泌临床实践中使用的程序（方案见附录）使用两种独立的促分泌剂（精氨酸和可乐定）在禁食状态下进行研究。 根据标准标准，在所有时间点刺激的 GH 值 < 10 ng/dl 的那些受试者中将被识别为 GH 缺乏症。 我们还将评估 IGF-1 和 IGFBP-3 水平，结果将根据年龄正常值进行解释。 作为我们监测 GH 轴缺陷的一部分，我们将获得骨龄 X 光片。 结果将根据 Greulich 和 Pyle 的标准进行解释。
• 性类固醇水平。 雌激素和睾酮水平测试可以在同一天和 GH 刺激测试的同一时间进行。 结果将与 Esoterix Laboratory (Calabasas Hills, CA) 公布的骨龄匹配正常值进行比较。
• OGTT- 将在上午 9 点或之前进行 2 小时的口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)，并在隔夜禁食后进行。 为尽量减少不适，在放置 IV 之前，EMLA® 乳膏将被放置在静脉导管 (IV) 插入部位 30 分钟。 IV 将由经验丰富的护士放置在肘前静脉中。 将从 IV 中抽取基线血样。 然后，患者将在 3 分钟内喝葡萄糖（1.75 克 CHO/kg，最多 75 克）。 在摄入 Glucola 后的 30、60 和 120 分钟时，将从静脉内抽取血样。 将立即使用 YSI 葡萄糖分析仪 (Yellow Springs OH) 分析血液的血清葡萄糖水平。 葡萄糖耐量将根据世界卫生组织 17 进行分类。 额外的血液将被收集并冷冻，用于稍后在 PI 的实验室分析胰岛素水平。
• 将获得空腹血样，用于以后评估空腹血脂情况。 这将在 NCH 实验室进行。 将根据公布的年龄正常值 18 对值进行分析。
• 我们将测量腰围并根据小儿正常值6报告。

具体目标2：

• 肝葡萄糖生成 (HGP) 和蛋白质周转率的测量。 患者将被要求在临床研究中心过夜（晚上 9 点前到达）。 他/她将保持 NPO，除了晚上 9 点后不含糖和咖啡因的液体。入睡前，使用 EMLA® 霜，将 IV 导管插入肘前静脉。 凌晨 4:00 我们将开始输注稳定同位素 [1-13C] NaHCO3（推注 0.2 mg/kg，然后 0.6 mg/kg/hr），[1-13C] 亮氨酸（推注 0.35 mg/kg，然后推注 0.65 mg/kg/hr）和6,6-[2H2] 葡萄糖（推注 2.5 克/千克，然后持续输注 2.0 毫克/千克/小时）持续 3.0 小时（同位素平衡期）。 将在基线时抽血，并在同位素平衡后再次抽血。 样本将被离心分离，血清将被冷冻，以备将来在 P.I. 实验室进行质谱分析。 我们和其他人之前已经描述过这些方法。 20 此外，我们将使用 VMax 量热计（Viasys Healthcare，Yorba Linda，CA）通过 30 分钟罩式间接量热法评估静息能量消耗 (REE)。
• 使用高胰岛素正常血糖钳夹测量肝脏和外周胰岛素抵抗。 我们将使用高胰岛素正常血糖钳夹结合持续的 6,6-[2H2] 葡萄糖来测量肝脏和外周胰岛素敏感性。 再次使用 EMLA® 霜，将第二根 IV 导管逆行插入另一只手的手背，并将手放在保温箱中。 将从该导管收集稳态血液。

早上 7 点 我们将开始钳制。 最初将以 10 mU/m2/min 的速度输注胰岛素。 至少 2 小时后（或更长时间，如果未出现稳态），胰岛素输注速率将增加至 40 mU/m2/min。 第二剂将持续至少 2 小时，或更长时间，直到出现稳态。 在胰岛素输注期间，患者还将接受 20% 葡萄糖的输注。 将每 5-15 分钟调整一次葡萄糖输注速率，以保持血浆葡萄糖在 88-95 mg/dl。 将在床边使用自动葡萄糖氧化酶技术（葡萄糖分析仪；YSI，Yellow Springs，OH）每 5-10 分钟测量一次血浆葡萄糖。 为防止低钾血症和低磷血症，将在整个研究过程中输注 K2HPO4，并在基线和研究结束时测量血清钾水平。 将收集血液用于稍后在输注同位素之前（基线）、稳态（恰好在胰岛素输注之前）和在每个胰岛素输注“步骤”结束时检测血浆中的 6H6。 我们还将在这些时间点收集血液以分析血浆胰岛素水平。 我们的小组之前已经报告了这些方法的细节 21。

根据在 40 mU/m2/min 的胰岛素剂量下维持血糖水平 88-93 mg/dl 所需的葡萄糖量，外周胰岛素敏感性将报告为最大葡萄糖处理率的一半（以毫克/千克/分钟为单位） . 一旦达到稳定状态，这将被视为三个 15 分钟间隔的平均值。 将通过比较基线的 HGP 与 10mU/m2/min 钳夹结束时测量的 HGP 来量化肝胰岛素敏感性。

我们将使用 DXA 扫描（Lunar Prodigy）测量骨密度，其中包括测量全身、臀部和脊柱的骨矿物质密度和含量。 测量值将与年龄和性别匹配的正常值进行比较，并转换为 Z 分数 (www.bcm.edu/bodycomplab)。

**安全问题：我们之前曾在 200 多名成人和 6 名青少年中使用过高胰岛素正常血糖钳夹。 我们的任何受试者都没有经历过低血糖症。 我们通过每 5 -15 分钟在床边测量一次葡萄糖水平并在测量血浆葡萄糖后一分钟内调整葡萄糖输注来降低风险。 私家侦探出现在每个钳夹程序中，并使用相同的熟练护士作为助手。 在任何站点进行的研究都是这种情况。 我们正在使用为儿童修改的最小模型，这大大减少了失血。 参与本研究的最大失血量估计为每个儿童 52 毫升。 稳定同位素方法已广泛用于孕妇和儿童。

体外方法：

• 同位素富集的测定- 6H6- 血浆的富集将在衍生化后使用 Hewlett Packard 5989A 气相色谱仪/质谱仪以电子碰撞模式进行测量。 测量将在申请人的实验室进行。
• 激素和其他分析——胰岛素和 C 肽水平将在申请人的实验室中使用双标记抗体技术进行测量。 全国儿童医院的实验室将测量血红蛋白 A1c 和空腹血脂水平。