Metabolisk syndrom hos knoglemarvstransplantationsoverlevere

Specifikt mål 1: Overvågning for endokrinopati

• Vi vil teste for defekter i væksthormon (GH)-aksen ved at bruge GH-stimuleringstest. Kort fortalt vil patienten (subjektet) have undersøgelser udført i fastende tilstand ved hjælp af to uafhængige sekretagoger (arginin og clonidin) pr. procedurer, der anvendes i endokrin klinisk praksis (se appendiks for protokol). GH-mangel vil blive identificeret hos de forsøgspersoner, hvis stimulerede GH-værdi er < 10 ng/dl på alle tidspunkter i henhold til standardkriterier. Vi vil også evaluere IGF-1- og IGFBP-3-niveauer, og resultaterne vil blive fortolket per alders normale værdier. Som en del af vores overvågning af GH-akse-defekter vil vi få et knoglealder-røntgenbillede. Resultater vil blive fortolket i overensstemmelse med standarderne for Greulich og Pyle.
• Sex steroid niveauer. Test for østrogen- og testosteronniveauer kan udføres samme dag og samtidig med GH-stimuleringstestene. Resultater vil blive sammenlignet med knoglealder matchede normale værdier som offentliggjort af Esoterix Laboratory (Calabasas Hills, CA).
• OGTT- En 2-timers oral glucosetolerancetest (OGTT) vil blive udført kl. 9.00 eller før, efter en faste natten over. For at minimere ubehag vil EMLA® creme blive placeret på stedet for intravenøs kateter (IV) indsættelse i 30 minutter, før IV placeres. IV vil blive placeret i en antecubital vene af en erfaren sygeplejerske. Baseline blodprøver vil blive udtaget fra IV. Patienten vil derefter drikke en glucola (1,75 g CHO/kg, maks. 75 g) over 3 minutter. Blodprøver vil blive udtaget fra IV 30, 60 og 120 minutter efter Glucola-indtagelse. Blod analyseres straks ved hjælp af en YSI-glukoseanalysator (Yellow Springs OH) for serumglukoseniveauer. Glucosetolerance vil blive kategoriseret i henhold til Verdenssundhedsorganisationen17. Yderligere blod vil blive indsamlet og frosset til senere analyse af insulinniveauer, som skal analyseres i PI's laboratorium.
• En fastende blodprøve vil blive udtaget til senere evaluering af en fastende lipidprofil. Dette vil blive udført i NCH-laboratoriet. Værdier vil blive analyseret i henhold til offentliggjorte aldersnormale værdier18.
• Vi vil måle taljeomkredsen og rapportere i henhold til pædiatriske normale værdier6.

Specifikt mål 2:

• Måling af hepatisk glukoseproduktion (HGP) og proteinomsætning. Patienterne vil blive bedt om at overnatte i Klinisk Studiecenter (ankomme kl. 21.00). Han/hun forbliver NPO, bortset fra sukker- og koffeinfri væsker efter kl. Inden du går i seng med EMLA®-creme, indsættes et IV-kateter i den antecubitale vene. Klokken 4:00 vi vil begynde infusion af stabile isotoper [1-13C] NaHCO3 (bolus 0,2 mg/kg derefter 0,6 mg/kg/time), [1-13C] leucin (bolus 0,35 mg/kg efterfulgt af 0,65 mg/kg/time) og 6,6-[2H2]glucose (bolus 2,5 gram/kg efterfulgt af konstant infusion af 2,0 mg/kg/time) i 3,0 timer (isotop ækvilibreringsperiode). Blod vil blive udtaget ved baseline og igen efter isotopækvilibrering. Prøver vil blive centrifugeret og serum frosset til fremtidig analyse ved massespektrometri i P.I.'s laboratorium. Vi og andre har tidligere beskrevet disse metoder.20 Derudover vil vi vurdere hvileenergiforbrug (REE) ved 30 minutters indirekte kalorimetri ved hjælp af VMax-kalorimeteret (Viasys Healthcare, Yorba Linda, CA).
• Måling af lever- og perifer insulinresistens ved hjælp af en hyperinsulinemisk euglykæmisk klemme. Vi vil måle hepatisk og perifer insulinfølsomhed ved hjælp af en hyperinsulinemisk euglykæmisk klemme i forbindelse med fortsat 6,6-[2H2]glukose. Igen ved at bruge EMLA®-creme, vil et andet IV-kateter blive indsat retrograd på bagsiden af ​​den modsatte hånd, og hånden vil blive placeret i en varmeboks. Steady state-blod vil blive opsamlet fra dette kateter.

Klokken 7 om morgenen vi vil begynde klemmen. Insulin vil initialt blive infunderet med 10 mU/m2/min. Efter mindst 2 timer (eller længere, hvis steady state ikke er forekommet), øges insulininfusionshastigheden til 40 mU/m2/min. Den anden dosis fortsættes i mindst 2 timer eller længere, indtil steady-state er opstået. Under insulininfusion vil patienten også modtage en infusion af 20 % dextrose. Hastigheden af ​​dextrose-infusion vil blive justeret hvert 5. - 15. minut for at holde plasmaglucose 88-95 mg/dl. Plasmaglukose vil blive målt hvert 5.-10. minut ved sengen ved hjælp af en automatiseret glucoseoxidaseteknik (Glucose Analyzer; YSI, Yellow Springs, OH). For at forhindre hypokaliæmi og hypofosfatæmi vil K2HPO4 blive infunderet under hele undersøgelsen, og serumkaliumniveauer vil blive målt ved baseline og ved slutningen af ​​undersøgelsen. Blod vil blive opsamlet til senere påvisning af 6H6 i plasma før infusion af isotop (baseline), ved steady state (lige før insulininfusion) og ved slutningen af ​​hvert insulininfusions-"trin". Vi vil også indsamle blod til analyse af plasmainsulinniveauer på disse tidspunkter. Vores gruppe har tidligere rapporteret detaljerne om disse metoder21.

Perifer insulinfølsomhed vil blive rapporteret som den halve maksimale glukosebortskaffelseshastighed (i milligram/kilogram/minut) i henhold til den mængde glukose, der kræves for at opretholde serumglukoseniveauer på 88-93 mg/dl, ved en insulindosis på 40 mU/m2/min. . Dette vil blive taget som gennemsnittet af tre 15-minutters intervaller, når steady-state er opnået. Hepatisk insulinfølsomhed vil blive kvantificeret ved at sammenligne HGP ved baseline med HGP som målt ved slutningen af ​​10mU/m2/min klemmen.

Vi vil måle knogletæthed ved hjælp af en DXA-scanning (Lunar Prodigy), som vil omfatte måling af hele kroppen, hofte og rygsøjle for både knoglemineraltæthed og indhold. Målinger vil blive sammenlignet med alders- og kønsmatchede normaler og konverteret til Z-score (www.bcm.edu/bodycomplab).

**Sikkerhedsproblemer: Vi har tidligere brugt den hyperinsulinemiske euglykæmiske klemme hos over 200 voksne og hos 6 unge. På intet tidspunkt har nogen af ​​vores forsøgspersoner oplevet hypoglykæmi. Vi reducerer risikoen ved at måle glukoseniveauet ved sengen hvert 5. -15. minut og justere dextrose-infusionen inden for et minut efter måling af plasmaglukose. P.I. er til stede ved hver eneste klemmeprocedure og bruger den samme dygtige sygeplejerske som assistent. Dette vil være tilfældet for undersøgelser udført på ethvert sted. Vi bruger den minimale model som modificeret til børn, som i høj grad minimerer tabet af blod. Det maksimale blodtab for deltagelse i denne undersøgelse er estimeret til at være 52 cc pr. barn. De stabile isotopmetoder er blevet brugt flittigt hos både gravide og børn.

In vitro metoder:

• Bestemmelse af isotopberigelse - 6H6-berigelse af plasma vil blive målt efter derivatisering ved hjælp af en Hewlett Packard 5989A gaskromatograf/massespektrometer i elektronpåvirkningstilstand. Foranstaltninger vil blive udført i ansøgerens laboratorium.
• Hormon- og anden analyse- Insulin- og C-peptidniveauer vil blive målt ved hjælp af en dobbeltmærket antistofteknik i ansøgerens laboratorium. Hæmoglobin A1c og fastende lipidprofiler vil blive målt af laboratoriet på Nationwide Children's Hospital.