Metabolsk syndrom hos overlevende av benmargstransplantasjoner

Spesifikt mål 1: Overvåking for endokrinopati

• Vi vil teste for defekter i veksthormon (GH)-aksen ved å bruke GH-stimuleringstesting. Kort fortalt vil pasienten (subjektet) få studier utført i fastende tilstand ved bruk av to uavhengige sekretagoger (arginin og klonidin) per prosedyrer brukt i endokrin klinisk praksis (se vedlegg for protokoll). GH-mangel vil bli identifisert hos de forsøkspersonene hvis stimulerte GH-verdi er < 10 ng/dl til enhver tid, i henhold til standardkriterier. Vi vil også evaluere IGF-1 og IGFBP-3 nivåer og resultatene vil bli tolket per alder normalverdier. Som en del av vår overvåking for GH-aksedefekter, vil vi ta et beinalderrøntgenbilde. Resultatene vil bli tolket i henhold til standardene til Greulich og Pyle.
• Sex steroidnivåer. Testing for østrogen- og testosteronnivåer kan gjøres samme dag og samtidig som GH-stimuleringstestene. Resultatene vil bli sammenlignet med benaldermatchede normale verdier som publisert av Esoterix Laboratory (Calabasas Hills, CA).
• OGTT- En 2-timers oral glukosetoleransetest (OGTT) vil bli utført kl. 09.00 eller før, etter en faste over natten. For å minimere ubehag, vil EMLA®-kremen plasseres på stedet for intravenøst ​​kateter (IV) innføring i 30 minutter før IV plasseres. IV vil bli plassert i en antecubital vene av en erfaren sykepleier. Baseline blodprøver vil bli trukket fra IV. Pasienten vil deretter drikke en glucola (1,75 g CHO/kg, maks 75 g) i løpet av 3 minutter. Blodprøver vil bli tatt fra IV 30, 60 og 120 minutter etter inntak av Glucola. Blod vil bli analysert umiddelbart ved hjelp av en YSI glukoseanalysator (Yellow Springs OH) for serumglukosenivåer. Glukosetoleranse vil bli kategorisert i henhold til Verdens helseorganisasjon17. Ytterligere blod vil bli samlet og frosset for senere analyse av insulinnivåer som skal analyseres i PIs laboratorium.
• En fastende blodprøve vil bli tatt for senere evaluering av en fastende lipidprofil. Dette vil bli utført i NCH-laboratoriet. Verdiene vil bli analysert i henhold til publiserte aldersnormalverdier18.
• Vi vil måle midjeomkretsen og rapportere i henhold til pediatriske normalverdier6.

Spesifikt mål 2:

• Måling av hepatisk glukoseproduksjon (HGP) og proteinomsetning. Pasienter vil bli bedt om å overnatte i Clinical Study Center (ankomme kl. 21.00). Han/hun vil forbli NPO, bortsett fra sukker- og koffeinfrie væsker etter kl. Før du legger deg, ved bruk av EMLA®-krem, vil et IV-kateter settes inn i antecubitalvenen. Klokken 04:00 vi vil begynne infusjon av stabile isotoper [1-13C] NaHCO3 (bolus 0,2 mg/kg deretter 0,6 mg/kg/time), [1-13C] leucin (bolus 0,35 mg/kg etterfulgt av 0,65 mg/kg/time) og 6,6-[2H2]glukose (bolus 2,5 gram/kg etterfulgt av konstant infusjon av 2,0 mg/kg/time) i 3,0 timer (isotop ekvilibreringsperiode). Blod vil bli tappet ved baseline og igjen etter isotopekvilibrering. Prøver vil bli sentrifugert og serumet frosset for fremtidig analyse ved massespektrometri i P.I.s laboratorium. Vi og andre har tidligere beskrevet disse metodene.20 I tillegg vil vi vurdere hvileenergiforbruk (REE) ved 30 minutters indirekte kalorimetri ved hjelp av VMax-kalorimeteret (Viasys Healthcare, Yorba Linda, CA).
• Måling av lever- og perifer insulinresistens ved hjelp av en hyperinsulinemisk euglykemisk klemme. Vi vil måle hepatisk og perifer insulinfølsomhet ved å bruke en hyperinsulinemisk euglykemisk klemme i forbindelse med fortsatt 6,6-[2H2]glukose. Igjen ved å bruke EMLA®-krem, vil et andre IV-kateter settes inn retrograd på baksiden av den motsatte hånden og hånden legges i en varmeboks. Steady state-blod vil bli samlet inn fra dette kateteret.

Klokken 07.00 vi starter klemmen. Insulin vil initialt bli infundert med 10 mU/m2/min. Etter minst 2 timer (eller lenger hvis steady state ikke har oppstått), vil insulininfusjonshastigheten økes til 40 mU/m2/min. Den andre dosen fortsettes i minst 2 timer, eller lenger til steady-state har oppstått. Ved insulininfusjon vil pasienten også få en infusjon av 20 % dekstrose. Hastigheten for dekstroseinfusjon vil bli justert hvert 5. - 15. minutt for å holde plasmaglukose 88-95 mg/dl. Plasmaglukose vil bli målt hvert 5.–10. minutt ved sengen ved hjelp av en automatisert glukoseoksidaseteknikk (Glucose Analyzer; YSI, Yellow Springs, OH). For å forhindre hypokalemi og hypofosfatemi, vil K2HPO4 infunderes gjennom hele studien, og serumkaliumnivåer vil bli målt ved baseline og ved slutten av studien. Blod vil bli samlet for senere påvisning av 6H6 i plasma før infusjon av isotop (baseline), ved steady state (like før insulininfusjon) og ved slutten av hvert insulininfusjons-"trinn". Vi vil også samle inn blod for analyse av plasmainsulinnivåer på disse tidspunktene. Vår gruppe har tidligere rapportert detaljene om disse metodene21.

Perifer insulinfølsomhet vil bli rapportert som halv maksimal glukosedisponeringshastighet (i milligram/kilogram/minutt) i henhold til mengden glukose som kreves for å opprettholde serumglukosenivåer på 88-93 mg/dl, ved en insulindose på 40 mU/m2/min. . Dette vil bli tatt som gjennomsnittet av tre 15-minutters intervaller når steady-state er oppnådd. Hepatisk insulinfølsomhet vil kvantifiseres ved å sammenligne HGP ved baseline med HGP målt ved slutten av 10mU/m2/min klemmen.

Vi vil måle bentetthet ved hjelp av en DXA-skanning (Lunar Prodigy) som vil inkludere måling av hele kroppen, hoften og ryggraden for både beinmineraltetthet og innhold. Målinger vil bli sammenlignet med alders- og kjønnsmatchede normaler og konvertert til Z-skåre (www.bcm.edu/bodycomplab).

**Sikkerhetsproblemer: Vi har tidligere brukt den hyperinsulinemiske euglykemiske klemmen hos over 200 voksne og hos 6 ungdommer. Ikke på noe tidspunkt har noen av våre forsøkspersoner opplevd hypoglykemi. Vi reduserer risikoen ved å måle glukosenivået ved sengekanten hvert 5. -15. minutt og justere dekstroseinfusjonen innen ett minutt etter måling av plasmaglukose. P.I. er til stede ved hver eneste klemprosedyre og bruker samme dyktige sykepleier som assistent. Dette vil være tilfellet for studier utført på et hvilket som helst sted. Vi bruker den minimale modellen som er modifisert for barn, som i stor grad minimerer tap av blod. Det maksimale blodtapet for deltakelse i denne studien er beregnet til å være 52 cc per barn. De stabile isotopmetodene har vært mye brukt hos både gravide og barn.

In vitro metoder:

• Bestemmelse av isotopanrikning - 6H6-anrikning av plasma vil bli målt etter derivatisering ved bruk av en Hewlett Packard 5989A gasskromatograf/massespektrometer i elektronpåvirkningsmodus. Tiltak vil bli utført i søkerens laboratorium.
• Hormon- og annen analyse- Insulin- og C-peptidnivåer vil bli målt ved hjelp av en dobbeltmerket antistoffteknikk i søkerens laboratorium. Hemoglobin A1c og fastende lipidprofiler vil bli målt av laboratoriet ved Landsdekkende barnesykehus.