富马酸亚铁和焦磷酸铁作为发展中国家的食品强化剂

功效研究将测试富马酸亚铁和焦磷酸铁在 9 个月的喂养试验中与硫酸亚铁相比预防非贫血的孟加拉国婴儿/幼儿贫血/IDA 的能力。 血红蛋白和 Fe 状态指标（铁蛋白和循环转铁蛋白受体）和急性期反应物（C 反应蛋白）将在基线以及干预 4.5 个月和 9 个月后进行监测。

受试者将从达卡市附近的城郊社区 Nandipara 的人群中招募非贫血婴幼儿（6-24 个月；n=240）（Hb >105g/L）进行研究。 所有儿童将被随机分配到三个研究组之一；富马酸亚铁、焦磷酸铁或硫酸亚铁（每组 n=80），并根据基线的幽门螺杆菌感染（基于幽门螺杆菌粪便抗原检测，阳性或阴性）进行分层。 所有婴儿/幼儿将在研究结束时重新接受幽门螺杆菌感染检测。

所有父母或监护人将被充分告知研究的目的和程序，并且将从每个孩子的至少一位父母/监护人处获得知情同意。

排除标准 排除标准包括贫血儿童（Hb

样本量：

样本量基于干预后的预期贫血患病率，即摄入强化婴儿谷物 9 个月后患有贫血的儿童。 我们假设食用硫酸亚铁强化谷物的婴儿贫血患病率为 10%，食用富马酸亚铁强化谷物的婴儿为 30%，食用焦磷酸铁强化谷物的婴儿贫血患病率为 50%。 为了以 95% 的置信度和功效 = 0.80 检测 20% 点的差异（（P1 - P2；硫酸盐与富马酸盐和硫酸盐与焦磷酸盐），样本量计算为每组 62 名婴儿/幼儿。

假设辍学率约为 25%，我们将在每组招募 80 名婴幼儿，即 240 名非贫血婴幼儿。

我们假设研究人群中贫血的患病率很高 (70-80%)，因此需要对大约 1000-1200 名儿童进行筛查。

强化食品 每份将包含 25 克基于小麦或米粉和牛奶的婴儿谷物（专门为研究生产；在制造过程中将添加 9.3 毫克富马酸亚铁、焦磷酸铁或硫酸亚铁/25 克干麦片。 抗坏血酸将在制造过程中以相对于添加的Fe 3:1的摩尔比添加。强化婴儿谷物将由卫生工作者管理，每天一份，每周 6 天，在研究医师/研究人员的密切监督下。每周将监测摄入量，如果需要，每周喂食 7 天，以补偿孩子生病或缺席的日子。

根据 WHO/FAO 2002（出版中；请参阅 PAHO/FNP/USAID consultation 2001），每份强化食品将为 7-12 个月的婴儿提供铁的推荐营养摄入量，即 9.3 mg Fe。 强化婴儿谷物将每天喂一次，每周喂 6 天，持续 9 个月。

孟加拉国综合营养项目 (BINP) 验证并目前正在使用的简化食物频率问卷 (SFFQ) 的膳食信息也将每月获得两次。 人体测量，例如 将在基线、4.5 个月和 9 个月的干预时测量体重、身高和上臂中围 (MUAC)。

所有父母或监护人将被充分告知研究的目的和程序，并且将从每个孩子的至少一位父母/监护人处获得知情同意。 所有贫血婴儿/幼儿（在筛选研究期间诊断）将根据 ICDDR.B 的标准治疗实践接受药用铁治疗； （硫酸亚铁滴剂；（2 mg Fe/kg BW/d）持续 2 个月。 4.5 和 9 个月大的贫血婴儿/幼儿（疗效研究）将接受药用铁（硫酸亚铁滴剂；（2 mg Fe/kg BW/d））治疗 2 个月，并被排除在研究之外。 医用铁将由医务人员管理。

钩虫感染在该社区并不普遍，但所有参与研究的儿童都将在每次采血时接受钩虫感染筛查。 受感染的儿童将接受阿苯达唑 400 毫克单剂量治疗两次（相隔 2 周），但不会被排除在干预研究之外。

血液分析 在筛选研究期间以及在基线和干预 4.5 个月和 9 个月后，将抽取静脉血样（在 EDTA 处理过的试管中 2 ml）以识别非贫血婴儿/幼儿。 Hb 将使用氰化高铁血红蛋白方法（Sigma 试剂盒，Sigma，St Louis，MO）进行分析。 血浆铁蛋白和血浆循环转铁蛋白受体将在初始筛选研究（Ramco，Houston，TX）期间使用商业试剂盒通过 ELISA 技术测量。 在基线以及干预 4.5 个月和 9 个月后抽取的样本将在 KUMC 通过基于单克隆抗体（Flowers 等人，1986 年）/双单克隆抗体（Flowers 等人，1989 年）的 ELISA 测定法分析血浆铁蛋白和血浆循环转铁蛋白受体. KUMC 还将对血浆样本进行 C 反应蛋白 (CRP) 分析。 CRP 将作为急性期反应物进行监测。 Cook 博士和 Flowers 女士目前正在开发一种用于 CRP 的单克隆 ELISA 技术，该技术将用于本研究。 商业质量控制材料（DiaMed、Cressier sur Morat、瑞士、Sigma 和 Ramco）将与分析 Hb 和铁蛋白的所有系列样品一起进行分析。

食品分析 在通过微波消解 (MLS 1200) 使用 HNO3/H2O2 混合物进行矿化后，通过电热/火焰原子吸收光谱法（SpectrAA 400，Varian，Mulgrave，澳大利亚）分析婴儿谷物的铁和钙 (Ca)，使用标准添加最小化基质效应的技术。 植酸含量将通过 HPLC 技术测定 (Sandberg & Ahderinne 1986, Sandberg et al. 1989

粪便样本；筛查幽门螺杆菌感染和钩虫感染 将收集粪便标本并通过新开发的酶免疫测定法 (EIA) 检测是否存在幽门螺杆菌抗原 (HpSA)。 多克隆商业试剂盒（H. 幽门螺杆菌抗原EIA； Cat# 740096, Novitech, Freiburg, Germany) 将被使用。 HpSA 测试已被证明对检测幽门螺杆菌感染具有敏感性 (>80%) 和特异性 (>95%)（Braden 等人 2000 年，Vakil 等人 2000 年，Sarker 等人个人通讯 2003 年） . 还将使用标准显微技术对粪便样本进行筛查，以确定是否存在寄生虫卵。

统计方差分析将用于比较每个研究组内以及 3 个研究组之间的变量。 具有显着 F 比率的结果 (p