Fumarato ferroso y pirofosfato férrico como fortificantes de alimentos en países en desarrollo

El estudio de eficacia evaluará la capacidad del fumarato ferroso y el pirofosfato férrico para prevenir la anemia/IDA en lactantes/niños pequeños de Bangladesh no anémicos en comparación con el sulfato ferroso durante un ensayo de alimentación de 9 meses. La hemoglobina y los indicadores del estado de Fe (ferritina y receptor de transferrina circulante) y un reactivo de fase aguda (proteína C reactiva) se controlarán al inicio del estudio y después de 4,5 y 9 meses de intervención.

Sujetos Los bebés y niños pequeños no anémicos (6-24 meses; n=240) (Hb >105 g/L) serán reclutados para el estudio de la población de Nandipara, una comunidad periurbana cerca de la ciudad de Dhaka. Todos los niños serán asignados al azar a uno de los tres grupos de estudio; fumarato ferroso, pirofosfato férrico o sulfato ferroso (n=80 por grupo), y estratificado según la infección por H. pylori (basado en la prueba de antígeno en heces para H. pylori, positivo o negativo) al inicio del estudio. A todos los bebés/niños pequeños se les volverá a hacer la prueba de infección por H. pylori al final del estudio.

Todos los padres o tutores serán completamente informados sobre el objetivo y los procedimientos del estudio y se obtendrá el consentimiento informado de al menos un padre/tutor por niño.

Criterios de exclusión Los criterios de exclusión incluyen niños con anemia (Hb

Tamaño de la muestra:

El tamaño de la muestra se basa en la prevalencia esperada de anemia después de la intervención, es decir, niños con anemia después de 9 meses de ingesta de cereal infantil fortificado. Suponemos que la prevalencia de anemia será del 10 % en lactantes que consumen cereales fortificados con sulfato ferroso, del 30 % en lactantes que consumen cereales fortificados con fumarato ferroso y del 50 % de anemia en lactantes que consumen cereales fortificados con pirofosfato férrico. Para detectar una diferencia de puntos del 20 % ((P1 - P2); sulfato frente a fumarato y sulfato frente a pirofosfato) con un 95 % de confianza y una potencia de 0,80, el tamaño de la muestra se calcula en 62 lactantes/niños pequeños por grupo.

Suponiendo una tasa de abandono de alrededor del 25 %, reclutaremos 80 bebés/niños pequeños por grupo, es decir, 240 bebés/niños pequeños no anémicos.

Suponemos una alta prevalencia de anemia (70-80 %) en la población de estudio y, por lo tanto, será necesario examinar a aproximadamente 1000-1200 niños.

Alimentos enriquecidos Cada ración constará de 25 g de cereal infantil a base de harina de trigo o arroz y leche de vaca (elaborada especialmente para el estudio; se añadirán 9,3 mg Fe como fumarato ferroso, pirofosfato férrico o sulfato ferroso/25 g de cereal seco durante la fabricación. El ácido ascórbico se agregará durante la fabricación en una proporción molar de 3:1 con respecto al Fe agregado. Los trabajadores de la salud administrarán cereales fortificados para bebés, una porción por día, 6 días a la semana, bajo la estrecha supervisión del médico/investigadores del estudio. La ingesta se controlará semanalmente y, si es necesario, se alimentará durante los 7 días de la semana para compensar los días en que el niño estuvo enfermo o ausente.

El alimento fortificado proporcionará la Ingesta de Nutrientes Recomendada de hierro para bebés de 7 a 12 meses según OMS/FAO 2002 (en prensa; consulte la consulta de OPS/FNP/USAID 2001) por porción, es decir, 9,3 mg Fe. Se alimentará con cereal infantil fortificado una vez al día, 6 días a la semana, durante 9 meses.

La información dietética mediante el cuestionario simplificado de frecuencia de alimentos (SFFQ), validado y actualmente en uso por el Proyecto de Nutrición Integrada de Bangladesh (BINP), también se obtendrá dos veces al mes. Medición antropométrica, p. el peso, la altura y la circunferencia del brazo medio (MUAC) se medirán al inicio del estudio, a los 4,5 meses y a los 9 meses de la intervención.

Todos los padres o tutores serán completamente informados sobre el objetivo y los procedimientos del estudio y se obtendrá el consentimiento informado de al menos un padre/tutor por niño. Todos los bebés/niños pequeños anémicos (diagnosticados durante el estudio de detección) serán tratados con Fe medicinal de acuerdo con la práctica de tratamiento estándar en ICDDR.B; (gotas de sulfato ferroso; (2 mg Fe/kg BW/d) durante 2 meses. Los bebés/niños pequeños con anemia a los 4,5 y 9 meses (estudio de eficacia) serán tratados con Fe medicinal (gotas de sulfato ferroso; (2 mg Fe/kg BW/d) durante 2 meses y excluidos del estudio. El Fe medicinal será administrado por personal sanitario.

La anquilostomiasis no es frecuente en esta comunidad, pero todos los niños que participan en el estudio serán examinados para detectar la anquilostomiasis en el momento de cada muestra de sangre. Los niños infectados serán tratados con una dosis única de 400 mg de albendazol en dos ocasiones (con 2 semanas de diferencia) pero no serán excluidos del estudio de intervención.

Análisis de sangre Se extraerán muestras de sangre venosa (2 ml en tubos tratados con EDTA) durante el estudio de detección para identificar lactantes/niños pequeños no anémicos y al inicio del estudio y después de 4,5 y 9 meses de intervención. La Hb se analizará utilizando el método de cianometahemoglobina (kit Sigma, Sigma, St Louis, MO). La ferritina plasmática y el receptor de transferrina circulante en plasma se medirán mediante la técnica ELISA mediante el uso de kits comerciales durante el estudio de selección inicial (Ramco, Houston, TX). Las muestras extraídas al inicio y después de 4,5 y 9 meses de intervención se analizarán en KUMC para determinar la ferritina plasmática y el receptor de transferrina circulante en plasma mediante ensayos ELISA basados ​​en anticuerpos monoclonales (Flowers et al. 1986)/anticuerpos monoclonales duales (Flowers et al. 1989) . Las muestras de plasma también se analizarán en busca de proteína C reactiva (PCR) en KUMC. La CRP se controlará como un reactivo de fase aguda. El Dr. Cook y la Sra. Flowers están desarrollando actualmente una técnica ELISA monoclonal para PCR, que se utilizará en este estudio. Los materiales comerciales de control de calidad (DiaMed, Cressier sur Morat, Suiza, Sigma y Ramco) se analizarán junto con todas las series de muestras analizadas para Hb y ferritina.

Análisis de alimentos Se analizará el Fe y el calcio (Ca) de los cereales infantiles mediante espectroscopía de absorción atómica electrotérmica/de llama (SpectrAA 400, Varian, Mulgrave, Australia) después de la mineralización mediante digestión por microondas (MLS 1200) usando una mezcla de HNO3/H2O2, usando adición estándar técnica para minimizar los efectos de matriz. El contenido de ácido fítico se determinará mediante la técnica de HPLC (Sandberg & Ahderinne 1986, Sandberg et al. 1989).

Muestras fecales; detección de infección por H. pylori e infección por anquilostomiasis Se recolectarán muestras de heces y se analizarán para detectar la presencia del antígeno H. pylori (HpSA) mediante un inmunoensayo enzimático (EIA) recientemente desarrollado. Un kit comercial policlonal (H. EIA de antígeno pylori; Cat# 740096, Novitech, Friburgo, Alemania). Se ha demostrado que la prueba HpSA es sensible (>80 %) y específica (>95 %) para la detección de la infección por H. pylori (Braden et al. 2000, Vakil et al. 2000, Sarker et al. comunicación personal 2003) . Las muestras de heces también se examinarán para detectar la presencia de huevos de parásitos, utilizando una técnica microscópica estándar.

Las estadísticas ANOVA se utilizarán para comparar variables dentro de cada grupo de estudio, así como entre los 3 grupos de estudio. Resultados con relación F significativa (p