Le fumarate ferreux et le pyrophosphate ferrique comme fortifiants alimentaires dans les pays en développement

L'étude d'efficacité testera la capacité du fumarate ferreux et du pyrophosphate ferrique à prévenir l'anémie/IDA chez les nourrissons/jeunes enfants bangladais non anémiques par rapport au sulfate ferreux au cours d'un essai d'alimentation de 9 mois. L'hémoglobine et les indicateurs du statut Fe (ferritine et récepteur circulant de la transferrine) et un réactif de phase aiguë (protéine C-réactive) seront surveillés au départ et après 4,5 et 9 mois d'intervention.

Sujets Les nourrissons et les jeunes enfants non anémiques (6-24 mois ; n=240) (Hb > 105 g/L) seront recrutés pour l'étude dans la population de Nandipara, une communauté périurbaine près de la ville de Dhaka. Tous les enfants seront randomisés dans l'un des trois groupes d'étude ; fumarate ferreux, pyrophosphate ferrique ou sulfate ferreux (n = 80 par groupe), et stratifié en fonction de l'infection à H. pylori (basé sur le test d'antigène des selles H. pylori, positif ou négatif) au départ. Tous les nourrissons/jeunes enfants seront retestés pour l'infection à H. pylori à la fin de l'étude.

Tous les parents ou tuteurs seront pleinement informés de l'objectif et des procédures de l'étude et le consentement éclairé sera obtenu d'au moins un parent/tuteur par enfant.

Critères d'exclusion Les critères d'exclusion incluent les enfants souffrant d'anémie (Hb

Taille de l'échantillon:

La taille de l'échantillon est basée sur la prévalence attendue de l'anémie après l'intervention, c'est-à-dire les enfants souffrant d'anémie après 9 mois de consommation de céréales enrichies pour nourrissons. Nous supposons que la prévalence de l'anémie sera de 10 % chez les nourrissons consommant des céréales enrichies en sulfate ferreux, de 30 % chez les nourrissons consommant des céréales enrichies en fumarate ferreux et de 50 % chez les nourrissons consommant des céréales enrichies en pyrophosphate ferrique. Pour détecter une différence de 20 % de points ((P1 - P2 ; sulfate contre fumarate et sulfate contre pyrophosphate) avec une confiance de 95 % et une puissance = 0,80, la taille de l'échantillon est calculée à 62 nourrissons/jeunes enfants par groupe.

En supposant un taux d'abandon d'environ 25 %, nous recruterons 80 nourrissons/jeunes enfants par groupe, soit 240 nourrissons/jeunes enfants non anémiques.

Nous supposons une forte prévalence d'anémie (70-80%) dans la population étudiée et nous devrons donc dépister environ 1000-1200 enfants.

Aliments enrichis Chaque portion sera composée de 25 g de céréales infantiles à base de farine de blé ou de riz et de lait de vache (produits spécialement pour l'étude ; 9,3 mg de Fe sous forme de fumarate ferreux, de pyrophosphate ferrique ou de sulfate ferreux/25 g de céréales sèches seront ajoutés lors de la fabrication. L'acide ascorbique sera ajouté lors de la fabrication à un rapport molaire de 3:1 par rapport au Fe ajouté. Les céréales pour nourrissons enrichies seront administrées par des agents de santé, une portion par jour, 6 jours par semaine, sous la surveillance étroite du médecin/investigateurs de l'étude. Les apports seront suivis hebdomadairement et, si nécessaire, nourris 7 jours sur 7 pour compenser les jours de maladie ou d'absence de l'enfant.

L'aliment enrichi fournira l'apport nutritionnel recommandé en fer pour les nourrissons de 7 à 12 mois selon l'OMS/FAO 2002 (sous presse ; veuillez consulter la consultation PAHO/FNP/USAID 2001) par portion, c'est-à-dire 9,3 mg Fe. Les céréales infantiles enrichies seront données une fois par jour, 6 jours par semaine, pendant 9 mois.

Des informations diététiques par questionnaire de fréquence alimentaire simplifié (SFFQ), validé et actuellement utilisé par le Bangladesh Integrated Nutrition Project (BINP), seront également obtenues deux fois par mois. Mesure anthropométrique, par ex. le poids, la taille et le périmètre brachial (MUAC) seront mesurés au départ, à 4,5 mois et 9 mois d'intervention.

Tous les parents ou tuteurs seront pleinement informés de l'objectif et des procédures de l'étude et le consentement éclairé sera obtenu d'au moins un parent/tuteur par enfant. Tous les nourrissons/jeunes enfants anémiques (diagnostiqués au cours de l'étude de dépistage) seront traités avec du Fe médicinal conformément aux pratiques de traitement standard de l'ICDDR.B ; (gouttes de sulfate ferreux; (2 mg Fe/kg pc/j) pendant 2 mois. Les nourrissons/jeunes enfants souffrant d'anémie à 4,5 et 9 mois (étude d'efficacité) seront traités avec du Fe médicinal (gouttes de sulfate ferreux ; (2 mg Fe/kg de poids corporel/j) pendant 2 mois et seront exclus de l'étude. Le Fe médicinal sera administré par les agents de santé.

L'ankylostomiase n'est pas répandue dans cette communauté, mais tous les enfants participant à l'étude seront soumis à un dépistage de l'ankylostomiase au moment de chaque prélèvement sanguin. Les enfants infectés seront traités avec une dose unique d'albendazole 400 mg pendant deux fois (à 2 semaines d'intervalle) mais ne seront pas exclus de l'étude d'intervention.

Analyse sanguine Des échantillons de sang veineux seront prélevés (2 ml dans des tubes traités à l'EDTA) au cours de l'étude de dépistage pour identifier les nourrissons/jeunes enfants non anémiques et au départ et après 4,5 et 9 mois d'intervention. L'Hb sera analysée en utilisant la méthode de la cyanométhémoglobine (kit Sigma, Sigma, St Louis, MO). La ferritine plasmatique et le récepteur de la transferrine circulante plasmatique seront mesurés par la technique ELISA en utilisant des kits commerciaux lors de l'étude de sélection initiale (Ramco, Houston, TX). Les échantillons prélevés au départ et après 4,5 et 9 mois d'intervention seront analysés au KUMC pour la ferritine plasmatique et le récepteur plasmatique de la transferrine circulante par des tests ELISA basés sur des anticorps monoclonaux (Flowers et al. 1986) / anticorps monoclonaux doubles (Flowers et al. 1989) . Des échantillons de plasma seront également analysés pour la protéine C-réactive (CRP) au KUMC. La CRP sera surveillée en tant que réactif de phase aiguë. Le Dr Cook et Mme Flowers développent actuellement une technique ELISA monoclonale pour la CRP, qui sera utilisée dans cette étude. Les matériaux de contrôle qualité commerciaux (DiaMed, Cressier sur Morat, Suisse, Sigma et Ramco) seront analysés avec toutes les séries d'échantillons analysés pour l'Hb et la ferritine.

Analyse des aliments Les céréales infantiles seront analysées pour le Fe et le calcium (Ca) par spectroscopie d'absorption atomique électrothermique/flamme (SpectrAA 400, Varian, Mulgrave, Australie) après minéralisation par digestion micro-ondes (MLS 1200) à l'aide d'un mélange HNO3/H2O2, en utilisant l'addition standard technique pour minimiser les effets de matrice. La teneur en acide phytique sera déterminée par la technique HPLC (Sandberg & Ahderinne 1986, Sandberg et al. 1989

Échantillons fécaux ; dépistage de l'infection à H. pylori et de l'ankylostomiase Des échantillons de selles seront prélevés et testés pour la présence de l'antigène H. pylori (HpSA) par un nouveau dosage immunoenzymatique (EIA). Un kit commercial polyclonal (H. antigène pylori EIA; Cat# 740096, Novitech, Fribourg, Allemagne) sera utilisé. Le test HpSA s'est avéré sensible (>80 %) et spécifique (>95 %) pour la détection de l'infection à H.pylori (Braden et al. 2000, Vakil et al. 2000, Sarker et al. communication personnelle 2003) . Des échantillons de selles seront également examinés pour la présence d'œufs de parasites, en utilisant une technique microscopique standard.

L'ANOVA statistique sera utilisée pour comparer les variables au sein de chaque groupe d'étude ainsi qu'entre les 3 groupes d'étude. Résultats avec un rapport F significatif (p