育龄妇女及其婴儿的结核感染

目标 本项目的总体目标是在怀孕期间招募的前瞻性队列中调查结核病 (TB) 感染的纵向模式和后果。 随着时间的推移，将评估孕产妇结核病感染与妊娠结局以及婴儿健康和发育之间的关系。

具体目标

1. 确定母体 TB 感染是否与不良妊娠结局相关
2. 根据产前保健登记时潜伏性结核感染的流行率，确定怀孕期间和产后发生活动性结核病的额外风险
3. 调查婴儿的长期健康和生存与母体结核病和不良妊娠结局的关系

方法 研究环境和参与者 该项目在埃塞俄比亚中部阿达玛市的公共卫生设施中进行。 参与者在产前保健 (ANC) 诊所被招募和随访，直到分娩。 分娩后，他们的孩子在诊所进行后续免疫接种计划 (EPI)；这些诊所还在第一次产后检查后对母亲进行后续跟踪。

所有研究程序，包括访谈、体格检查和收集知情同意书，均由各自诊所的医疗机构工作人员（护士和助产士）执行。 包括血液和痰在内的生物样本在各自的卫生设施实验室收集。 研究样本被运送到阿达玛地区实验室。 在这个实验室，将对血浆进行额外的分析和储存。

为了监督和监测数据收集以及数据输入，该项目使用了研究小组自 2010 年以来在阿达玛建立的实地研究站的工作人员和基础设施。

研究程序 本项目的参与者可以进行计划内和计划外的研究访问。 预定的研究访问与常规的产前和产后访问以及 EPI 诊所的访问同时进行，以按照国家指南进行婴儿免疫接种。 如果孕妇/产后/非孕妇或儿童出现提示活动性结核病的症状（根据研究定义），则在这些常规就诊之间的任何时间进行计划外就诊。

产前检查 在纳入时，收集有关社会人口状况、教育、职业和贫困指标的结构化信息；以及病史（特别是产科、妇科和结核病相关的详细信息）。 进行身体和产科检查。 除了研究程序和调查外，参与者还将根据当前的埃塞俄比亚非国大指南接受护理。

在纳入访视时，获取所有参与者的血样用于常规护理和研究特定调查。 在医疗机构实验室，进行以下分析：HIV 快速检测、尿液试纸。 收集十毫升静脉血。 该样本用于分析全血细胞计数、血液/Rh 组、梅毒血清学、肌酸酐和空腹血糖。 剩余的血浆被等分并储存在 -80° C 用于在纳入完成时进行的研究分析。 血液被单独收集用于 QuantiFERON TB Plus (QFT) 测试，以确定 LTBI 的患病率。 对于研究中的最后 500 名女性，在第​​ 3 次产前检查时重复进行 QFT 测试。 除了第 2 次和第 3 次产前检查外，在每次预定的分娩前和分娩后就诊时，都会抽取 HIV 阳性妇女的血液进行病毒载量和 CD4 计数。

根据世卫组织推荐的重点产前检查，对参与者进行四次随访，直至分娩或足月。 如果发生与健康相关的事件，他们还被指示在这些访问之间联系研究诊所。 如果在任何研究医疗机构之外的其他地方分娩（或其他意外终止妊娠），他们被要求将此告知他们的研究地点以进行进一步的后续检查。

根据研究定义（无论 Quantiferon 结果如何），所有在入组和/或随访期间疑似活动性结核病的参与者都被要求提交样本以进行细菌结核病调查。 这些包括液体培养、涂片显微镜检查和 PCR（使用 Xpert MTB/RIF 技术）。 所有这些测试都是在两个连续的早晨痰液样本上进行的。 此外，对所有因疑似活动性结核病接受调查的女性重复采集血液进行 QuantiFERON 测试。

储存的 Mtb 孵育血浆等分试样将在纳入结束时分析妊娠期间结核感染的潜在血液生物标志物。 这些分析将使用 ELISA 和/或 Luminex 技术进行，它们将包括以下免疫激活和炎症标志物：C 反应蛋白 (CRP)、新蝶呤、可溶性尿激酶-纤溶酶原激活物受体 (suPAR)、干扰素诱导蛋白10 (IP-10)。

妇女的产后随访 进一步的妇女随访安排在分娩或终止妊娠后 6 周和 9 个月，与常规的儿童免疫接种访问同时进行。 第一次产后访问在 ANC 诊所进行，而所有后续访问都在各自的 EPI 诊所进行（婴儿随访也在那里进行）。 在 6 周的产后访问中，记录分娩结果的详细信息。

为了调查分娩后的长期健康影响，参与者将被要求进行进一步的年度访问，并进行类似的评估，直到终止妊娠后 54 个月。 在所有随访中，身体检查的症状和体征将使用结构化问卷进行记录。

在纳入时，并在计划的后续访问中反复进行，参与者被告知可能表明活动性结核病的症状和体征。 如果研究对象在计划外的研究访问中出现此类症状（以便在随访期间评估活动性结核病），则指示研究对象直接联系研究现场诊所（产前期间的 ANC，产后期间的 EPI）。

在所有访视中，无论是预定的还是非预定的，细菌学检测（涂片显微镜检查、Xpert MTB/RIF 检测和液体培养）均根据研究方案进行，以符合疑似活动性结核病的病例研究标准。 这些测试是在两个早晨的痰液样本上进行的。

如果研究参与者没有来参加他们预定的研究访问，研究现场工作人员和/或研究小组会通过电话与他们联系。 如果无法联系到参与者，将通过电话联系她的联系人。 在预定访问的中间时间，当地研究团队的一名成员通过电话与妇女联系，以评估是否发生了与结核病相符的任何健康事件或症状。

将在纳入后 4 年对所有女性进行 QFT 测试的重复采样（无论之前的 QFT 结果如何），并储存孵育的血浆以进一步分析 TB 感染的免疫标志物。

婴儿的随访 如果母亲同意，婴儿将在出生后尽快登记并纳入单独的婴儿随访队列。 出生详细信息，包括分娩方式、体重、身长、APGAR 评分和头围，均在婴儿出生时进行登记。 纳入婴儿的随访在各自研究医疗机构的 EPI 诊所进行。 后续访问安排在与母亲相同的时间间隔，即在 6 周和 9 个月，随后每年与母亲的时间间隔一致，直到出生后四年半。 两次首次访问与常规免疫访问同时进行。 在所有研究访问中，使用结构化问卷记录生长、营养和神经发育参数。 此外，还记录了社会人口特征、健康相关事件和喂养细节的数据，以及已知或疑似结核病暴露的数据。

在纳入时，并在定期的随访中反复进行，看护人员会被告知可能表明活动性儿科结核病的症状和体征。 如果婴儿在计划外的研究访视中出现此类症状（以便在随访期间评估活动性结核病），研究婴儿看护人被指示直接联系研究地点的 EPI 诊所。

如果在后续细菌学调查（液体培养、PCR 和显微镜检查）期间的任何时间满足疑似结核病的标准，将对洗胃标本（或疑似脑膜炎情况下的脑脊液；或细针淋巴结抽吸物，以防万一）外周淋巴结肿大）。 这些调查将由阿达玛地区医院儿科训练有素的医护人员进行。

储存的血浆等分试样将在纳入结束时分析幼儿结核病的潜在血液生物标志物。 这些分析将使用 ELISA 和 Luminex 技术进行，它们将包括以下免疫激活和炎症标志物：C 反应蛋白 (CRP)、新蝶呤、可溶性尿激酶纤溶酶原激活物受体 (suPAR)。

如果婴儿参与者没有来参加他们预定的研究访问，研究现场工作人员和/或研究小组将通过电话联系他们的看护人。 如果无法联系到看守人，可通过电话联系联系人。 在预定访问之间的中间时间，研究调查员通过电话联系看护人，以评估婴儿是否出现任何与结核病相符的健康事件或症状。

研究定义 疑似成人活动性结核病定义为以下任何症状或发现：咳嗽、发烧、盗汗、体重减轻（分娩后除外）、胸痛、Karnofsky 体能评分降低（怀孕后）、外周淋巴结肿大、腹部腹胀和/或腹部肿块（在没有怀孕的研究期间）。

疑似儿童活动性结核病定义为以下任何症状或发现：咳嗽、发烧、盗汗、胸痛、外周淋巴结肿大、腹胀和/或肿块、体重减轻、生长发育不良、发育迟缓、急性或慢性营养不良、颈部僵硬、癫痫发作和意识丧失 潜伏性结核感染定义为 QuantiFERON® TB Gold Plus 结果阳性（根据制造商的参考范围），但没有确诊的活动性结核病和/或国家结核病指南标准临床诊断为结核病。

确诊的活动性结核病被定义为细菌学结果呈阳性（根据国家结核病指南）的任何受试者，无论其临床表现如何。

临床诊断的活动性结核病定义为没有结核病细菌学阳性结果，但符合临床诊断的结核病的国家结核病指南标准，并且转诊接受抗结核病治疗的任何受试者。

不良妊娠结局定义为纳入后至意外终止妊娠后 3 个月内的母婴死亡；早产（妊娠 37 周前）；自然流产; PE（由国际妊娠期高血压研究学会定义；25）；宫内发育迟缓；围产期出血。

子宫内生长受限定义为出生时体重生长偏差低于 2 标准差（-22% 或低于第三个四分位数）。

产后结核病定义为在终止妊娠后 6 个月内确诊或临床诊断为活动性结核病。