瘤内注射自体 CD1c (BDCA-1)+ 髓样树突状细胞加 Talimogene Laherparepvec (T-VEC) (myDCTV)

在过去几年中，很明显癌细胞可以被患者自身的免疫系统识别。 发挥作用的免疫机制通常被称为“癌症免疫循环”（Chen 和 Mellman 2013；Mellman 2013；Chen 和 Mellman 2017）。 通过阻断抑制性 T 细胞受体 CTLA-4 和/或 PD-1/-L1 轴，已经实现了显着的抗肿瘤活性。 通过单克隆抗体 (mAb) 疗法抑制免疫检查点已成为晚期黑色素瘤、肾细胞癌、非小细胞肺癌、霍奇金淋巴瘤和膀胱癌患者的标准治疗。 适应症仍在扩大。 PD-1 和 CTLA-4 抑制的活性与预先存在的抗肿瘤 T 细胞反应的标志相关（例如 肿瘤微环境 (TME) 中存在细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL)、响应 T 细胞分泌的 IFN-γ 的 PD-L1 表达和 CTL 活性的转录证据）、癌细胞的突变负荷和高度免疫原性的存在癌细胞基因组中的新表位 (Tumeh, Harview et al. 2014)。 在免疫逃避肿瘤中，髓样树突状细胞 (myDC) 在调节 TME 内的抗肿瘤 CTL 活性方面​​起着关键作用（Broz、Binnewies 等人，2014 年）。 在动物模型中，myDC 已被证明在“许可”抗肿瘤 CTL 根除肿瘤细胞中发挥重要作用。 WNT/β-连环蛋白通路等致癌信号通路的激活可导致髓样 DC 从 TMZ 中排除（Spranger、Bao 等人 2015 年；Spranger 和 Gajewski 2016 年）。 浸润边缘和转移灶内 myDCs 的缺失与 CTL 激活缺陷相关，允许转移灶逃避抗肿瘤免疫反应 (Salmon, Idoyaga et al. 2016)。 这些 myDC 还会迁移到肿瘤引流淋巴结，并将肿瘤抗原呈递给这些次级淋巴器官中的 T 细胞 (Roberts, Broz et al. 2016)。 与来自癌症基因组图谱的 266 个黑色素瘤中的新抗原负荷相比，骨髓 DC 的存在与 T 细胞浸润到肿瘤中的相关性更强（Spranger，Luke 等人，2016 年）。 人类 myDC 存在于两个子集中，这两个子集通过 BDCA-1 或 BDCA-3 表面标记的表达来区分。 CD1c (BDCA-1)+ 抗原在人树突细胞上特异性表达，即 CD11chighCD123low，代表人血液中 myDC 的主要子集（约占所有外周血单核细胞 (PBMC) 的 0.6%）。 CD1c (BDCA-1)+ myDC 具有单核细胞形态，表达骨髓标记物，如 CD13 和 CD33 以及 Fc 受体，如 CD32、CD64 和 FceRI。 此外，myDC 被确定为 CD4+、Lin（CD3、CD16、CD19、CD20、CD56）-、CD2+、CD45RO+、CD141 (BDCA-3)-low、CD303 (BDCA-2)- 和 CD304 (BDCA-4 /Neuropilin-1)-。 一部分 CD1c (BDCA-1)+ myDC 共同表达 CD14 和 CD11b。 这些 CD14+ 和 CD1c (BDCA-1) 双阳性细胞具有免疫抑制能力并在体外抑制 T 细胞增殖。 在将 CD1c (BDCA-1)+ 细胞用于免疫刺激目的之前，最好先去除这种细胞类型（Bakdash、Buschow 等人 2016 年；Schroder、Melum 等人 2016 年）。 CD1c (BDCA-1)+ myDC 在免疫原性细胞死亡后肿瘤抗原的交叉呈递中发挥重要作用 (Di Blasio, Wortel et al. 2016)。 在肿瘤生长条件下，myDC 很难被肿瘤微环境募集，不会被激活，因此无法有效协调肿瘤微环境内的抗肿瘤免疫，也无法在肿瘤引流淋巴结内呈递肿瘤相关抗原。 当适当激活时，人类 CD1c (BDCA-1)+ 树突细胞会分泌高水平的 IL-12 并有效启动 CTL 反应（Nizzoli、Krietsch 等人，2013 年）。 在体外，外源性 IFN-γ 可以促进 CD1c (BDCA-1)+ myDC 产生 IL-12。 (Nizzoli, Krietsch et al. 2013) CD1c (BDCA-1)+ myDC 在分离后 12 小时内自发“部分成熟”。 只有在 Toll 样受体刺激后才能实现 IFN-γ 分泌以及受刺激的 T 淋巴细胞向 Th1 表型定向的最佳成熟。（Skold， 范比克等。 2015) Talimogene laherparepvec (T-VEC; Imlygic) 是一种一流的溶瘤病毒，基于改良的 1 型单纯疱疹病毒 (HSV)，旨在选择性地复制和裂解肿瘤细胞，同时促进区域和全身抗肿瘤免疫。 T-VEC 通过删除两个非必需的病毒基因进行修饰。 疱疹病毒神经毒力因子基因 (ICP34.5) 的功能性缺失 减弱病毒致病性并增强肿瘤选择性复制。 通过删除 ICP47 基因进一步修饰 T-VEC，以减少病毒介导的抗原呈递抑制并增加 HSV US11 基因的表达。 编码人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF) 的基因的插入和表达导致局部 GM-CSF 产生以募集和激活抗原呈递细胞，随后诱导肿瘤特异性 T 细胞反应。 T-VEC 已在早期研究中进行了评估，证明了 GM-CSF 的肿瘤内复制和表达以及病灶内给药后可接受的安全性（低烧、寒战、肌痛和注射部位反应）。 在一项单臂 II 期研究中，IIIc 至 IV 期黑色素瘤患者的总缓解率 (ORR) 为 26%，在注射和非注射病变（包括内脏病变）中均观察到反应。 消退病变的活检表明产生 IFN 的 MART-1 特异性 CD8+ T 细胞的反应和存在与 CD4+ FoxP3+ 调节性 T 细胞减少之间存在关联，这与宿主抗肿瘤免疫的诱导一致。 T-VEC 在晚期黑色素瘤中的疗效和毒性在一项比较肿瘤内 T-VEC 注射与皮下 GM-CSF 注射的随机 III 期试验中进行了评估。 使用 T-VEC，主要终点持久反应率（DRR；连续反应持续 > 6 个月）显着更高（16% 对 2%；比值比，8.9；P,.001），ORR 改善（26% 对6%)，总生存期 (OS) 在数字上改善了 4.4 个月，但没有统计学意义（风险比，0.79；95% CI，0.62 至 1.00；P = .051）。 在注射和未注射 T-VEC 的肿瘤中均观察到肿瘤消退。 3/4 级 T-VEC 相关不良事件 (AE) 的发生率为 11%。 （Andtbacka、Kaufman 等人，2015 年）在一项开放标签、多中心、Ib 期试验中，T-VEC 与 ipilimumab 的组合具有可耐受的安全性，并且该组合似乎比 T-VEC 或 ipilimumab 具有更高的疗效单一疗法。 (Puzanov, 米尔海姆等。 2016）根据 ORR 和 CR 率评估，T-VEC 与派姆单抗（一种抗 PD1 单克隆抗体）的组合与晚期黑色素瘤的临床获益相关（Ribas，Dummer 等人，2017 年）。 一项比较 T-VEC 加帕博利珠单抗与 T-VEC 安慰剂加帕博利珠单抗的随机、双盲 3 期试验正在进行中。 在此 I 期临床试验中，我们建议研究肿瘤内注射自体 CD1c (BDCA-1)+ myDC 在黑色素瘤非内脏转移中的安全性加上肿瘤内注射 T-VEC（以其批准的剂量和方案治疗黑色素瘤黑色素瘤）。

我们假设转移的 T-VEC 发炎肿瘤微环境中的 CD1c (BDCA-1)+ myDC 将在体内捕获肿瘤抗原，并通过这些抗原的交叉呈递协调有效的抗肿瘤 T 细胞反应。