Внутриопухолевая инъекция аутологичных CD1c (BDCA-1)+ миелоидных дендритных клеток плюс талимоген лагерпарепвек (T-VEC) (myDCTV)

За последние несколько лет стало очевидным, что раковые клетки могут распознаваться собственной иммунной системой пациента. Действующие иммунологические механизмы часто называют «иммунным циклом рака» (Chen and Mellman 2013; Mellman 2013; Chen and Mellman 2017). Выдающаяся противоопухолевая активность была достигнута путем блокирования ингибирующего Т-клеточного рецептора CTLA-4 и/или оси PD-1/-L1. Ингибирование иммунных контрольных точек с помощью терапии моноклональными антителами (мАт) стало стандартом лечения пациентов с прогрессирующей меланомой, почечно-клеточным раком, немелкоклеточным раком легкого, лимфомой Ходжкина и раком мочевого пузыря. Показания все еще расширяются. Активность ингибирования PD-1 и CTLA-4 коррелирует с признаками существовавшего ранее противоопухолевого Т-клеточного ответа (например, наличие цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) в микроокружении опухоли (ТМО), экспрессия PD-L1 в ответ на секретируемый Т-клетками IFN-гамма и транскрипционные доказательства ЦТЛ-активности), мутационная нагрузка раковых клеток и наличие высокоиммуногенных неоэпитопы в геноме раковых клеток (Tumeh, Harview et al. 2014). В иммуноускользающих опухолях ключевую роль приписывают миелоидным дендритным клеткам (myDC) в регуляции активности противоопухолевой активности CTL в TME (Broz, Binnewies et al. 2014). В моделях на животных было продемонстрировано, что myDC играет важную роль в «лицензировании» противоопухолевых CTL для уничтожения опухолевых клеток. Активация онкогенных сигнальных путей, таких как путь WNT/beta-Catenin, может привести к исключению миелоидных DC из TMZ (Spranger, Bao et al. 2015; Spranger and Gajewski 2016). Отсутствие myDCs на границе инвазии и внутри метастазов коррелирует с дефектной активацией ЦТЛ, что позволяет метастазам избежать противоопухолевого иммунного ответа (Salmon, Idoyaga et al. 2016). Эти myDC также мигрируют в дренирующие опухоль лимфатические узлы и представляют опухолевые антигены Т-клеткам в этих вторичных лимфоидных органах (Roberts, Broz et al. 2016). Наличие миелоидных ДК более сильно коррелировало с инфильтрацией Т-клеток в опухоли по сравнению с неоантигенной нагрузкой в ​​266 меланомах из Атласа генома рака (Spranger, Luke et al. 2016). MyDCs человека существуют в двух подмножествах, которые различаются по экспрессии поверхностного маркера BDCA-1 или BDCA-3. Антиген CD1c (BDCA-1)+ специфически экспрессируется на дендритных клетках человека, которые являются CD11chighCD123low и представляют собой основное подмножество myDCs в крови человека (около 0,6% всех мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC)). CD1c (BDCA-1)+ myDC имеют моноцитоидную морфологию и экспрессируют миелоидные маркеры, такие как CD13 и CD33, а также рецепторы Fc, такие как CD32, CD64 и FceRI. Кроме того, myDC определяются как CD4+, Lin (CD3, CD16, CD19, CD20, CD56)-, CD2+, CD45RO+, CD141 (BDCA-3)-low, CD303 (BDCA-2)- и CD304 (BDCA-4). /Нейропилин-1)-. Часть CD1c (BDCA-1) + myDC коэкспрессирует CD14 и CD11b. Эти двойные положительные клетки по CD14+ и CD1c (BDCA-1) обладают иммуносупрессивной способностью и ингибируют пролиферацию Т-клеток in vitro. Истощение этого типа клеток предпочтительно перед использованием клеток CD1c (BDCA-1)+ для иммуностимулирующих целей (Bakdash, Buschow et al. 2016; Schroder, Melum et al. 2016). CD1c (BDCA-1) + myDC играют важную роль в перекрестной презентации опухолевых антигенов после иммуногенной гибели клеток (Di Blasio, Wortel et al. 2016). В условиях роста опухоли myDC будут плохо рекрутироваться в микроокружение опухоли, не активироваться и, таким образом, не смогут эффективно координировать противоопухолевый иммунитет в микроокружении опухоли и представлять антигены, ассоциированные с опухолью, в дренирующих опухоль лимфатических узлах. При соответствующей активации дендритные клетки CD1c (BDCA-1)+ человека секретируют высокие уровни IL-12 и сильно стимулируют ответы ЦТЛ (Nizzoli, Krietsch et al. 2013). In vitro продукция IL-12 CD1c (BDCA-1) + myDC может быть усилена экзогенным IFN-gamma. (Nizzoli, Krietsch et al. 2013) CD1c (BDCA-1)+ myDC спонтанно «частично созревают» в течение 12 часов после их выделения. Оптимальное созревание с секрецией IFN-gamma, а также ориентация стимулированных Т-лимфоцитов на фенотип Th1 достигается только после стимуляции Toll-подобных рецепторов (Skold, ван Бик и др. 2015) Talimogene laherparepvec (T-VEC; Imlygic) представляет собой первый в своем классе онколитический вирус, основанный на модифицированном вирусе простого герпеса (ВПГ) типа 1, предназначенный для избирательной репликации и лизиса опухолевых клеток при стимулировании регионального и системного противоопухолевого иммунитета. T-VEC модифицируется путем делеции двух несущественных вирусных генов. Функциональная делеция гена фактора нейровирулентности вируса герпеса (ICP34.5) ослабляет патогенность вируса и усиливает селективную репликацию опухоли. T-VEC дополнительно модифицируют путем делеции гена ICP47, чтобы уменьшить опосредованное вирусом подавление презентации антигена и увеличить экспрессию гена HSV US11. Вставка и экспрессия гена, кодирующего колониестимулирующий фактор макрофагов гранулоцитов человека (GM-CSF), приводит к локальной продукции GM-CSF для рекрутирования и активации антигенпрезентирующих клеток с последующей индукцией опухолеспецифических Т-клеточных ответов. T-VEC оценивали в исследованиях ранней фазы, которые продемонстрировали внутриопухолевую репликацию и экспрессию GM-CSF, а также приемлемый профиль безопасности (субфебрильная температура, озноб, миалгии и реакции в месте инъекции) после внутриочагового введения. В исследовании фазы II с одной группой общая частота ответа (ЧОО) составила 26% у пациентов с меланомой стадии от IIIc до IV, при этом ответы наблюдались как при инъекционных, так и неинъекционных поражениях, включая висцеральные поражения. Биопсия регрессирующих очагов показала связь между реакцией и наличием IFN-продуцирующих MART-1-специфических CD8+ Т-клеток и снижением CD4+ FoxP3+ регуляторных Т-клеток, что согласуется с индукцией противоопухолевого иммунитета хозяина. Эффективность и токсичность T-VEC при распространенной меланоме оценивали в рандомизированном исследовании III фазы, в котором сравнивали внутриопухолевые инъекции T-VEC с подкожными инъекциями GM-CSF. При использовании T-VEC первичная конечная точка стойкого ответа (DRR; непрерывный ответ продолжительностью > 6 месяцев) была значительно выше (16% против 2%, отношение шансов 8,9; P<0,001), ORR улучшилась (26% против 6%), а общая выживаемость (ОВ) улучшилась численно, но не статистически, на 4,4 месяца (отношение рисков 0,79; 95% ДИ от 0,62 до 1,00; P = 0,051). Регрессию опухоли наблюдали в опухолях, как инъецированных, так и не инъецированных T-VEC. Частота нежелательных явлений (НЯ), связанных с T-VEC 3/4 степени, составила 11%. (Andtbacka, Kaufman et al. 2015) В открытом многоцентровом исследовании фазы Ib комбинация T-VEC с ипилимумабом имела приемлемый профиль безопасности, и эта комбинация оказалась более эффективной, чем T-VEC или ипилимумаб. монотерапия. (Пузанов, Мильхем и др. 2016) Комбинация T-VEC плюс пембролизумаб (моноклональное антитело против PD1) ассоциировалась с клинической пользой при распространенной меланоме, что оценивалось по ЧОО и частоте полного ответа (Ribas, Dummer et al. 2017). Рандомизированное двойное слепое исследование фазы 3 комбинации T-VEC плюс пембролизумаб по сравнению с плацебо T-VEC плюс пембролизумаб продолжается. В этой фазе I клинического исследования мы предлагаем исследовать безопасность внутриопухолевой инъекции аутологичного CD1c (BDCA-1) + myDC при невисцеральных метастазах меланомы в сочетании с внутриопухолевой инъекцией T-VEC (в утвержденной дозе и схеме для лечения меланома).

Мы предполагаем, что CD1c (BDCA-1) + myDC в микроокружении воспаленной опухоли T-VEC метастазов будет захватывать опухолевые антигены in vivo и посредством перекрестной презентации этих антигенов координировать эффективный противоопухолевый Т-клеточный ответ.