CRISPR基因工程抑制细胞内免疫检查点CISH编码基因的肿瘤浸润淋巴细胞治疗转移性胃肠癌的研究

纳入标准：

• 至少接受过一次一线标准治疗后伴有进展性疾病的转移性胃肠道上皮癌的诊断。 如果可用，将获得原始诊断的存档组织用于研究相关测试。
• 必须具有符合 RECIST 1.1 的可测量疾病，其中至少有一个病灶被确定为可切除以产生 TIL（所需的最小肿瘤组织体积为 1 cm^2 作为单个肿块或碎片）并且至少有一个其他病灶符合 RECIST 标准以用于可测量服务作为疾病反应的指标。 产生 TIL 的肿瘤位置和用于获得的方法（即 腹腔镜、内窥镜超声等）将根据患者的个体疾病来确定。
• 有 3 个或更少的直径小于 1 厘米且无症状的脑转移的患者符合条件。 经立体定向放射外科治疗的病变必须在治疗后临床稳定 1 个月，患者才有资格参加。 手术切除脑转移的患者符合条件。 患者不得接受全身性类固醇。
• 使用神经肿瘤学脑转移反应评估 (RANO-BM) 标准评估脑转移。
• 年龄≥18岁且≤70岁。
• ECOG 0 或 1 的临床表现状态。

• 研究入组后 3 个月内的血清学检测（肿瘤采集）：

  • HIV 抗体血清阴性。 （本方案中正在评估的研究性治疗取决于完整的免疫系统。 HIV 血清反应阳性的患者可能免疫能力下降，因此可能对研究治疗的反应较弱，更容易受到其毒性的影响。）
  • 乙肝抗原血清反应阴性，丙肝抗体血清反应阴性。 如果丙型肝炎抗体检测呈阳性，则必须通过 RT-PCR 检测患者是否存在抗原并且 HCV RNA 呈阴性。
  • 抗 HBc、HBV/HCV/HIV-1 NAT、抗 HTLV-I/II、抗 T.cruzi、 西尼罗河病毒 NAT、抗 CMV 和 RPR。 （注意：根据 FDA 网站的更新，可能需要进行其他血液病毒检测：https://www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/SafetyAvailability/TissueSafety/ucm095440.htm#approved）

• 研究登记后 14 天内的血液学：

  • 中性粒细胞绝对计数 > 1000/mm^3 没有非格司亭的支持
  • 白细胞≥3000/mm^3
  • 血小板计数 ≥ 75,000/mm^3
  • 血红蛋白 > 8.0 克/分升。 可以对受试者进行输血以达到该截止值。

• 研究入组后 14 天内的足够器官功能定义为：

  • 血清 ALT 和 AST ≤ 5.0 x ULN
  • 血清肌酐≤ 1.6 mg/dl
  • 总胆红素≤ 2.0 mg/dl，吉尔伯特综合征患者除外，他们的总胆红素必须≤ 3.0 mg/dl。
• 自患者接受准备性方案时的先前全身治疗以来必须超过 4 周，并且急性毒性必须恢复到 1 级或更低（脱发或白斑等毒性除外）。 在肿瘤收集和开始使用氟达拉滨和环磷酰胺之间允许进行适合疾病的标准治疗。 禁止进行研究性治疗。

注意：只要所有毒性都恢复到 1 级或以下，患者可能在准备治疗开始后的 3 周内接受过小手术。

• 愿意在肿瘤采集前接受门诊非流动性白细胞分离术（采集 3 小时）
• 同意在 CISH KO TILs 输注后一直留在双城都市区（距离明尼苏达大学 1 小时车程以内）直至治疗结束访视（第 28 天）
• 在执行任何研究相关程序之前自愿书面同意

排除标准：

• 由于治疗对胎儿或婴儿有潜在危险影响的孕妇或哺乳期妇女。 有生育能力的女性（定义为前 12 个月内有月经和/或 FSH ≤ 40 IU/L）必须在入组后 7 天内进行阴性妊娠试验（血清或尿液）。 需要在开始准备性化疗后 7 天内再次进行阴性妊娠试验。
• 任何形式的原发性免疫缺陷（如严重联合免疫缺陷病）。
• 并发机会性感染（本方案中评估的治疗取决于完整的免疫系统。 免疫能力下降的患者可能对治疗的反应较差，并且更容易受到其毒性的影响）。
• 需要抗感染治疗的活动性全身感染、凝血障碍或任何其他活动性重大疾病。
• 同时进行全身类固醇治疗。
• 对环磷酰胺、氟达拉滨或阿地白介素有严重速发型超敏反应史。
• 冠状动脉血运重建史或缺血症状。

• 记录在案的 LVEF ≤ 45% 在患者中测试：

  • 年龄 ≥ 65 岁和/或
  • 具有临床意义的房性和/或室性心律失常，包括但不限于：心房颤动、室性心动过速、二度或三度心脏传导阻滞，或有缺血性心脏病和/或胸痛病史。 存在心脏危险因素（例如，糖尿病、高血压、肥胖）的年龄 < 65 岁的患者可以进行如上所述的心脏评估。
• 在 PI 的判断中，具有临床意义的患者病史会损害患者耐受高剂量阿地白介素的能力。

• 在以下患者中记录的 FEV1 ≤ 50% 预测测试：

  • 长期吸烟史（过去 2 年内每年约 20 包）和/或
  • 呼吸功能障碍的症状
• 接收任何调查代理。

CY/FU 开始之前的资格确认：

由于研究登记和研究治疗开始之间有 10-12 周或更长时间的延迟，必须满足以下资格标准：

• ECOG 0 或 1 的临床表现状态

• 开始淋巴细胞清除化疗后 7 天内的血液学：

  • 中性粒细胞绝对计数 > 1000/mm^3 没有非格司亭的支持
  • 白细胞≥3000/mm^3
  • 血小板计数 ≥ 100,000/mm^3
  • 血红蛋白 > 8.0 克/分升。 可以对受试者进行输血以达到该截止值。

• 淋巴细胞耗竭化疗开始后 7 天内器官功能正常：

  • 血清 ALT 和 AST ≤ 5.0 x ULN
  • 血清肌酐≤ 1.6 mg/dl
  • 总胆红素≤ 2.0 mg/dl，吉尔伯特综合征患者除外，他们的总胆红素必须≤ 3.0 mg/dl。
• 淋巴细胞清除化疗开始后 3 个月内检测的 HIV 抗体、乙型肝炎抗原和丙型肝炎抗体血清反应呈阴性。 如果丙型肝炎抗体检测呈阳性，则必须通过 RT-PCR 检测患者是否存在抗原并且 HCV RNA 呈阴性
• 自上一次全身治疗和淋巴细胞耗竭化疗开始以来必须超过 4 周，并且急性毒性必须恢复到 1 级或更低（脱发或白斑等毒性除外）。
• 有生育能力的性活跃女性和有生育能力女性伴侣的男性必须同意在研究治疗期间使用有效的避孕措施，从第一剂氟达拉滨开始，到最后一剂阿地白介素后 4 个月。 有效避孕的例子包括宫内节育器或植入物加避孕套。 无生育能力的女性被定义为没有子宫、输卵管结扎、或因卵巢功能衰竭或手术切除卵巢而永久停止卵巢功能的女性。 如果女性已闭经 > 12 个月和/或 FSH > 40 IU/L，则也被认为是自然不育。
• 有生育能力的女性在开始淋巴细胞清除化疗后 7 天内妊娠试验阴性。
• 在登记研究者看来，医疗状况或社会状况的变化不会使参与研究不符合患者的最佳利益。
• 继续同意在 CISH KO TILs 输注后一直留在双子城都市区（距离明尼苏达大学 1 小时车程以内）直至治疗结束访视（第 28 天）
• 在淋巴细胞清除化疗开始前 28 天内自愿签署研究治疗同意书。