结节病对 SARS-CoV-2/COVID-19 疫苗接种的免疫反应

简介、假设和具体目标

感染 SARS-CoV-2 的结节病患者，尤其是肺部和/或心脏受累明显的患者，因 COVID-19 发生并发症或死亡的风险可能增加。 虽然 SARS-CoV-2 疫苗在普通人群中预防 COVID-19 非常有效，但疫苗接种是否能为结节病患者提供类似的保护尚不清楚。 研究人员假设，结节病患者对 SARS-CoV-2 疫苗接种产生的抗体和分化簇 4 (CD4)+ T 细胞介导的免疫反应比健康人弱，这既是疾病本身的结果，也是由于用免疫抑制药物治疗。

具体目标 1. 与年龄和性别匹配的健康对照相比，确定接受和未接受免疫抑制药物治疗的结节病患者接种 SARS-CoV-2 疫苗后的血液抗 SARS-CoV-2 刺突蛋白 IgG 抗体水平。

具体目标 2. 与年龄和性别匹配的健康人相比，确定接受和未接受免疫抑制药物治疗的结节病患者接种 SARS-CoV-2 疫苗后 SARS-CoV-2 特异性外周血 CD4+ T 细胞激活水平控制。

这项调查的结果将解决结节病患者对疫苗反应的理解上的一个关键差距。 此外，该研究将提供必要的知识，让临床医生就 SARS-CoV-2 疫苗接种后的感染风险向结节病患者提出建议，并将有助于为未来的试验奠定基础，以评估疫苗加强剂对贫困人群的可能益处对初始疫苗接种的免疫反应。

背景

过去一年安全有效的 SARS-CoV-2 疫苗的开发代表了在控制 COVID-19 大流行的斗争中的科学胜利和公共卫生突破。 美国人口正在进行的疫苗接种与报告的 COVID-19 病例减少了 12 倍以上，从 2021 年 1 月的平均每天 260,000 例减少到撰写本文时（2021 年 5 月 29 日）的每天 21,000 例。 不幸的是，世界其他地区的情况并非如此，尤其是全球南方的低收入和中等收入国家，那里的疫苗供应受到严重限制，疫苗接种率迄今为止也很低。 尽管不及国际上的不平等，但美国境内各群体在疫苗获取和使用方面存在差异，非裔美国人、拉丁美洲人和其他人群的疫苗接种率较低。 因此，这些群体的成员仍然面临更高的风险，并将继续承受不成比例的 COVID-19 负担。

另一个患 COVID-19 风险增加的群体包括患有疾病或正在接受导致免疫抑制治疗的人，因此他们可能无法对 SARS-CoV-2 疫苗接种产生保护性免疫反应。 例如，最近的报告表明，在相当大比例的实体器官移植受者和血液系统恶性肿瘤患者中，对 SARS-CoV-2 信使 RNA (mRNA) 疫苗的抗体反应并不理想。 有关结缔组织和其他慢性炎症性疾病患者的数据好坏参半，最近的一些研究表明，即使在接受免疫抑制治疗的患者中，SARS-CoV-2 疫苗也能产生强烈的抗体反应，而另一份报告发现，此类患者的抗体反应降低， /或延迟。 值得注意的是，在后一项研究中，抗体反应降低与免疫介导的炎症性疾病的存在有关，但在服用特定免疫抑制药物的患者中可能性不大。 相比之下，最近的另一项研究发现，甲氨蝶呤的使用与抗体和分化簇 8 (CD8)+ T 细胞对 SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNA 疫苗的反应降低有关，而其他口服免疫调节药物和肿瘤坏死因子 (TNF) ) 抑制剂似乎没有这样的效果。

结节病患者对 SARS-CoV-2 疫苗接种的免疫反应是否受损尚不清楚。 这是一个关键问题，因为结节病患者发生 COVID-19 严重不良后果的风险可能增加。 关于结节病对其他疫苗反应的文献很少。 一项研究报告说，与健康对照组相比，未经治疗的结节病患者对流感疫苗的抗体反应没有差异。 相比之下，在另一份报告中，结节病患者对破伤风疫苗的抗体反应降低，其中 52% 正在口服皮质类固醇，尽管疫苗反应的损害与皮质类固醇治疗无关。 目前还没有关于结节病中 T 淋巴细胞对疫苗接种反应的公开数据，尽管观察到 CD4+ T 细胞活化和增殖在活动性结节病中受损表明 T 细胞对 SARS-CoV-2 疫苗接种的反应也可能降低。 在缺乏针对该疾病的更好数据的情况下，一组国际专家最近强烈建议对结节病患者接种 SARS-CoV-2 疫苗，并根据类风湿性关节炎患者对其他疫苗的反应信息推断，建议一种在疫苗接种前后调整免疫调节药物的算法。

缺乏关于结节病对 SARS-CoV-2 疫苗接种的免疫反应的信息表明，迫切需要研究来解决这个问题。 拟议的调查将通过评估抗体和 T 细胞对未经治疗的结节病患者和接受免疫调节剂治疗的其他人与健康对照组相比对 SARS-CoV-2 疫苗接种的反应来填补这一关键知识空白。

研究计划

一般的。 将获得西北大学机构审查委员会的批准。 该研究将在 clinicaltrials.gov 注册 在研究开始日期之前。

研究参与者。 三组女性和男性受试者，他们都将完成初级疫苗接种，或初级疫苗接种加加强疫苗接种，使用美国目前授权的三种 SARS-CoV-2 疫苗之一（BNT162b2 [Pfizer-BioNTech]，mRNA- 1273 [Moderna] 或 JNJ-78436735 [Johnson & Johnson]) 至少 2 周前，将研究：1) 未接受免疫抑制药物治疗的结节病患者； 2) 接受免疫抑制药物治疗的结节病患者，包括全身性皮质类固醇、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、霉酚酸酯、来氟米特和抗 TNF 单克隆抗体； 3) 没有结节病、其他免疫介导疾病、慢性肺病、心脏病或恶性肿瘤，并且没有服用免疫调节药物的个体[健康对照]。 接受和未接受免疫抑制药物治疗的结节病受试者将从在西北医学结节病计划的肺部和心脏病学诊所随访的既定患者中招募。 将从西北医学界和整个社区的成员中招募与结节病受试者年龄和性别相匹配的健康对照受试者。 将记录所有受试者的人口统计信息、接种 SARS-CoV-2 疫苗的日期和类型，以及先前检测 SARS-CoV-2 感染或有症状的 COVID-19 的历史。 对于结节病受试者，将记录结节病诊断方法、疾病持续时间、过去和现在结节病药物治疗、其他当前药物治疗、合并症、烟草和其他物质使用以及职业的详细信息。 对于健康控制，当前的药物治疗、过去的病史、烟草和其他物质的使用以及职业也将同样被记录下来。

具体目标 1. 从所有受试者中获取静脉血，分离血清，等分并冷冻用于后续分析。 在对接受和未接受免疫抑制药物治疗的结节病患者接种 SARS-CoV-2 疫苗后，将测量血清抗 SARS-CoV-2 刺突蛋白 IgG，并使用 LIAISON SARS-CoV-2 测量年龄和性别匹配的健康对照TrimericS IgG 测定（Diasorin）。 这是针对 SARS-CoV-2 三聚刺突蛋白受体结合域的 IgG 抗体的高度灵敏和特异的第二代检测方法。 该测定已针对单独的 SARS-CoV-2 病毒中和测定进行了校准，曲线下的接收器操作特征区域用于检测病毒中和能力为 0.996 的抗体。 Diasorin TrimericS IgG 测定于 2021 年 5 月 19 日获得 FDA 的紧急使用授权，并将取代第一代 LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG 测定，后者本身与五种商业 SARS-CoV 中的病毒中和能力相关性最高-2 抗体检测在最近的一项研究中。 应该注意的是，中和抗体水平可以高度预测对症状性 SARS-CoV-2 感染的免疫保护。 血清样本将在 -80°C 下冷冻保存，并在受试者登记和样本采集完成后作为一批进行检测。

功效分析：根据最近一项关于接受免疫抑制治疗的风湿病患者对 SARS-CoV2 疫苗接种的抗体反应的研究数据推断，在线样本量计算器 ClinCalc.com 用于确定与健康对照组相比，每组最多需要 80 名受试者才能检测到任一类肉瘤组的平均抗体水平降低 20%，α 0.05 时的功效为 0.80。

特定目标 2. 外周血单核细胞 (PBMC) 将从两个结节病组和健康对照者各 10 名受试者的抗凝静脉血中分离，通过 Ficoll-Paque 离心，洗涤，重悬于 10% 二甲基亚砜/胎牛血清中并冷冻保存在-80°C。 SARS-CoV-2 特异性 CD4+ T 细胞活化将使用来自接受和未接受免疫抑制药物治疗的结节病受试者的 PBMC 进行检测，并使用干扰素-γ EliSpotPLUS 检测（Mabtech）检测年龄和性别匹配的健康对照。 PBMC 将用 SARS-CoV-2 刺突蛋白和核衣壳蛋白肽库（BEI Resources）或抗分化簇 3 (CD3) 抗体 (Mabtech) 作为阳性对照进行刺激，如所述 (19)。 PBMC 将在 -80°C 下冷冻保存，然后解冻，重新悬浮在培养基中，并在受试者登记和样本采集完成后作为一批进行检测。 或者，将使用 SARS-CoV-2 QuantiFERON 测定法（Qiagen）在抗凝全血中评估 T 细胞对疫苗接种的反应。

统计分析。 组均值之间差异的显着性将通过方差分析和 Dunnett 多重比较检验来确定。 P < 0.05 将被认为是显着的。